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淀粉合成相关基因转化籼型杂交稻亲本及育种利用研究

作 者: 苏军
导 师: 郑金贵
学 校: 福建农林大学
专 业: 作物遗传育种
关键词: 籼稻 转基因 直链淀粉 可溶性淀粉合成酶基因(sss) 支链淀粉合成酶基因(rbel)
分类号: S511.21
类 型: 博士论文
年 份: 2005年
下 载: 163次
引 用: 2次
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内容摘要


淀粉是稻米的最主要成分,包括直链淀粉和支链淀粉,其比例是决定稻米食味品质最重要的因素。研究表明:在淀粉生物合成过程中,决定淀粉组成和比例的关键酶有3种,分别是结合型淀粉合成酶(GBSS)、可溶性淀粉合成酶(SSS)和淀粉分支酶(RBE);GBSS控制直链淀粉合成、由Waxy基因编码、SSS、RBE协同控制支链淀粉合成,分别由SSS基因和rbe基因编码。本项目分别将SSS基因和rbe1基因导入籼型杂交稻恢复系明恢86和保持系珍汕97B,并研究其遗传表达及其在杂交稻配组上的利用。主要结果如下: 1、建立了籼稻恢复系明恢86和保持系珍汕97B的根农杆菌介导的遗传转化体系。以水稻花后15天的幼胚为材料,诱导胚性愈伤,以3~6代的胚性愈伤为转化受体材料,经4天预培养,高浓度农杆菌(OD6002.0)侵染30分钟,共培养3天后进行选择筛选,约一个月后长出抗性愈伤,抗性愈伤经进一步筛选,存活的愈伤转入分化培养基中,20~30天分化成小苗; 2、将SSS基因、rbe1基因导入明恢86和珍汕97B,共获得转基因克隆361个。其中:转rbe1明恢86有60个克隆、转SSS明恢86有101个克隆、转rbe1珍汕97B有30个克隆、转SSS珍汕97B有28个克隆; 3、转基因水稻后代中,约25%的转化克隆呈现单基因分离,其余为高比率分离或偏分离;分子杂交结果证明:异常分离的克隆为多拷贝整合;外源基因一旦稳定整合在水稻基因组中,其后代能够稳定遗传: 4、RT-PCR检测结果表明,转rbe1基因纯合株系灌浆期mRNA转录水平增强;转基因水稻灌浆期胚乳SSS酶活性、RBE酶活性增强,进一步验证外源基因在水稻胚乳中的特异表达; 5、研究筛选出直链淀粉含量显著降低的转基因株系,从转rbe1基因的明恢86中,筛选出7个直链淀粉含量显著降低的纯合株系,降幅最大的株系为86RF38-3-1-1直链淀粉为8.8%,比对照的16.8%相对下降了31.2%;

全文目录


中文摘要  5-8
英文摘要  8-11
缩写词  11-12
引言  12-14
第一章 文献综述  14-52
  1.稻米淀粉品质及遗传  14-25
  2.淀粉的生物合成及相关酶  25-35
  3.我国稻米品质育种现状与问题  35-39
  4.我国稻米品质育种方向和策略  39-40
  5.转基因水稻研究  40-48
  6.问题的提出和开展本研究的意义  48-50
  7.本研究的策略  50-52
第二章 籼稻农杆菌介导遗传转化体系建立及转rbel和sss基因籼稻的获得  52-75
  第一节 籼稻稳定转化技术平台的建立  52-61
  第二节 转淀粉分支酶1基因(rbel)和可溶性淀粉合成酶(sss)基因籼稻的获得  61-75
第三章 转基因水稻外源基因的遗传和表达  75-92
  第一节 转基因水稻外源基因的遗传  75-83
  第二节 转基因水稻外源基因的转录和表达  83-92
第四章 转sss和rbel基因水稻胚乳淀粉含量及其他品质性状的变化  92-116
  第一节 转sss和rbel基因水稻胚乳直链淀粉含量变化及其稳定性  92-105
  第二节 转sss和rbel基因水稻稻米品质相关性状变化  105-116
第五章 转基因水稻育种利用研究  116-132
第六章 转基因水稻育种的总体思路  132-135
参考文献  135-151
附录1  151-155
附录2  155-158
附录3  158-160
致谢  160-162

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 禾谷类作物 > > 按米的粘性分 > 籼稻
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