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犬贾第虫病毒感染性体外转录体的制备及转染试验

作　者: 曹利利
导　师: 张西臣
学　校: 吉林大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 犬贾第虫病毒体外转录体转染超微结构
分类号: S852.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

本研究根据犬贾第虫病毒(长春株)基因序列设计一套含T7启动子的特异性重叠引物,构建犬贾第虫病毒基因组全长cDNA克隆,制备感染性犬贾第虫病毒体外转录体,采用体外转录体电穿孔转染和病毒粒子与无毒株滋养体共孵育两种感染方法进行感染试验,感染后每隔12h收取一次虫体,通过透射电镜观察病毒感染对无毒株滋养体细胞的影响。结果成功构建了犬贾第虫病毒基因组全长cDNA克隆,体外转录体具有感染性;转染和共孵育两种途径感染后都可检测到病毒;适量的病毒感染对细胞生长无毒性,感染后两组虫体在前24h都抑制生长,48h逐渐开始恢复生长,60h稳定生长并携病毒繁殖;电镜观察两种方法感染36h后在细胞质中都可见病毒粒子,60h细胞质中的病毒粒子呈串珠状饱满且准备外溢;72h病毒粒子均等的出现在两个核中。病毒感染导致犬贾第虫亚细胞结构改变,细胞器严重空泡化;48h后感染细胞结构与携病毒细胞无明显差异。

全文目录

内容提要  4-8
前言  8-11
第一篇文献综述  11-41
  第一章贾第虫研究进展  11-23
    1 贾第虫的形态结构  11-12
    2 贾第虫病毒的研究  12-15
    3 致病机制  15-16
    4 贾第虫抗原研究  16-18
    5 动物模型的建立  18-19
    6 体外培养的研究  19
    7 诊断方法  19-21
    8 防治  21
    9 小结  21-23
  第二章 RNA 病毒的拯救系统研究进展  23-41
    1 感染性病毒基因组全长cDNA 克隆  24-27
    2 一般病毒拯救体系的方法学  27-32
    3 病毒拯救的实现  32-35
    4 应用  35-39
    5 小结  39-41
第二篇研究内容  41-76
  第一章感染性犬贾第虫病毒基因组全长cDNA克隆的构建  41-54
    1 材料与方法  41-48
    2 结果  48-51
    3 讨论  51-53
    4 小结  53-54
  第二章犬贾第虫病毒感染性体外转录体制备及转染试验  54-62
    1 材料与方法  54-57
    2 结果  57-59
    3 讨论  59-60
    4 小结  60-62
  第三章犬贾第虫病毒感染试验及超微结构动态观察  62-76
    1 材料与方法  62-64
    2 结果  64-72
    3 讨论  72-74
    4 小结  74-76
结论  76-77
参考文献  77-90
中文摘要  90-92
英文摘要  92-95
致谢  95-96
导师及作者简介  96-97

犬贾第虫病毒感染性体外转录体的制备及转染试验

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