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感染肺炎链球菌猕猴IL-6、IL-2、sIgA、IFN-γ以及CD3在呼吸及免疫器官中的表达分布研究

作　者: 章瑶
导　师: 陈正礼
学　校: 四川农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 肺炎链球菌 呼吸器官 免疫器官 免疫组织化学 组织原位杂交 sIgA IFN-γ IL-2 IL-6 CD3 猕猴
分类号: S852.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


为了研究猕猴感染肺炎链球菌后呼吸及免疫系统内sIgA、IFN-γ、IL-6蛋白及sIgA、IFN-γ、IL-6、IL-2、CD3mRNA的表达强度及表达面积的变化,为该疾病寻找更为有效的防治方法提供一定的理论基础,本试验以白发性感染肺炎链球菌猕猴为研究对象,采用HE染色、免疫组织化学技术及组织原位杂交技术分别研究肺脏、气管、脾脏及淋巴结内组织学病理变化、sIgA、IFN-γ、IL-6蛋白的表达分布情况以及sIgA、IFN-γ、IL-6、IL-2、CD3mRNA的表达分布情况。结果如下：(1)肺脏、气管、脾脏、淋巴结的组织病理学变化肺脏处于红色肝变期,肺泡腔内有少量浆液性渗出物。气管内出血,气管外膜结缔组织内和气管腔内有大量的红细胞。脾脏红髓内可见大量散在的红细胞,充血明显。淋巴小结数量减少,副皮质区变窄,髓质区内可见大量巨噬细胞。(2)sIgA、IFN-γ、IL-6蛋白的表达分布情况感染组猕猴肺泡隔和肺脏血液中IFN-γ蛋白表达量较健康组有所增加差异极显著(P<0.01),肺脏血管壁差异显著(P<0.05)；感染组IFN-γ蛋白在气管肌层、上皮层内表达水平较健康组有所增加且差异显著(P<0.05)；感染组猕猴脾脏内IFN-γ蛋白红髓区内分布面积减小且差异显著(P<0.05)；淋巴结内IFN-Y蛋白表达的光密度值高于健康组,差异显著(P<0.05)。感染组IL-6蛋白在固有层表达面积低于健康组且差异显著(P<0.05)；IL-6蛋白在感染组淋巴结内表达光密度值高于健康组,差异极显著(P<0.01)。感染组猕猴肺脏sIgA蛋白表达量较健康组增加且差异极显著(P<0.01),肺脏血管内与健康组相比差异显著(P<0.05)；感染组猕猴脾脏内IgA蛋白表达的光密度值明显高于健康组,且差异极显著(P<0.01)；(3)sIgA、IFN-Y、IL-6、IL-2、CD3mRNA的表达分布情况感染组猕猴肺泡隔和血液中内IFN-γ mRNA免疫阳性产物表达分布数量有所增加,与健康组相比显著极差异(P<0.01),血管壁差异显著(P<0.05)；感染组IFN-γ免疫阳性产物在气管肌层、上皮层内表达量增加且差异显著(P<0.05)。感染组内IL-2mRNA免疫阳性产物在肺泡隔表达分布面积高于健康组且差异显著(P<0.05)。感染组肺脏肺泡隔内IL-6mRNA阳性产物光密度值及其表达分布面积与健康组相比差异均显著(P<0.05),血液中的阳性面积感染组高于健康组,差异显著(P<0.05)；IL-6mRNA免疫阳性产物在感染组固有层中的阳性表达量高于健康组且差异极显著(P<0.01),在上皮层中也高于健康组且差异显著(P<0.05)；IL-6mRNA免疫阳性物质在感染组淋巴结中阳性物质主要分布于皮质区且分布面积高于健康组差异显著(P<0.05)。sIgA mRNA在感染组肺泡隔,肺脏血管内及血管壁的阳性表达量远高于健康组,且差异均极其显著(P<0.01)；在肺泡隔上的表达面积与健康组相比差异显著(P<0.05)；感染组sIgA mRNA在气管上皮层及气管肌肉层中光密度值与健康组相比差异极显著(P<0.01),在固有层中与健康组相比差异显著(P<0.05);上皮层中的分布面积与健康组相比差异显著(P<0.05)；sIgA mRNA免疫阳性物质在感染组脾脏中的光密度值高于健康组且差异显著(P<0.05)；CD3mRNA免疫阳性物质在感染组脾脏中的光密度值高于健康组且差异极显著(P<0.01)；CD3mRNA阳性物质在感染组淋巴结中表达光密度值高于健康组且差异显著(P<0.05)。病理结果显示肺炎链球菌感染后肺脏和气管的损伤较脾脏和淋巴结明显,主要表现为出血充血及浆液性渗出。各细胞因子在不同的组织部分表达的强度有所不同,IFN-γ、IL-6及sIgA表现为明显增强,而IL-2及CD3在感染组中的表达与健康组相比差异不明显。各个细胞因子之前相互联系,形成细胞因子网络,机体内体液免疫与细胞免疫共同发挥作用抵御肺炎链球菌的侵害。

全文目录


摘要  4-6
Abstract  6-11
第一部分 文献综述  11-25
  前言  11-13
  1、肺炎链球菌研究进展  13-16
    1.1 肺炎链球菌的主要结构  13-14
    1.2 肺炎链球菌致病机理  14-16
  2、呼吸道黏膜免疫研究情况  16-20
  3 细胞因子  20-24
  立题依据及研究意义  24-25
第二部分 实验研究  25-49
  1 材料  25-27
    1.1 实验动物  25
    1.2 实验仪器  25
    1.3 主要试剂  25-27
  2 方法  27-28
    2.1 取材  27
    2.2 光镜标本制作及组织病理学观察  27
    2.3 免疫组化SABC法检测  27-28
    2.4 组织原位杂交检测  28
    2.5 显微、拍照及图像分析  28
  3 结果  28-39
    3.1 病理变化  28
    3.2 IFN-γ、IL-6、sIgA蛋白表达结果  28-31
      3.2.1 呼吸系统内的蛋白表达  28-30
      3.2.2 免疫系统内的蛋白表达  30-31
    3.3 IFN-Γ、IL-2、IL-6、SIGA、CD3 MRNA表达结果  31-34
      3.3.1 肺脏及气管内表达结果  31-32
      3.3.2 脾脏及淋巴结内表达结果  32-34
    3.4 总结  34-39
  4 讨论分析  39-47
    4.1 组织学变化及其机理  39-40
    4.2 IFN-γ表达变化及其意义  40-41
    4.3 IL-2表达变化及其意义  41-42
    4.4 IL-6表达变化及其意义  42-44
    4.5 sIgA表达变化及其意义  44-45
    4.6 CD3表达变化及其意义  45
    4.7 各因子的联系  45-47
  5 结论  47-49
参考文献  49-56
致谢  56-57
附图  57-76

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 兽医基础科学 > 家畜免疫学
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