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枇杷叶化学成分及抗癌活性的研究

作 者: 陈欢
导 师: 喻长远
学 校: 北京化工大学
专 业: 轻工技术与工程
关键词: 枇杷叶 色谱 三萜 核磁 抗肿瘤活性
分类号: R284
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 216次
引 用: 1次
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内容摘要


枇杷(Eriobotrya japonica)叶是一种传统中药,含有多种活性成分。为了研究枇杷叶化学成分的结构及药理活性,本文对枇杷叶进行提取分离,鉴定所得成分的结构,并且检测部分化学成分的抗肿瘤活性。分离鉴定:枇杷干燥叶经过90%乙醇回流提取后,浓缩提取液,用石油醚、氯仿、乙酸乙酯逐次萃取浓缩液,然后采用常压柱色谱方法对氯仿、乙酸乙酯萃取物分别进行分离纯化,结果从枇杷叶乙醇提取物中分离到15个化合物。依据理化性质和波谱数据鉴定所得化合物为:乌苏酸(1)、蔷薇酸(2)、2α,3α,19α-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸(3)、齐墩果酸(4)、2α,19α-二羟基-3-羰基-12-烯-28-乌苏酸(5)、2α,3β,13β-三羟基-11-烯-28-乌苏酸(6)、2α-羟基白桦脂酸甲酯(7)、科罗索酸甲酯(8)、乌苏醇(9)、科罗索酸(10)、β-谷甾醇(11)、2α,3α,19α,23-四羟基齐墩果酸(12)、正二十一烷醇(13)、2α,3β,19α,23-四羟基-12-双键-28-O-β-D葡萄糖乌苏苷(14)、槲皮素(15)。化合物6、7、9、12、13和14首次从枇杷属植物中分离得到。抗肿瘤活性实验:本文利用MTT法、CCK-8试剂盒检测法来检测枇杷提取物对癌细胞的抑制率。结果发现化合物1、10和混合物在体外对PC-3细胞具有很好的抑制率,化合物4和12对PC-3有一定的抑制作用。化合物1和10在体外都对B16-F10细胞有抑制作用。再用酶联免疫的二位点一步法来检测三萜对B16-F10小鼠黑色素瘤分泌INF-γ、TNF-α的影响,研究三萜对肿瘤细胞产生抑制作用的机理,但发现INF-γ、INF-α的分泌量没有增加。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-13
第一章 绪论  13-23
  1.1 中药现代化概述  13-14
    1.1.1 中药现代化的目标  13
    1.1.2 中药现代化的发展  13-14
    1.1.3 中药现代化存在的问题  14
  1.2 枇杷叶概况  14-16
    1.2.1 枇杷的历史  14-15
    1.2.2 枇杷的分布  15
    1.2.3 枇杷叶的生长与特征  15-16
    1.2.4 枇杷叶的相关制品及药用价值  16
  1.3 枇杷叶的化学成分及含量测定  16-19
    1.3.1 挥发油  16-17
    1.3.2 倍半萜  17
    1.3.3 三萜  17
    1.3.4 黄酮类化合物  17
    1.3.5 有机酸类  17-18
    1.3.6 乌苏酸含测  18
    1.3.7 科罗索酸含测  18
    1.3.8 齐墩果酸含测  18-19
    1.3.9 总三萜含测  19
  1.4 枇杷叶的药理作用  19-22
    1.4.1 降血糖  19
    1.4.2 抗炎止咳  19-20
    1.4.3 抗肿瘤  20
    1.4.4 抗氧化  20
    1.4.5 抗病毒  20
    1.4.6 抑菌  20-21
    1.4.7 其他作用  21
    1.4.8 不良反应  21-22
  1.5 小结  22-23
第二章 枇杷叶化学成分的提取分离  23-31
  2.1 提取实验  23-25
    2.1.1 仪器和试剂  23
    2.1.2 药材的鉴定  23-24
    2.1.3 提取  24-25
  2.2 分离实验  25-28
    2.2.1 氯仿萃取物的分离纯化  25-27
    2.2.2 枇杷叶乙酸乙酯层物质分离纯化  27-28
  2.3 本章小结  28-31
第三章 化合物的结构鉴定  31-44
  3.1 实验仪器及试剂  31
  3.2 化合物的结构鉴定  31-42
  3.3 本章小结  42-44
第四章 三萜的抗肿瘤活性的研究  44-65
  4.1 对 B16-F10 小鼠黑色素瘤的抑制实验  44-57
    4.1.1 对 B16-F10 小鼠黑色素瘤的抑制实验原理  44
    4.1.2 INF-γ、TNF-α含量检测的原理  44-45
    4.1.3 实验材料及仪器  45
    4.1.4 实验方法  45-47
    4.1.5 对 B16-F10 小鼠黑色素瘤抑制的结果  47-51
    4.1.6 三萜对 INF-γ影响的实验结果  51-54
    4.1.7 三萜对 TNF-α影响的实验结果  54-57
  4.2 对肿瘤细胞 PC-3 抑制实验  57-64
    4.2.1 实验原理  57
    4.2.2 实验材料  57-58
    4.2.3 实验方法  58
    4.2.4 实验结果  58-64
  4.3 本章小结  64-65
第五章 结语  65-66
参考文献  66-69
附录  69-98
致谢  98-99
研究成果及发表的学术论文  99-100
作者和导师简介  100-102

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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