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内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究

作　者: 舒莹
导　师: 郭顺星；张东明；杨峻山
学　校: 中国协和医科大学
专　业: 生药学
关键词: 铁皮石斛 金钗石斛 长距石斛 原球茎 内生真菌 真菌诱导子 淋巴细胞增殖 自由基 化学成分 钙调蛋白 超微结构 HPLC-PDA
分类号: R284
类　型: 博士论文
年　份: 2005年
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内容摘要


铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.）是兰科石斛属草本植物，是药典收录的五种石斛之一，也是最为珍稀名贵的石斛植物。由于自然繁殖率低，人工栽培技术不成熟，铁皮石斛野生资源已濒临枯竭。本文以快速繁殖的铁皮石斛胚性组织原球茎为材料，根据兰科植物与真菌共生的生理特点，选取野生铁皮石斛的内生真菌小菇属（Mycena sp.）真菌（MF24）对液体培养的原球茎进行诱导作用，进行了较系统的研究，以期改善原球茎的药用质量而使其成为铁皮石斛的药用新资源。此外，本文对铁皮石斛原球茎、金钗石斛（D.nobile Lindl.）、长距石斛（D.longicornu Lindl.）的化学成分和药理活性进行了研究，丰富石斛属植物的药用和开发研究。 一、促淋巴细胞增殖、自由基清除实验结果显示MF24真菌诱导子对铁皮石斛原球茎的药理活性有提高作用。 真菌诱导子处理的原球茎甲醇提取物（100μg／ml）对小鼠B淋巴细胞转化有促进作用，增殖率是9.36％，而对照原球茎没有这一活性，野生铁皮石斛强烈抑制B淋巴细胞转化。与对照原球茎相比，真菌诱导子处理能使原球茎甲醇提取物促T淋巴细胞转化的活性提高84.8％。10μg／ml剂量时，对照原球茎、真菌诱导子处理的原球茎、野生铁皮石斛的甲醇提取物的超氧阴离子清除率分别是24.48％、30.14％、12.72％；50％甲醇提取物清除率分别是31.95％、36.67％、18.46％。 二、通过对原球茎的化学成分研究以及它们的含量比较显示，MF24真菌诱导子对铁皮石斛原球茎的苯丙烷类和酚类化学成分含量有提高作用。首次对悬浮培养的铁皮石斛原球茎的化学成分进行了研究。共分离鉴定了16个化合物（TP1～TP16），其中1-O-p-香豆酰基-8-D-P比喃葡萄糖苷（TP1）、1-O-p-阿魏酰基-β-D-吡喃葡萄糖苷（TP2）在10-7mol/L时都具有极显著的超氧阴离子清除活性，清除率分别是33.08％和84.31％。真菌诱导子处理

全文目录


中文摘要  5-8
英文摘要  8-12
前言  12-14
第一章 论文综述 石斛属药用植物研究概况  14-58
  第一节 石斛资源和质量研究  14-20
  第二节 石斛的组织培养研究  20-27
  第三节 石斛的化学成分研究  27-42
  第四节 石斛的药理活性和临床应用研究  42-47
  展望  47-58
第二章 MF24真菌诱导子对铁皮石斛原球茎提取物的药理活性影响及铁皮、金钗和长距石斛提取物的药理活性研究  58-70
  第一节 抗肿瘤活性研究  58-62
  第二节 促淋巴细胞增殖活性研究  62-64
  第三节 自由基清除活性研究  64-67
  小结  67-70
第三章 MF24真菌诱导子对铁皮石斛原球茎的化学成分影响  70-84
  第一节 铁皮石斛原球茎的化学成分研究  70-79
  第二节 MF24真菌诱导子对原球茎中化合物TP1～TP5含量的影响  79-82
  小结  82-84
第四章 MF24真菌诱导子对铁皮石斛原球茎诱导作用机理的研究  84-102
  第一节 MF24真菌诱导子激发铁皮石斛原球茎的抗性反应  84-88
  第二节 钙信使在激发原球茎苯丙烷类合成过程中的作用  88-91
  第三节 铁皮石斛原球茎钙调蛋白基因克隆和鉴定  91-97
  第四节 MF24真菌诱导子对铁皮石斛原球茎钙调蛋白基因表达水平的影响  97-100
  小结  100-102
第五章 MF24真菌诱导子活性因子初探  102-115
  第一节 不同菌龄的真菌诱导子对铁皮石斛原球茎的作用  102-106
  第二节 菌丝体和发酵液对铁皮石斛原球茎的作用  106-108
  第三节 菌丝体小分子提取物对铁皮石斛原球茎的作用  108-111
  第四节 菌丝体的糖、蛋白质、脂质对铁皮石斛原球茎的作用  111-114
  小结  114-115
第六章 活体MF24真菌与铁皮石斛原球茎诱导作用的研究  115-130
  第一节 MF24真菌培养方式的研究  115-117
  第二节 原球茎光、暗培养比较及与MF24真菌平板菌片共培养初试  117-121
  第三节 原球茎对活体MF24真菌的抗性作用  121-127
  第四节 悬浮培养的活体MF24真菌对原球茎的作用  127-129
  小结  129-130
第七章 活体MF24真菌对铁皮石斛原球茎细胞结构的影响  130-142
  第一节 活体MF24真菌对原球茎表面性状的影响  130-135
  第二节 活体MF24真菌对原球茎表面细胞的影响  135-137
  第三节 活体MF24真菌对原球茎显微结构的影响  137-139
  第四节 活体MF24真菌对原球茎超微结构的影响  139
  小结  139-142
第八章 金钗石斛的化学成分及其活性研究  142-152
  第一节 金钗石斛的化学成分研究  142-149
  第二节 化合物JC1、JC17的药理活性  149-150
  小结  150-152
第九章 长距石斛的化学成分研究  152-155
主要结论  155-157
致谢  157-158
作者简介  158-159
附图  159-186

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学
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