学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

神经鞘磷脂、磷脂转运蛋白、胆固醇脂转运蛋白在动脉粥样硬化中的影响

作　者: 张金李
导　师: 石渊渊
学　校: 河南大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 神经鞘磷脂磷脂转运蛋白胆固醇酯转移蛋白动脉粥样硬化
分类号: R543.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 39次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

近年来，心血管疾病由于其高发病率，而成为实验室广泛研究的热点。而动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)正是引起心血管疾病的主要原因。AS是由胆固醇脂质在动脉壁上的富积而产生的。早期AS涉及：脂蛋白的氧化、聚集和滞留，内皮的改变，单核细胞的激活以及泡沫细胞的形成。慢性炎症反应的持续发生，导致进一步的免疫反应和脂质沉积。本文主要从脂类代谢的三个方面分析AS。一、神经鞘磷脂（Sphingomyelin SM）在AS斑块中的富积。SM富含于细胞膜和血浆脂蛋白，人的血浆中SM的增高会提高罹患动脉粥样硬化的可能性。在神经鞘磷脂合成过程中，神经鞘磷脂合成酶(Sphingomyelinsynthase，SMS)是SM合成中的最后一个酶，哺乳动物的SMS有两种同功酶：SMS1和SMS2，SMS1主要存在于高尔基体的顺面和中间面，SMS2主要存在于细胞膜上，有研究显示细胞内SMS2缺乏可以明显降低细胞内SM的水平。二、磷脂转运蛋白在高密度脂蛋白介导的胆固醇逆向转运（Reverse cholesterol transport RCT）中的作用。RCT是指，周遍组织的胆固醇转运到肝脏，并最终以胆汁的形式排出体外的过程。由于血管内膜的胆固醇堆积促进SM形成，故而胆固醇的去除被认为是一种抗动脉粥样硬化的过程。三、胆固醇酯转运蛋白（cholesterol ester transfer protein CETP）和磷脂转运蛋白（Phospholipidtransfer protein PLTP）是同源分子，只有CETP可以转移中性脂质，但是在转移和交换磷脂方面，PLTP可以发挥同样的作用。SM，PLTP和CETP三种物质在动脉粥样硬化的进程中分别起着重要作用，但其机理不是十分清楚。本实验目的：观察SM，PLTP和CETP三种物质在动脉粥样硬化的进程中分别起的作用，以及SMS2基因敲除后对小鼠AS形成的影响。资料与方法：1、通过高脂饲养SMS2基因敲除小鼠和野生型（Wildtype WT）小鼠，取附睾脂肪做脂肪切片，观察SMS2基因敲除小鼠和WT小鼠脂肪细胞的面积。2、以冠状动脉造影术为依据将病人分组，冠状动脉狭窄＜60%为对照组，冠状动脉狭窄＞60%为实验组。在开封市第一人名医院广泛收集病人信息，全自动生化分析仪检测病人胆固醇(CHO)，甘油三脂(TG)，高密度脂蛋白(HDL)，低密度脂蛋白(LDL)，载脂蛋白A-1(APOA-1)以及载脂蛋白B(APOB)，用全自动酶标仪检测实验组和对照组血浆中SM的含量，用荧光酶标仪检测实验组和对照组血浆中的PLTP和CETP的活性。结果：1、SMS2基因敲除小鼠的附睾脂肪细胞明显比WT小鼠脂肪细胞小(p<0.05)。2、实验组的血浆CHO，TG，LDL，和APOB高于对照组，HDL和APOA-1低于对照组(p<0.05)。3、冠状动脉狭窄＞60%的实验组的血浆SM、PLTP和CETP明显高于冠状动脉狭窄＜60%的对照组(p<0.05)。结论：1、SMS2基因缺失小鼠高脂饮食3个月后，附睾脂肪细胞大小明显小于WT小鼠组。说明SMS2基因缺失可以控制肥胖，有可能减缓AS的发生。2、血浆SM含量的升高增加了AS形成的风险。3、实验组PLTP和CETP含量高于对照组，PLTP和CETP升高增加AS发生的风险。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
引言  10-12
1 材料、试剂和仪器  12-16
  1.1 实验对象  12
    1.1.1 动物实验  12
    1.1.2 临床实验  12
  1.2 主要试剂  12-13
  1.3 主要仪器  13
  1.4 主要试剂及配制  13-16
2 实验方法和步骤  16-22
  2.1 小鼠的饲养、繁殖和鉴定  16-17
    2.1.1 小鼠的饲养  16
    2.1.2 小鼠的繁殖方法  16
    2.1.3 编号  16
    2.1.4 酚氯仿提取法提取小鼠基因组DNA  16
    2.1.5 PCR扩增  16-17
  2.2 实验动物分组及喂食  17
  2.3 附睾脂肪固定  17
  2.4 附睾脂肪脱水包埋  17-18
  2.5 切片  18
  2.6 HE染色  18
  2.7 计算脂肪细胞表面积  18
  2.8 血浆神经鞘磷脂（SM）含量的检测  18-19
  2.9 血浆磷脂转运蛋白（PLTP）活性的检测  19
  2.10 血浆胆固醇脂转运蛋白（CETP）活性的检测原理及方法  19-20
  2.11 血浆甘油三脂（TG）的检测原理及方法  20
  2.12 血浆高密度脂蛋白胆固醇（HDL）测定原理及方法  20
  2.13 血浆低密度脂蛋白胆固醇（LDL）检测原理及方法  20
  2.14 血浆载脂蛋白A1（APOA1）测定原理及方法  20-21
  2.15 血浆载脂蛋白B（APOB）测定原理及方法  21
  2.16 统计分析  21-22
3 实验结果  22-27
  3.1 实验动物鉴定结果  22
  3.2 附睾脂肪细胞表面积计算结果  22-23
  3.3 对照组和实验组病人基本影响因素对照分析结果  23-24
  3.4 血浆SM含量检测结果  24
  3.5 血浆PLTP活性测量结果  24-25
  3.6 血浆CETP活性测量结果  25-27
4 结论与讨论  27-30
  4.1 结论  27
  4.2 讨论  27-30
参考文献  30-32
文献综述  32-56
  参考文献  48-56
英文缩写表  56-57
致谢  57-58

神经鞘磷脂、磷脂转运蛋白、胆固醇脂转运蛋白在动脉粥样硬化中的影响

内容摘要

全文目录

相似论文