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实时荧光定量PCR与普通RT-PCR检测粪肠球菌esp基因的差异

作　者: 董海华
导　师: 牛卫东
学　校: 大连医科大学
专　业: 口腔内科学
关键词: 粪肠球菌 esp RT-PCR 实时荧光定量PCR
分类号: R440
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:比较实时荧光定量PCR与RT-PCR检测粪肠球菌毒力因子esp,评价实时荧光定量PCR技术测定粪肠球菌RNA水平的价值。方法:提取粪肠球菌标准株临床样本总RNA,进行总RNA的DNA酶处理,通过逆转录聚合酶链反应得到cDNA。采用实时荧光定量PCR及普通RT-PCR检测粪肠球菌esp基因的差异。结果:常规RT-PCR检测可见有阳性扩增条带的最大稀释度为1:103,敏感度是750pg/ul。SYBR Green I染料法荧光定量PCR在对数稀释为1:105仍有阳性扩增曲线,敏感度是7.5pg/ul,敏感度下限是常规RT-PCR的100倍。结论:1用普通的RT-PCR及实时荧光定量PCR都可对粪肠球菌mRNA进行定量检测。2对于粪肠球菌毒力因子esp的检测,实时荧光定量PCR法的灵敏度比普通的两步法RT- PCR高100倍。

全文目录

一、摘要  6-8
  （一）中文摘要  6-7
  （二）英文摘要  7-8
二、正文  8-19
  （一）前言  8-9
  （二）材料与方法  9-13
  （三）结果  13
  （四）讨论  13-16
  （五）结论  16-17
  （六）参考文献  17-19
三、综述  19-24
  （一）正文  19-22
  （二）参考文献  22-24
四、附录  24-26
五、致谢  26

实时荧光定量PCR与普通RT-PCR检测粪肠球菌esp基因的差异

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