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精液中血管内皮生长因子及其受体与精子质量的相关性

作　者: 李兴武
导　师: 丁一; 郭小兵
学　校: 郑州大学
专　业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: 血管内皮生长因子 血管内皮生长因子受体 精浆生化 精子质量 免疫组织化学
分类号: R698.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


背景和目的血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF),又称血管通透性因子,是一种多功能细胞因子,由多种正常细胞和肿瘤细胞分泌,被认为能够强有力的刺激血管内皮细胞生长和血管生成。VEGF是血管内皮特异性有丝分裂原,也具有增加微血管通透性的功能。VEGF是一类通过二硫键相连的同源二聚体糖蛋白,其分子量34-45kD,序列高度保守,对热和酸稳定。根据其氨基酸残基数量存在6种异构体形式,VEGF121和VEGF165等,且其具有相同的生物活性。已发现在各种正常组织中均有VEGF的高水平表达。VEGF介导了许多生理性和病理性的血管生成,在组织血管增生时,其表达增强。生理状态下,VEGF可高水平地表达于胎盘、许多胚胎组织和一些有生理性血管增生的成人正常组织(如增生期子宫内膜)。此外,在动物和成人的正常肾小球细胞、心肌细胞、前列腺上皮细胞、睾丸生精细胞、肾上腺皮质和肺的某些上皮细胞,VEGF也有所表达。在其他一些病理条件下,如类风湿关节炎、牛皮癣、伤口愈合和增殖中,VEGF也起着重要作用。VEGF的过量表达对机体可能是有害的(如肿瘤发生)。血管内皮生长因子受体(Vascular endothelial growth factor receptor, VEGFR)主要包括VEGFR1(fms-like tyrosine kinase-1, flt-1)和VEGFR2(fetal liver kinase-1/kinase insert domain-containing receptor, flk-1/KDR),其中flk-1是人KDR(婴儿肝激酶受体)在小鼠内的同源形式。VEGER1和VEGFR2结构相似,均为跨膜的酪氨酸激酶受体,同属于酪氨酸激酶c-fms家族。VEGF可与Flt-1和KDR结合从而开启钙离子通道使细胞内钙离子增加,从而发挥生物学效应。在男女生殖系统,VEGF通过受体介导的方式发挥其生物学作用,可能参与并调节生殖系统各器官的血管生成和血管通透性。Flt-1和KDR表达于大鼠精子的顶体、尾部的颈段、中段和主段,表明精子本身也是VEGF的靶细胞之一生精上皮在产生精子的过程中发生一系列形态结构、理化性质和生物功能等变化。在这些复杂的变化过程中,VEGF及其受体起着重要的参与作用和调节作用。精液中VEGF水平与男性、女性生殖有一定关系。目前,国内外很少有关于VEGF及其受体对精子质量的相关性研究。为了探讨VEGF及其受体在男性精液中与精子质量的关系,本研究选择不同精子质量的标本,应用计算机辅助精子分析(Computer-aided sperm analysis, CASA)检测精子质量；应用WHO推荐的化学法检测精浆生化(酸性磷酸酶、精浆锌、果糖、中性α-糖苷酶)；应用酶标免疫方法检测精浆VEGF水平；应用免疫组化检测精子VEGFR的表达。通过统计学分析,探讨精浆VEGF水平及精子VEGFR的表达与精子质量的关系。材料与方法1.选择无明显生殖系统疾病的男性留取精液标本,测定其精液的量、酸碱度、液化性能等一般特征；应用CASA系统检测精子质量；应用WHO推荐的检测方法测定其精浆生化指标。2.选择精浆生化指标正常的95例样本,应用酶标免疫法检测其精浆VEGF水平；应用免疫组化SABC法检测精子VEGFR的表达。3.应用SPSS16.0统计软件包对各项数据进行统计学分析。P>0.05为统计学差异。结果1VEGFR阳性信号分布于精子尾部和头的基部,呈“丫”形。2.a级精子率≥25%和<25%组,精浆VEGF平均含量分别为8.18±1.93ng/ml和6.24±1.68ng/ml,二者比较有显著统计学差异(P<0.05)。两组VEGFR的平均阳性率分别为30.1±9.2%和31.1±8.9%,无统计学差异(P>0.05)。3.a+b级精子率≥50%和<50%组,精浆VEGF平均含量分别为8.64±2.09ng/ml和6.57±1.44ml,二者比较有明显统计学差异(P<0.05)。两组VEGFR平均阳性率分别为30.5±9.8%和31.0±7.5%,无明显统计学差异(P>0.05)。4.a+b+c级精子率≥50%和<50%组,精浆VEGF平均含量分别为7.62±1.68ng/ml和7.04±1.76ng/m1,二者比较无明显统计学差异(P>0.05)。两组VEGFR平均阳性率分别为31.4±9.1%和31.8±9.7%,二者无明显统计学差异(P>0.05)。5.精子浓度≥20×106/ml和<20×106/ml组,精子VEGFR的平均阳性率分别为29.1±7.8%和41.9±10.9%,两组比较有明显统计学差异(P<0.05)。两组的精浆VEGF含量分别为7.42±1.78ng/ml和7.14±1.57ng/ml,二者无明显统计学差异(P>0.05)。6.一次射精精子总数≥40×106和<40×106组,精子VEGFR平均阳性率分别为30.8±7.9%和43.5±11.2%,二者比较有显著统计学差异(P<0.05)。两组精浆VEGF浓度分别为7.47±1.73ng/ml和6.49±1.55ng/ml,无统计学差异(P>0.05)。7.经Spearman检验,精浆VEGF含量与精子正常形态率间呈负相关,相关系数为-0.268。结论1.精子活力正常组精浆VEGF水平明显高于精子活力低下组；两组间VEGFR阳性率无明显差异。结果提示,较高水平的精浆VEGF可能通过与精子VEGFR结合对精子活力具有正效应。2.精子数量正常组精子VEGFR阳性表达率明显低于精子数量低下组；两组间精浆VEGF水平无明显差异。结果提示,可能通过精子VEGFR表达的代偿性升高,更有效地利用VEGF,维持精子数量。

全文目录


摘要  4-7
Abstract  7-12
前言  12-14
材料和方法  14-22
结果  22-28
讨论  28-33
结论  33-34
参考文献  34-37
综述 血管内皮生长因子及其受体在人类生殖系统的表达及作用  37-47
  参考文献  44-47
中英文缩略词表  47-48
攻读硕士研究生期间发表论文情况  48-49
致谢  49

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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 泌尿科学（泌尿生殖系疾病） > 男子性机能障碍 > 男性不育症
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