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中药提取物体外抗真菌活性的实验研究

作　者: 王玲
导　师: 孙令
学　校: 大连医科大学
专　业: 皮肤病与性病学
关键词: 体外抗真菌活性中药水提取物乙醇提取物超微结构
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

目的:本研究采用中药提取、体外药物敏感试验和扫描电镜的方法,观察黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肤子等六味常用中药的水提取成分和乙醇提取成分,对7种浅部真菌的体外抗真菌活性,研究不同中药单体、不同提取成分对不同浅部真菌的抑菌作用和杀菌作用,拟寻找来源广泛,价格低廉,副作用小的有效抗真菌中药。方法:将黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肤子六味中药分别用蒸馏水和95%乙醇提取得中药水提取和乙醇提取粉末或浸膏。采用药基琼脂稀释法,检测对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、石膏样小孢子菌、犬小孢子菌、絮状表皮癣菌、白念珠菌、糠秕马拉色菌等7种浅部真菌的体外抗真菌活性。白念珠菌组置于37℃温箱孵育24～48小时,糠秕马拉色菌组置于37℃温箱孵育3～4天;皮肤癣菌组置于26℃温箱孵育7天判读最小抑菌浓度(MIC)。将新鲜的沙氏液体培养基(SDA)倒入没有真菌生长的含药培养基中,接种环轻刮培养基表面,沙氏液体培养基震荡充分后倒出,白念珠菌组置于37℃温箱孵育3天、皮肤癣菌组置于26℃温箱孵育7天判读最小杀菌浓度(MFC);糠秕马拉色菌组,将倒出的沙氏液基离心,弃上清液,沉淀物接种于含4%橄榄油的SDA培养基,置于37℃温箱孵育7天判读MFC。将浓度为2.5mg/ml水提黄连溶液和浓度为0.3125mg/ml乙醇提蛇床子溶液加入已转种活化7天的红色毛癣菌标准株T.1a试管中,分别于作用2小时、8小时、24小时,各取出一块菌块,采用扫描电镜观察水提黄连、醇提蛇床子对红色毛癣菌形态影响的连续性变化。结果:1. 5种10株皮肤癣菌对水提黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肤子、乙醇提黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肤子的MIC值范围分别在0.3125~2.5mg/ml,0.625~1.25mg/ml,1.25~≥5.0mg/ml,>5.0mg/ml,≥5.0mg/ml,>5.0mg/ml,0.156~1.25mg/ml,0.156~1.25mg/ml,0.156~2.5mg/ml , 0.039~0.156mg/ml , 0.0195~0.156 mg/ml ,0.625~2.5mg/ml;3株白念珠菌MIC值范围分别在0.625~1.25mg/ml,≥5.0mg/ml , 2.5~5.0mg/ml , > 5.0mg/ml , > 5.0mg/ml , > 5.0mg/ml ,1.25mg/ml , 0.625~1.25mg/ml , 0.3125~0.625mg/ml ,≥2.5mg/ml ,≥2.5mg/ml ,≥2.5mg/ml ; 3株糠秕马拉色菌MIC值范围分别在0.625~1.25mg/ml,>5.0mg/ml,>5.0mg/ml,>5.0mg/ml,>5.0mg/ml,> 5.0mg/ml, 1.25mg/ml, > 2.5mg/ml, > 2.5mg/ml, > 2.5mg/ml,≥2.5mg/ml,>2.5mg/ml。2. 5种10株皮肤癣菌对水提黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肤子、乙醇提黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肤子的MFC值范围分别在2.5~≥5.0mg/ml,>5.0mg/ml,>5.0mg/ml,>5.0mg/ml,>5.0mg/ml,>5.0mg/ml,1.25~≥2.5 mg/ml,>2.5mg/ml,>2.5mg/ml,>2.5mg/ml,0.078~0.3125 mg/ml, >2.5mg/ml;3株白念珠菌MFC值范围分别在>5.0mg/ml,>5.0mg/ml,5.0mg/ml,>5.0mg/ml,>5.0mg/ml,>5.0mg/ml,>2.5mg/ml,>2.5mg/ml,0.625~2.5mg/ml,>2.5mg/ml,>2.5mg/ml,>2.5mg/ml;3株糠秕马拉色菌对水提中药成分MFC值范围均为>5.0mg/ml;对乙醇提中药成分MFC值范围均为>2.5mg/ml。3.扫描电镜观察结果:分别用2.5mg/ml水提黄连溶液和0.3125mg/ml乙醇提蛇床子溶液与红色毛癣菌作用2小时、8小时、24小时表现出菌丝与孢子的连续性破坏过程。结论:1.水提黄连、黄柏、土槿皮、蛇床子对皮肤癣菌有抑菌作用、水提黄连、黄柏、土槿皮对白念珠菌有抑菌作用、水提黄连对糠秕马拉色菌有抑菌作用;乙醇提黄连、黄柏、土槿皮、白鲜皮、蛇床子、地肤子对皮肤癣菌均有抑菌作用、乙醇提黄连、黄柏、土槿皮、蛇床子对白念珠菌有抑菌作用、乙醇提黄连对糠秕马拉色菌有抑菌作用。2.水提黄连、乙醇提黄连和蛇床子对皮肤癣菌有杀菌作用;土槿皮水提和乙醇提取成分对白念珠菌均有杀菌作用。

中药提取物体外抗真菌活性的实验研究

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