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火针对跟腱末端病大鼠末端区组织、HSP70表达及细胞凋亡的影响

作　者: 郭佳佳
导　师: 张玉芹
学　校: 首都体育学院
专　业: 运动人体科学
关键词: 跟腱 末端病 末端区 热休克蛋白70 凋亡指数
分类号: R245
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的采用“电击跳跃法”建立大鼠跟腱末端病模型,并对模型进行火针治疗。观察末端区组织和细胞形态变化、HSP70表达和细胞凋亡指数变化,依据末端结构特点从病因、病理角度探讨火针治疗末端病的作用机理,为末端病的火针疗法提供理论依据。方法以1月龄雄性SD大鼠为研究对象,通过“电击跳跃法”建立跟腱末端病模型。将88只大鼠随机分为3大组,分别为：正常组,治疗组(治疗1、2、3、4、5组)和对照组(对照1、2、3、4、5组)。造模后进行火针治疗,于1次治疗后第1、2、3、4天分别处死治疗1、2、3、4组及其相应对照组,再于4次治疗后第4天处死治疗5组和对照5组,取每只大鼠单侧后足跟腱和完整的跟腱末端区组织,经固定、脱钙、包埋、切片、贴片、烤片后,常规HE染色,观察末端区组织和细胞形态变化；采用免疫组化ABC法检测末端区跟腱、纤维软骨区、钙化软骨区、跟骨、腱骨关节面软骨的HSP70阳性率；应用TUNEL法检测跟腱、纤维软骨区、钙化软骨区、跟骨、腱骨关节面软骨、腱围的细胞凋亡指数(AI)。所有数据用SPSS13.0进行统计分析。结果(1)HE染色镜下观察：经1次火针治疗后,治疗1、2、3组大鼠跟腱末端区与对照组相比,在病理上无明显变化。治疗4组在腱围、跟腱等部位的病理有所改善,但差异并不显著。而经4次火针治疗后,治疗5组从病理上看明显减轻,更接近于正常组。(2)HSP70表达：1次火针治疗后,治疗组大鼠末端区主要在纤维软骨区、腱骨关节面软骨两个部位的HSP70阳性率比对照组有不同程度升高；经4次火针治疗后,纤维软骨区、腱骨关节面软骨两个部位的HSP70阳性率明显高于对照组；4次火针治疗后在纤维软骨区、腱骨关节面软骨两个部位的HSP70阳性率明显高于1次火针治疗。(3)细胞凋亡检测：1次火针治疗后,治疗组大鼠末端区主要在跟腱、纤维软骨区、腱围这三个部位的AI比对照组有不同程度降低；经4次火针治疗后,跟腱、纤维软骨区、腱骨关节面软骨、腱围的AI明显低于对照组；4次火针治疗后在跟腱、纤维软骨区、腱骨关节面软骨、腱围的AI明显低于1次火针治疗。结论(1)8周“电击跳跃法”造模训练成功地建立了大鼠跟腱末端病模型。(2)1次火针治疗诱导末端区合成大量HSP70,主要表现在纤维软骨区、腱骨关节面软骨两个部位,且在针刺后当天即达到一个高峰,之后3天呈连续下降趋势。4次火针治疗后这两个部位的HSP70合成量大大增加,HSP70阳性率明显升高,4次火针治疗能更进一步促进末端病的恢复。(3)1次火针治疗加速了跟腱、纤维软骨区、腱围三个部位凋亡细胞的吸收和清除,促进了末端区组织和细胞的修复。而4次火针治疗后,在跟腱、腱骨关节面软骨、纤维软骨区、腱围等多个部位的细胞凋亡指数都发生了改变,末端区的整体结构得到了恢复,4次火针治疗在促进末端病的整体恢复上效果更好。

全文目录


摘要  5-6
ABSTRACT  6-8
中英文缩略词表  8-9
1 前言  9-15
  1.1 选题依据  9
  1.2 研究目的、意义  9
  1.3 研究任务  9
  1.4 文献综述  9-15
    1.4.1 名称由来  9-10
    1.4.2 末端区的解剖结构  10
    1.4.3 末端病的病理变化  10-11
    1.4.4 末端病的病因  11
    1.4.5 末端病的发病机制  11-14
    1.4.6 末端病的预防  14
    1.4.7 末端病的治疗  14-15
2 研究对象与方法  15-20
  2.1 仪器与试剂  15-17
    2.1.1 主要仪器  15-16
    2.1.2 主要试剂及配制  16-17
  2.2 研究对象  17
  2.3 实验方法  17-19
    2.3.1 动物造模  17
    2.3.2 动物分组  17
    2.3.3 火针治疗  17
    2.3.4 取材及组织切片制作  17-18
    2.3.5 测试指标及方法  18-19
  2.4 图像采集及处理  19-20
    2.4.1 HE染色  19
    2.4.2 HSP70检测  19-20
    2.4.3 细胞凋亡检测  20
  2.5 统计分析  20
3 研究结果  20-44
  3.1 一般观测指标  20-21
  3.2 HE染色观察  21-27
    3.2.1 正常组大鼠跟腱末端区HE染色镜下观察  21-22
    3.2.2 对照1、2、3、4组大鼠跟腱末端区HE染色镜下观察  22-24
    3.2.3 治疗1、2、3、4组大鼠跟腱末端区HE染色镜下观察  24-26
    3.2.4 对照5组大鼠跟腱末端区HE染色镜下观察  26
    3.2.5 治疗5组大鼠跟腱末端区HE染色镜下观察  26-27
  3.3 HSP70表达统计结果  27-35
    3.3.1 治疗1组与对照1组大鼠跟腱末端区HSP70表达的比较  28-29
    3.3.2 治疗2组与对照2组大鼠跟腱末端区HSP70表达的比较  29-30
    3.3.3 治疗3组与对照3组大鼠跟腱末端区HSP70表达的比较  30-31
    3.3.4 治疗4组与对照4组大鼠跟腱末端区HSP70表达的比较  31-32
    3.3.5 治疗5组与对照5组大鼠跟腱末端区HSP70表达的比较  32-33
    3.3.6 1次火针治疗与4次火针治疗后大鼠跟腱末端区HSP70表达的比较  33-35
  3.4 细胞凋亡检测结果  35-44
    3.4.1 治疗1组与对照1组大鼠跟腱末端区细胞凋亡指数的比较  36-37
    3.4.2 治疗2组与对照2组大鼠跟腱末端区细胞凋亡指数的比较  37-38
    3.4.3 治疗3组与对照3组大鼠跟腱末端区细胞凋亡指数的比较  38-39
    3.4.4 治疗4组与对照4组大鼠跟腱末端区细胞凋亡指数的比较  39-41
    3.4.5 治疗5组与对照5组大鼠跟腱末端区细胞凋亡指数的比较  41-42
    3.4.6 1次火针治疗与4次火针治疗后大鼠跟腱末端区细胞凋亡指数的比较  42-44
4 分析与讨论  44-48
  4.1 大鼠跟腱末端区HE染色结果分析  44-45
    4.1.1 末端病动物模型的建立  44-45
    4.1.2 HE染色镜下观察结果分析  45
  4.2 大鼠跟腱末端区HSP70表达结果分析  45-47
  4.3 细胞凋亡检测结果分析  47-48
5 结论  48-49
参考文献  49-53
致谢  53

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中医临床学 > 针灸学、针灸疗法
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