学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

灰葡萄孢拮抗细菌种类鉴定、生长条件及在番茄体表定殖的研究

作　者: 纪兆林
导　师: 徐敬友
学　校: 扬州大学
专　业: 作物遗传育种
关键词: 拮抗细菌地衣芽孢杆菌多粘类芽孢杆菌生长条件发酵配方定殖灰葡萄孢
分类号: S852.61
类　型: 硕士论文
年　份: 2002年
下　载: 190次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

对灰葡萄孢等病菌拮抗能力强、防病效果好的3株细菌，经形态、培养性状观察和生理生化测定，鉴定为2属2种，即W10为地衣芽孢杆菌[Bacillus licheniformis(weigmann)Chester]；W3和Y2-11-1为多粘类芽孢杆菌[Paenibacillus polymyxa(Prazmowski)Ash et al]。这两种对蔬菜灰霉病的高效拮抗细菌为国内首次报道和应用。 3株拮抗细菌的生长条件研究表明，通常菌量达到最大时的培养时间为24～72h；生长温度为27～30℃；培养液pH值为7～8。根据试验结果及经济因素，拮抗细菌的最佳营养发酵配方是：W10菌株为1％麦芽糖，4％黄豆饼粉，0.2％硝酸钠，0.02％磷酸氢二钾和0.05％酵母膏：W3菌株为2％蔗糖，4％黄豆饼粉，0.4％酵母膏；Y2-11-1菌株为1％麦芽糖，2％黄豆饼粉，0.2％硝酸钠，0.02％磷酸氢二钾以及0.2％酵母膏。 3株拮抗细菌通过抗药性诱导，获得抗利福平350μg／ml的标记菌株，并用于检测在番茄植株体表的定殖能力。拮抗细菌在番茄植物体表的定殖与定殖部位、引进浓度、接种灰霉病菌时间和环境因子有关。在番茄叶表拮抗细菌处理后10～15d仍可检测到一定的菌量。拮抗细菌在番茄果表的定殖能力与最初引进的细菌浓度呈正相关，即引进的浓度越高，定殖时间越长，定殖的菌量也越大。除W10菌株外，在高浓度(10~9cfu／ml)下，拮抗细菌处理后10～15d也能检测到少量细菌。与对照相比，接种灰霉病菌对拮抗细菌的定殖有一定的影响。但是，先接种拮抗细菌后接种灰霉病菌(间隔1d)要比拮抗细菌与灰霉病菌同时接种、先接种灰霉病菌后接种拮抗细菌影响小。这表明灰霉病菌与拮抗细菌间存在营养、空间的竞争，也显示拮抗细菌在灰霉病害发生前使用要比发生后使用效果好。温度、湿度、光照等环境因子对拮抗细菌的定殖均有影响。拮抗细菌定殖的最佳条件一般为：高湿(RH 95～100％)、光照12h和温度25～35℃。在一定的温度扬州大学硕士学位论文范围内(15一35℃)，温度愈高，越有利于拮抗细菌的生长和定殖。光照对拮抗细菌的定殖也影响很大，黑暗或持续光照24h条件下，拮抗细菌的定殖要比光照12h差。一般来说，拮抗细菌的生长和定殖需要高湿(RH 95一10俄)条件，湿度越高，定殖越好。

全文目录

中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-18
  一、蔬菜灰霉病的发生与防治  9-10
    (一) 灰霉病的危害症状  9
    (二) 灰霉病的发生规律  9-10
    (三) 灰霉病的防治及存在问题  10
  二、蔬菜灰霉病生物防治  10-17
    (一) 生物防治的概念及重要性  11-12
      1 、生物防治的概念  11
      2 、生物防治的重要性  11-12
    (二) 蔬菜灰霉病生防微生物  12-17
      1 、拮抗真菌  12-15
      2 、拮抗链霉菌  15
      3 、拮抗细菌  15-17
  三、论文研究目的和意义  17-18
材料与方法  18-26
  一、菌株来源  18
  二、培养基  18
  三、拮抗性测定  18-19
  四、拮抗细菌种类鉴定  19
  五、拮抗细菌生长条件测定  19
    (一) 菌量lg(cfu／ml)-吸光值A标准曲线的建立  19
    (二) 培养时间对细菌生长的影响  19
    (三) 温度对细菌生长的影响  19
    (四) pH对细菌生长的影响  19
  六、拮抗细菌发酵营养测定  19-21
    (一) 培养基原料  19-20
    (二) 细菌种液的制备  20
    (三) 发酵培养液的配制  20-21
      1 、不同碳源培养液的配制  20
      2 、不同有机氮源培养液的配制  20
      3 、不同无机氮源培养液的配制  20
      4 、不同金属离子培养液的配制  20-21
      5 、不同浓度酵母膏培养液的配制  21
    (四) 摇瓶发酵培养及菌量测定  21
  七、拮抗细菌耐药标记菌株的诱导及拮抗能力的测定  21-23
    (一) 利福平母液的配制  21
    (二) 含利福平梯度平板的制备  21
    (三) 拮抗细菌对利福平敏感浓度的测定  21-22
    (四) 耐利福平标记菌株的诱导  22-23
    (五) 耐药标记菌株与原始菌株拮抗能力的比较  23
  八、拮抗细菌在番茄植株体表的定殖试验  23-26
    (一) 耐药标记菌株悬浮液的制备  23
    (二) 磷酸盐缓冲液PBS的配制  23
    (三) 供试植物  23-24
    (四) 拮抗细菌在番茄叶表的定殖试验  24
    (五) 拮抗细菌在番茄果表的定殖试验  24-26
      1 、无机盐营养液的制备  24
      2 、灰葡萄孢菌丝悬浮液的制备  24
      3 、定殖试验方法  24-25
      4 、不同浓度拮抗细菌的定殖试验  25
      5 、不同时间接种灰霉对拮抗细菌定殖的影响  25
      6 、环境条件对拮抗细菌定殖的影响  25-26
结果与分析  26-41
  一、拮抗细菌对灰霉等常见植物病原真菌的拮抗效果  26
  二、拮抗细菌的种类鉴定  26-29
    (一) 拮抗细菌的形态和培养性状  26-27
    (二) 拮抗细菌的生理生化性状  27-28
    (三) 拮抗细菌的种类鉴定  28-29
  三、拮抗细菌的生长条件  29-30
    (一) 拮抗细菌浓度对数-吸光值标准曲线  29
    (二) 不同培养时间下拮抗细菌的生长  29
    (三) 不同温度下拮抗细菌的生长  29-30
    (四) 不同pH下拮抗细菌的生长  30
  四、拮抗细菌的营养配方  30-35
    (一) 碳源营养  30-31
    (二) 氮源营养  31-33
    (三) 金属离子  33-34
    (四) 酵母膏  34-35
  五、耐药标记菌株的诱导及与原始菌株拮抗能力的比较  35
    (一) 拮抗细菌对利福平的敏感浓度  35
    (二) 抗利福平菌株的诱导  35
    (三) 诱导菌株与原始菌株对灰霉菌拮抗性的比较  35
  六、拮抗细菌在番茄植株体表的定殖  35-41
    (一) 拮抗细菌在番茄叶表的定殖  35-36
    (二) 抗抗细菌在番茄果表的定殖  36-41
      1 、拮抗细菌浓度对定殖的影响  36-37
      2 、接种灰霉对拮抗细菌定殖的影响  37-38
      3 、环境条件对细菌定殖的影响  38-41
        (1) 温度对细菌定殖的影响  38-39
        (2) 湿度对细菌定殖的影响  39-40
        (3) 光照对细菌定殖的影响  40-41
讨论  41-45
参考文献  45-53
致谢  53

灰葡萄孢拮抗细菌种类鉴定、生长条件及在番茄体表定殖的研究

内容摘要

全文目录

相似论文