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人剪切修复基因XPD对p52及p21基因的影响

作　者: 马果果
导　师: 张吉翔
学　校: 南昌大学
专　业: 内科学
关键词: 肝肿瘤 癌 NF-κB，p52亚基 原癌基因蛋白质p22(ras) DNA修复
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 23次
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内容摘要


目的：探讨人剪切修复基因XPD转染入HepG2盯癌细胞后p52和p21基因表达的变化以及对肝癌细胞生长的影响。方法：人肝癌细胞HepG2为靶细胞,XPD基因通过Lipofectamine2000脂质体转染HepG2。将细胞分为重组质粒HepG2-pEGFP-N2-XPD组(XPD组)、空载质粒HepG2-pEGFP-N2组(N2组)和HepG2空白对照组。分别用逆转录PCR(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)法检测各组细胞中XPD、p52以及p21的mRNA和蛋白质的表达量,并用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法检测各组细胞的增殖能力。结果：XPD组中的p52的mRNA表达较其他2组显著下调,XPD和p21的mRNA表达较其他2组显著升高(均P<0.O1)。Western blot法检测显示在XPD组中p52的蛋白表达较N2组和空白对照组显著下降,而基因XPD及p21的蛋白表达较N2组和空白对照组显著升高(均P<0.01)。细胞增殖活力检测(MTT)显示XPD转染入HepG2后细胞增殖能力减弱。结论：XPD基因可以抑制癌细胞的生长和基因p52的表达,促进p21的表达。

全文目录


摘要  3-4
ABSTRACT  4-6
第1章 前言  6-8
第2章 实验材料及主要方法  8-16
  2.1 材料  8-9
    2.1.1 细胞及质粒  8
    2.1.2 主要实验试剂  8-9
    2.1.3 主要设备仪器  9
  2.2 实验方法  9-16
    2.2.1 HepG2细胞培养  9-10
    2.2.2 转染XPD基因入HepG2  10-11
    2.2.3 RT-PCR分析  11-12
    2.2.4 蛋白印迹法  12-14
    2.2.5 测定细胞增殖活力  14-15
    2.2.6 统计学分析  15-16
第3章 实验结果  16-20
  3.1 质粒转染结果  16
  3.2 各组细胞XPD、P52、P21 mRNAs表达量的情况  16-17
  3.3 各组细胞XPD、P52、P21蛋白的表达情况  17-18
  3.4 细胞增殖活力测定结果  18-20
第4章 讨论  20-22
第5章 结论  22-23
致谢  23-24
参考文献  24-26
攻读学位期间的研究成果  26-27
综述1  27-33
  参考文献  31-33
综述2  33-38
  参考文献  37-38

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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