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辣椒疫病生防菌的筛选、鉴定及其微生物有机肥的生物效应研究
作 者: 梅新兰
导 师: 徐阳春
学 校: 南京农业大学
专 业: 植物营养学
关键词: 辣椒疫病 拮抗细菌 筛选与鉴定 微生物有机肥
分类号: S436.418
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
辣椒疫病是由辣椒疫霉(Phytophthora capsici)引起的世界范围内毁灭性土传病害之一,该病害的防治方法已成为辣椒生产的研究热点。生物防治以其对人畜安全,不污染环境,不产生抗性,能参与生态环境调控,保持生态平衡等作用正成为克服土传病害的重要途径之一,具有广阔的发展前景。本文从辣椒疫病生防菌株的分离、筛选、鉴定、及其制成的微生物有机肥料对辣椒疫病的生防效果等方面进行了较系统研究,主要结果如下:从辣椒疫病发生严重田块健康植株根际土壤中分离到98株细菌,通过贫营养、胚根侵染试验以及抑菌谱试验,筛选出两株具有广谱抗性并在贫营养条件下生长良好的高效拮抗菌HL-3和LZ-8。菌株HL-3和LZ-8对辣椒疫霉菌丝生长抑制率分别为72.4%和68.0%,其发酵液对辣椒疫霉的抑菌带达16~17 mm,胚根侵染率分别为9.14%和5.81%;对黄瓜枯萎病菌、辣椒枯萎病菌、棉花黄萎病菌、黄瓜立枯病菌、烟草黑胫病菌和番茄青枯病原细菌均有显著抑制作用。温室盆栽模拟生物试验中HL-3和LZ-8对辣椒苗期疫病的防治效果分别达71.9%和83.1%,同时对辣椒生长表现出明显的促生作用。通过形态观察、生理生化特性和16S rDNA序列分析,初步鉴定HL-3为多粘芽孢杆菌,LZ-8为短小芽孢杆菌。HL-3在碳源为甘露糖,氮源为酵母粉,初始pH值为6,生长温度为26℃,装液量25ml/250ml时生长最好;LZ-8在碳源为麦芽糖,氮源为蛋白胨,初始pH值为6,生长温度为30℃,装液量50ml/250ml时生长最好。营养钵育苗中微生物有机肥的施用量为1.5%土时,辣椒生长最好,生物量最大。在温室盆栽试验中,施用微生物有机肥的处理辣椒生物量、产量显著提高,发病率显著降低,防治效果在75%以上,其中以混合微生物有机肥(Bm)的防治效果最好,发病率只有6.22%,防治效果达92.94%。HL-3菌株发酵的微生物有机肥(B3)的防治作用大于菌株LZ-8发酵的微生物有机肥(B8),B8处理的促生作用大于B3。田间试验结果表明,施用微生物有机肥的处理辣椒生长健壮,分枝多,根系发达,辣椒疫病的发病时间延迟,发病率显著降低,控制在5%以下,防效达到80%以上,产量较对照显著增加,前党庄和梦老庄两试验点辣椒分别增产45%和26%。
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全文目录
摘要 8-9ABSTRACT 9-11第一章 文献综述 11-31 1.1 辣椒疫病研究进展 11-15 1.1.1 辣椒疫病的发生症状及其发生发展规律 11-12 1.1.2 辣椒疫病病原菌的分类学地位及其生物学特性 12-13 1.1.3 辣椒疫病的危害及辣椒疫霉致病机理 13-14 1.1.4 辣椒疫病病害流行因素及病害循环 14-15 1.1.5 辣椒疫病的防治及存在的问题 15 1.2 疫病生物防治研究进展 15-18 1.2.1 生防真菌 15-16 1.2.2 生防细菌 16-17 1.2.3 生防放线菌 17 1.2.4 其它生防因子 17-18 1.3 微生物肥料概述 18-24 1.3.1 微生物肥料的含义和特点 18 1.3.2 微生物肥料的类型和作用机理 18-24 1.4 选题的目的和意义 24-25 1.5 研究内容和技术路线 25-27 1.5.1 研究内容 25-26 1.5.2 技术路线 26-27 参考文献 27-31第二章 辣椒疫病病原菌研究 31-41 2.1 材料 31-32 2.1.1 供试病原菌株 31 2.1.2 培养基 31-32 2.1.3 供试辣椒苗 32 2.2 方法 32-33 2.2.1 病原菌回接与分离 32-33 2.2.2 辣椒疫霉NGDP生长速率测定 33 2.2.3 辣椒疫霉游动孢子悬液浓度与发病率关系研究 33 2.3 结果与分析 33-38 2.3.1 辣椒疫霉NGDP的致病性及其鉴定 33-35 2.3.2 培养基种类对辣椒疫霉NGDP生长的影响 35-37 2.3.3 辣椒疫霉NGDP游动孢子悬液浓度与发病率的关系 37-38 2.4 讨论 38-39 参考文献 39-41第三章 高效拮抗辣椒疫病菌株的分离与筛选 41-53 3.1 材料 41-42 3.1.1 土壤试验样本 41 3.1.2 供试病原菌株 41-42 3.1.3 培养基 42 3.2 方法 42-44 3.2.1 样品的采集 42 3.2.2 拮抗菌的分离 42-43 3.2.3 拮抗菌的复筛 43 3.2.4 拮抗菌的抗菌谱鉴定 43-44 3.2.5 拮抗菌株的培养滤液对辣椒疫霉NGDP生长的影响 44 3.2.6 拮抗菌蘸根对辣椒疫病的温室防病试验 44 3.2.7 数据处理 44 3.3 结果与分析 44-49 3.3.1 辣椒疫病拮抗菌的分离 45 3.3.2 辣椒疫病拮抗菌的筛选 45-47 3.3.3 拮抗菌的抗菌谱鉴定 47 3.3.4 拮抗菌无菌滤液对辣椒疫霉NGDP生长的影响 47-48 3.3.5 拮抗菌蘸根对辣椒疫病的温室防治效应 48-49 3.4 讨论 49-50 参考文献 50-53第四章 高效拮抗菌株HL-3和LZ-8的鉴定 53-73 4.1 材料与方法 53-60 4.1.1 形态观察及生长条件的测定 53-54 4.1.2 生理生化特征测定 54-57 4.1.3 HL-3和LZ-8菌株的16S rDNA序列的测定 57-60 4.2 结果与分析 60-70 4.2.1 形态观察与描述 60-61 4.2.2 生理生化特性的测定 61-64 4.2.3 生防菌株HL-3和LZ-8的生物学特性 64-67 4.2.4 HL-3和LZ-8菌株的16S rDNA全序列测定及分析 67-70 4.3 讨论 70-71 参考文献 71-73第五章 微生物有机肥对辣椒疫病的防治效应研究 73-87 5.1 材料 73-75 5.1.1 供试土壤 73-74 5.1.2 供试辣椒品种 74 5.1.3 微生物有机肥制备 74 5.1.4 生物肥料盆栽防效试验方案 74 5.1.5 营养钵育苗施肥量研究 74-75 5.1.6 大田试验方案 75 5.2 方法 75-76 5.2.1 辣椒植株高度测定 75 5.2.2 辣椒植株地上部分鲜重及干重测定 75 5.2.3 辣椒植株地下根鲜重及干重 75-76 5.2.4 辣椒植株光合速率测定 76 5.2.5 土壤养分测定 76 5.3 结果与分析 76-83 5.3.1 盆栽试验中微生物有机肥对辣椒疫病的防治效应 76-78 5.3.2 微生物有机肥营养钵育苗施肥量研究 78-81 5.3.3 田间施用微生物有机肥对辣椒疫病的防治效应 81-83 5.4 讨论 83-84 参考文献 84-87全文结论 87-89致谢 89-91作者简介 91-93在读硕士期间发表的论文 93
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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 园艺作物病虫害及其防治 > 蔬菜病虫害 > 茄果类病虫害 > 辣椒病虫害
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