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TLR信号途径对肿瘤细胞增殖的影响

作　者: 赵娜
导　师: 张桂梅；冯作化；黄波
学　校: 华中科技大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 脂多糖(LPS) 热休克蛋白70(HSP70) TLR信号通路 H22细胞 MCF-7细胞
分类号: R730.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的本文拟研究HSP70对小鼠肝癌细胞H22和人乳腺癌细胞MCF-7的增殖能力的影响,以探讨TLR信号通路对肿瘤细胞增殖可能的机制。方法(1)分别用LPS和HSP70刺激H22细胞,RT-PCR检测TLR2和TLR4 mRNA的表达。(2)分别用LPS和HSP70刺激H22细胞,作用不同时间后,Western blot检测GSK3β信号。(3)分别用LPS和HSP70刺激H22细胞,Western blot检测β-catenin的表达。(4)HSP70刺激MCF-7细胞3天,RT-PCR检测cyclinD1a、cyclinD1b mRNA水平。(5)LPS和HSP70分别刺激H22细胞2天,Western blot检测HMGB1的表达。(6)体外分别加LPS和HSP70培养H22细胞和MCF-7细胞,采用细胞计数方法检测细胞增殖。(7)用丝裂霉素处理CFSE标记的H22细胞,同时分别用LPS和HSP70刺激H22细胞,流式细胞术检测增殖速度。(8)以LPS和HSP70处理过的H22细胞接种于昆明小鼠右后腿肌肉内,建立实验性小鼠肝癌模型,并通过比较肿瘤瘤重及成瘤时间观察LPS及HSP70对H22细胞成瘤能力的影响。结果(1)LPS、HSP70刺激H22细胞后,TLR-2、TLR-4的表达均明显增加。(2)随LPS及HSP70刺激H22细胞时间增加,磷酸化的GSK3β表达增加,而非磷酸化的GSK3β的总量没有变化。(3)经LPS、HSP70分别刺激H22细胞24小时后,β-catenin的表达均明显增加。(4)LPS、HSP70处理细胞后,cyclinD1a表达上调。(5)LPS和HSP70刺激H22细胞2天后,HMGB1表达上调。(6)LPS和HSP70处理的H22细胞和MCF-7细胞,增殖速度与对照组相比明显加快。(7)用丝裂霉素处理H22细胞后,分别用LPS和HSP70刺激H22细胞,增殖速度均比对照组快。(8)LPS和HSP70处理2天的H22细胞接种小鼠,成瘤速度及瘤重均高于对照组。结论LPS和HSP70可通过激活TLR信号通路,进一步激活Wnt信号通路,提高肿瘤细胞的增殖速度。

全文目录

缩略词及中英文对照  5-7
中文摘要  7-9
英文摘要  9-11
前言  11-13
材料与方法  13-22
结果  22-31
讨论  31-33
参考文献  33-36
综述  36-67
  参考文献  57-67
致谢  67

TLR信号途径对肿瘤细胞增殖的影响

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