学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

雌二醇在子宫内膜癌中通过AKT激活NF-κB通路产生细胞因子的研究

作　者: 邱雁
导　师: 张洁清
学　校: 广西医科大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 雌二醇 子宫内膜癌 AKT NF-кB VEGF bFGF IL-8 ER
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 221次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


背景子宫内膜癌(EC)是最常见的女性生殖道恶性肿瘤之一。近年来,随着妇女人均寿命的延长、肥胖人数的增加等因素,子宫内膜癌发病率在各年龄层妇女中均呈上升趋势。目前认为子宫内膜癌的发生可能与长期无拮抗的雌激素作用有关。磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)介导的信号通路是细胞内重要的信号转导通路。AKT是PI3K/AKT信号转导通路的核心,与细胞的凋亡、增殖、分化和代谢等密切相关。核因子kB (nuclear factor-kappa B, NF-k B)是一种目前较为重视的关键性的细胞核转录因子,参与细胞凋亡以及肿瘤的发生和转移等多种的基因调控。目的为探讨雌二醇能否在子宫内膜癌中通过丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶(AKT)介导激活核转录因子(NF-k B)信号通路产生血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、白细胞介素8(IL-8),以及其相关的细胞内信号通道的激活和传导机理,本研究以雌二醇及其相关信号通路抑制点的抑制物刺激人子宫内膜癌细胞株,包括ER弱阳性的HEC-1A及ER阳性的Ishikawa后VEGF> bFGF、 IL-8基因mRNA及蛋白表达变化情况,并在动物实验中观察雌激素作用子宫内膜癌Ishikawa细胞的裸鼠皮下移植瘤后NF-kB信号通路的分子变化,从体内、外两方面阐述雌二醇在子宫内膜癌发生中与AKT、NF-k B的关系。方法1、采用荧光定量PCR技术,检测空白对照组,或以1X10-66mol/L浓度的雌二醇(E2组)刺激人子宫内膜癌HEC-1A、 Ishikawa细胞30min后,或以1×10-6mol/L浓度的ER抑制剂(ER抑制剂组)、25×10-6mol/L浓度的AKT抑制剂(AKT抑制剂组)、100μmol/L浓度的NF-kB抑制剂PDTC(NF-k B抑制剂组)预处理Ishikawa. HEC-1A细胞1h,再以浓度为1X10-6mol/L雌二醇共同孵育30min,检测细胞因子VEGF.bFGF和IL-8mRNA表达变化的情况。2、采用Western Blot技术,检测空白组,或以1X10-6mol/L浓度的雌二醇刺激Ishikawas、HEC-1A细胞30min,或以1X10-6mol/L浓度的ER抑制剂(ER抑制剂组)、25X10-6mol/L浓度的AKT抑制剂(AKT抑制剂组)、100μmol/L浓度的NF-kB抑制剂PDTC (NF-k B抑制剂组)预处理Ishikawa、 HEC-1A细胞60min后,再以浓度为1X10-6mol/L雌二醇共同孵育30min,检测VEGF、 bFGF蛋白表达的变化情况。3、建立子宫内膜癌Ishikawa细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,以雌二醇(E2组)或雌激素受体阻滞剂ICI182,780氟维司群(ER组)、AKT抑制剂(AKT组)、NF-k B抑制剂PDTC (NF-k B组)分别预处理荷瘤裸鼠,连续腹腔给药21天后,处死裸鼠,根据瘤体体积。质量、抑瘤率等绘制生长曲线图。采用HE染色观察,并用免疫组化SP法检测各瘤体中AKT、 NF-k B、 VEGF、 bFGF的表达。结果1、 q PCR结果表明,与空白组比较,雌二醇刺激后子宫内膜癌细胞内VEGF、 bFGF和IL-8基因mRNA表达上调(P均<0.05)；ER抑制组、AKT抑制组及NF-kB抑制组VEGF、bFGF和IL-8因子mRNA和蛋白相对表达量与E2组比较显著下降(P均<0.05)。2、Western Blot结果表明,雌二醇作用后与空白对照组相比较VEGF、 bFGF蛋白相对表达量明显增高(P均<0.05),ER抑制组、AKT抑制组及NF-kB抑制组VEGF、 bFGF蛋白相对表达量与E2组比较显著下降(P均<0.05)3、动物实验结果表明,ER抑制剂组、AKT抑制组、NF-kB抑制组的相对肿瘤体积(V/VO)分别为5.32±0.28、5.55±0.15和1.57±0.23,与雌激素组(V/VO为11.37±0.37)相比较差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组化结果显示E2可诱导裸鼠子宫内膜癌皮下移植瘤的VEGF、bFGF表达上调(P<0.05)。ER抑制剂、AKT抑制剂、NF-kB抑制剂可阻断信号通路,遏制VEGF、 bFGF表达上调(P<0.05)。结论雌二醇通过激活E2-AKT-NF-k B信号通道,介导子宫内膜癌细胞产生VEGF、 bFGF、 IL-8.

全文目录


主要缩略词  5-7
摘要  7-10
ABSTRACT  10-14
前言  14-15
第一部分 雌二醇在子宫内膜癌HEC-1A细胞中通过AKT激活NF-κB通路产生VEGF、bFGF、IL-8因子的研究  15-39
  1 材料与方法  15-27
  2 结果  27-36
  3 讨论  36-38
  4 结论  38-39
第二部分 雌二醇在子宫内膜癌细胞通过AKT激活NF-κB通路产生细胞因子中的作用的动物实验  39-56
  前言  39-40
  1 材料与方法  40-45
  2 结果  45-51
  3 讨论  51-55
  4 结论  55-56
全文结论  56-57
参考文献  57-59
第三部分 综述  59-81
  参考文献  79-81
攻读硕士论文期间发表学术论文情况  81-82
致谢  82

相似论文

  1. 没药甾酮抑制RAW264.7细胞炎症反应的机制研究,R285
  2. MMP-7和溶菌酶在DSS诱导的Balb/c小鼠溃疡性结肠炎模型发病机制中的作用,S858.91
  3. 半胱胺对瘘管手术后山羊外周血T淋巴细胞增殖的影响及其机理研究,S858.27
  4. 山羊白细胞介素-1β与白细胞介素-6的克隆表达及生物学活性研究,S827
  5. IL-8介导血管平滑肌细胞迁移机制及G31P的作用初探,R363
  6. NF-κB与IL-6在大鼠极限门静脉结扎模型中的表达及作用机制,R657.3
  7. 乳杆菌代谢产物RNA组分序列分析及对其部分生物学功能的研究,R378
  8. 金钗石斛多糖减轻脂多糖诱导的大鼠学习记忆减退及机制研究,R285.5
  9. 葡萄籽原花青素对肾血管性高血压大鼠血压的影响及其机制研究,R544.1
  10. 外加低压稳恒直流电场对兔腹主动脉球囊损伤后舒张功能的影响及其机制研究,R541.4
  11. sCD40L对白血病HL-60细胞株生物学行为的影响及机制,R733.7
  12. 碱性成纤维细胞生长因子联合局部氧疗促进烧伤创面愈合的临床研究,R644
  13. 草鱼NCCRP-1和IL-10基因的克隆和表达,S917.4
  14. 涤痰汤治疗脑卒中后抑郁的临床观察,R277.7
  15. 牛膝总皂甙对兔早期骨关节炎及PI3K/AKT通路的影响,R285.5
  16. 解氏肺癌二号方对小鼠Lewis肺癌伴胸水治疗价值的研究,R734.2
  17. 心肌梗死区VEGF、SDF-1对造血干细胞归巢的影响及其相关性研究,R542.22
  18. 体内特异性阻断白介素17在BALB/c小鼠已建立哮喘模型中作用的研究,R562.25
  19. 支气管哮喘急性发作期一氧化氮呼气检测与血清ECP、IL-13、IL-8的关系,R562.25
  20. 哮喘小鼠血清IL-17的变化及布地奈德对其干预作用的研究,R562.25
  21. 类风湿关节炎患者TH17细胞及其相关细胞因子的表达及临床意义,R593.22

中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 子宫肿瘤
© 2012 www.xueweilunwen.com