学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

冷水七、中华猕猴桃根的物质基础研究

作　者: 周雪峰
导　师: 吴继洲
学　校: 华中科技大学
专　业: 药理学
关键词: 冷水七中华猕猴桃根抗类风湿关节炎活性抑制IL-18活性保肝降酶活性筛选多靶点性化学成分刺囊酸皂苷三萜
分类号: R285
类　型: 博士论文
年　份: 2008年
下　载: 231次
引　用: 2次
阅　读: 论文下载

内容摘要

本论文由三章组成。第一章为民族药冷水七抗类风湿关节炎药效物质基础研究,证实了冷水七的抗类风湿关节炎活性并筛选了活性部位,进行了化学成分研究并对单体化合物进行活性筛选。第二章为中华猕猴桃根保肝药效物质基础的初步研究,筛选了保肝降酶的活性部位并进行了化学成分研究。第三章为综述,对冷水七中含有的主要活性成分刺囊酸皂苷类化合物的化学结构和活性进行了文献综述,对猕猴桃属的化学成分也进行了综述。第一章冷水七(Impatiens pritzellii Hook. f. var. hupehensis Hook. f.)为凤仙花科凤仙花属植物,其根茎为湖北省土家族常用药材,用于治疗类风湿性关节炎(RA)。为了证实冷水七的抗RA作用以进一步扩大使用,为了筛选冷水七抗RA部位和活性成分以进一步开发新药,本研究对产于湖北恩施自治州的冷水七进行了系统的药理和化学成分研究。本研究建立了RA的一种常见的整体动物病理模型:小牛II型胶原诱导的小鼠关节炎模型(CIA)。冷水七甲醇总膏和正丁醇部位对CIA小鼠的关节炎发展有明显的抑制作用,并都可有效降低小鼠血清中抗C II抗体水平,据此证实了冷水七具有明显抗RA作用,并确定活性部位为正丁醇部位,与我们前期研究的抗炎镇痛的活性部位一致。冷水七及其活性部位可以抑制CIA小鼠免疫器官重量,可以明显下调CIA小鼠体内促炎因子TNF-α、IFN-γ和IL-18水平,对抗炎因子IL-10有上调作用。因此推测冷水七抗RA可能的作用机理之一是其广泛地影响各种细胞因子水平,从而调节整个细胞因子网络的平衡。本研究对冷水七进行了系统的化学成分研究,在冷水七各部位分离得到30个单体化合物,并鉴定为:刺囊酸(Comp. 1),刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸(Comp. 2),刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯苷(Comp. 3),刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸乙酯苷(Comp. 4)*,刺囊酸-3-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯苷(Comp. 5)*,刺囊酸葡萄糖醛酸丁酯-28-O-木糖-鼠李糖-木糖酯苷(Comp. 6)*,正丁基-β-D-吡喃果糖苷(Comp. 7), 5-羟甲基糠醛(Comp. 8),邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Comp. 9),大豆鞘苷I (Comp. 10),大豆鞘苷II (Comp. 11),败酱草碱(Comp. 12),三十一烷烃(Comp. 13),二十四烷酸甲酯(Comp. 14),棕榈酸(Comp. 15),硬脂酸(Comp. 16),硬脂酸甲酯(Comp. 17),α-菠甾醇(Comp. 18),菠甾酮(Comp. 19),乙酰菠甾醇(Comp. 20),菠甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Comp. 21),菠甾醇3β-棕榈酸酯(Comp. 22),菠甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷-6’-O-棕榈酸酯(Comp. 23),棕榈酸单甘油酯(Comp. 24),二十四烷酸单甘油酯(Comp. 25),α氨基葡萄糖(Comp. 26),β氨基葡萄糖(Comp. 27),β呋喃果糖(Comp. 28),α-吡喃果糖(1-2’)β-吡喃果糖(Comp. 29)和α-吡喃果糖1,2:2,3’β-吡喃果糖(Comp. 30)。其中Comp. 4~6为新化合物。在活性部位正丁醇部位分离得到的化合物有Comp. 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 10, 11, 12, 18, 21, 24, 25共15个化合物。本研究以筛选抗RA活性成分为目的考察了从冷水七特别是其活性部位中分离得到的若干单体化合物的相关活性,涉及抗炎镇痛、免疫抑制等方面,特别是研究了受试化合物抑制IL-18的活性,最后用CIA小鼠关节炎模型检验筛选出的活性化合物。实验结果显示Comp. 3, 5, 6对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀有明显抗炎作用,Comp. 5的高低剂量和Comp. 6的高剂量对醋酸诱发小鼠扭体有明显抑制作用,Comp. 1, 3, 5, 7, 12, 23对T淋巴细胞增殖有抑制作用,Comp. 1, 3, 4, 5, 7, 20, 23对B淋巴细胞增殖有抑制作用,Comp. 2和6对小鼠血清溶血值HC50有抑制作用,Comp. 1, 2, 6, 12, 26对LPS诱导人PBMCs产生的IL-18有明显的抑制活性。在最后小鼠CIA关节炎模型筛选中,考察了Comp. 5和6对CIA小鼠关节炎指数的影响,未发现明显抑制作用。通过本研究得出结论,冷水七的抗RA作用具有多靶点性,其作用机理也具有多重性。第二章中华猕猴桃(Actinidia chinensis Planch.)为猕猴桃科猕猴桃属植物,其根民间用于治疗肝炎及其他病症。我们对中华猕猴桃根进行了保肝药效物质基础的初步研究。建立了CCl4引起的小鼠急性肝损伤模型,对中华猕猴桃根乙醇总膏及其不同极性部位进行了保肝降酶活性的筛选。实验结果表明多糖部位和乙酸乙酯部位具有一定的保肝降酶活性。为了有利于中华猕猴桃根多糖(ACPS)的进一步研究,我们对中华猕猴桃根乙醇总膏和水部位进行了多糖的含量测定。本研究对中华猕猴桃根进行了系统的化学成分研究,在各部位分离得到31个单体化合物,并鉴定30个化合物:2α,3β-dihydroxyurs-12-en-28,30-olide* (化合物1), 2α,3β,24-trihydroxyurs-12-en-28,30-olide* (化合物2),齐墩果酸(化合物3),表科罗索酸(化合物4), 2α,3α,24-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid (化合物5), 23-hydroxyursolic acid (化合物6),积雪草酸(化合物7), 2α,3α,19,24- tetrahydroxyurs-12-en-28-oic acid (化合物8), 3β-hydroxyurs-12,18-dien-28-oic acid (化合物9), 2α,23 dihydroxylmicromeric acid (化合物10),香草酸(化合物11),邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(化合物12), tachioside (化合物13), isotachioside (化合物14), 5-hydroxy-6-methoxy-7-O-β-D-glucosyl coumarin (化合物15), 1-O-(β-D-glucosyl)-2-[2-methoxy-4-(ω-hydroxypropyl)-phenoxy]-propan-3-ol (化合物16),表-儿茶素(化合物17), (+)-儿茶素(化合物18),鸟嘧啶(化合物19),腺嘌呤(化合物20),中-肌醇(化合物21),双果糖(化合物22),神经酰胺(化合物23),正丁基果糖苷(化合物24),β-谷甾醇(化合物25),β-胡萝卜苷(化合物26),棕榈酸(化合物27),硬脂酸(化合物28),十六或十八烷烃(化合物29),三十二或三十四烯烃(化合物30)。其中10个为三萜化合物(化合物1~10)都在具有一定保肝降酶活性的乙酸乙酯部位分离得到,包括2个新化合物:化合物1和化合物2。我们认为这些三萜类化合物可能就是乙酸乙酯部位保肝降酶活性的物质基础。第三章本文对冷水七中含有的主要活性成分刺囊酸皂苷类化合物的化学结构和活性进行了文献综述,参考了1934年至今(2006年)的157篇文献。为该类化合物的进一步开发利用提供依据。我们对猕猴桃属植物的化学成分研究也进行了综述,参考了60篇文献。

全文目录

摘要  8-11
ABSTRACT  11-15
缩写说明  15-16
第一章民族药冷水七抗类风湿关节炎药效物质基础研究  16-119
  前言  16-18
  第一节冷水七及其活性部位的抗类风湿关节炎活性研究  18-28
    1. 1 小鼠胶原性关节炎模型的建立和分组  19-20
    1.2 冷水七及其活性部位的抗类风湿性关节炎活性研究  20-27
      1.2.1 冷水七及其活性部位对CIA 小鼠关节炎的抑制作用  20-23
      1.2.2 冷水七及其活性部位对CIA 小鼠体内细胞因子的调节  23-27
    1.3 小结  27-28
  第二节冷水七化学成分研究  28-70
    2.1 冷水七化学成分的名称及其结构  28-33
    2.2 冷水七化学成分的结构鉴定  33-70
      2.2.1 新化合物的结构解析  33-45
      2.2.2 已知化合物的结构解析  45-70
  第三节冷水七单体化合物的活性研究  70-91
    3.1 冷水七单体化合物抗炎免疫等活性研究  71-83
      3.1.1 对小鼠的极毒实验  71-73
      3.1.2 对肿瘤细胞的细胞毒作用研究  73-75
      3.1.3 二甲苯诱导的小鼠耳肿胀实验  75-76
      3.1.4 醋酸诱发小鼠扭体实验  76-77
      3.1.5 淋巴细胞增殖实验  77-81
      3.1.6 血清溶血素实验  81-83
    3.2 冷水七单体化合物抑制IL-18 活性的筛选  83-88
      3.2.1 体外抑制IL-18 活性筛选模型的建立  84-87
      3.2.2 冷水七活性部位化合物抑制 IL-18 活性的筛选  87-88
    3.3 冷水七活性化合物对CIA 小鼠关节炎的抑制作用  88-89
    3.4 小结  89-91
  第四节实验部分  91-102
    4.1 仪器与材料  91-93
      4.1.1 药理实验用仪器与材料  91-92
      4.1.2 化学实验用仪器与材料  92-93
    4.2 药材鉴定与提取分离  93-96
      4.2.1 冷水七的采集与鉴定  93
      4.2.2 各极性部位的分离  93
      4.2.3 各部位化学成分的分离流程  93-96
    4.3 化合物衍生化实验  96-98
      4.3.1 苷水解实验  96-97
      4.3.2 成酯实验  97-98
    4.4 化合物结构鉴定数据  98-102
  第五节总结与讨论  102-115
    5.1 总结  102-103
    5.2 讨论  103-115
      5.2.1 讨论一：冷水七抗RA活性作用机理探讨  103-104
      5.2.2 讨论二：冷水七抗RA 活性部位和量效关系探讨  104
      5.2.3 讨论三：冷水七化学成分的生源途径和化学分类学意义  104-108
      5.2.4 讨论四：成酯化合物人工合成探究  108-110
      5.2.5 讨论五：刺囊酸皂苷构效关系研究与探讨  110-112
      5.2.6 讨论六：冷水七的活性成分和中药多靶点性  112-115
  参考文献  115-119
第二章中华猕猴桃根保肝药效物质基础的初步研究  119-155
  前言  119-120
  第一节中华猕猴桃根保肝活性部位的筛选  120-123
    1.1 CCl_4 急性肝损伤小鼠模型的建立  120-121
    1.2 各部位对CCl_4急性肝损伤小鼠的保肝降酶活性  121-122
    1.3 小结  122-123
  第二节中华猕猴桃根化学成分研究  123-146
    2.1 中华猕猴桃根化学成分的名称和结构  123-126
    2.2 中华猕猴桃根化学成分的结构鉴定  126-145
      2.2.1 新化合物的结构解析  126-131
      2.2.2 部分已知化合物的结构解析  131-145
    2.3 中华猕猴桃根多糖含量的初步测定  145-146
  第三节实验部分  146-150
    3.1 仪器与材料  146
    3.2 药材鉴定与提取分离  146-150
      3.2.1 中华猕猴桃根的采集与鉴定  146
      3.2.2 各极性部位的分离  146
      3.2.3 多糖部位的提取和多糖含量的测定  146-148
      3.2.4 各部位化学成分分离流程  148-150
  第四节总结与讨论  150-153
    4.1 总结  150-151
    4.2 讨论  151-153
      4.2.1 讨论一：三萜类化合物的保肝作用  151
      4.2.2 讨论二：三萜类化合物在猕猴桃科植物中的化学分类学意义  151-153
  参考文献  153-155
第三章综述  155-190
  一刺囊酸及其皂苷的化学和活性研究进展（英文）  155-183
    1. 刺囊酸的发现和结构确定  155-157
    2. 刺囊酸及其皂苷在植物界的分布  157-160
    3. 植物中刺囊酸皂苷的结构  160-170
    4. 刺囊酸及其皂苷的生物活性  170-173
    References  173-183
   二猕猴桃属植物化学成分的研究进展  183-190
    参考文献  187-190
致谢  190-191
附录  191-192

冷水七、中华猕猴桃根的物质基础研究

内容摘要

全文目录

相似论文