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细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗构建及其免疫机制研究

作　者: 朱佑明
导　师: 李文桂
学　校: 重庆医科大学
专　业: 内科学
关键词: 细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗免疫机制
分类号: R392
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

目的制作细粒棘球蚴BALB/c鼠模型,从细粒棘球绦虫原头节扩增Eg95蛋白编码基因,克隆入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭载体pBCG,电穿孔转化BCG,构建细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗,探讨Eg95抗原在重组BCG中的表达效率;用该疫苗免疫BALB/c小鼠,动态观察免疫小鼠血清IgE﹑IgG及其亚类的变化规侓；脾T细胞CD4+和CD8+亚群变化,以及脾细胞培养上清液IL-2﹑IL-4﹑IFN-γ和TNF-α变化水平;通过不同的免疫途径接种疫苗,在原头节攻击后,观察实验动物产生的保护力和检测血清IgE﹑IgG及其亚类;脾T细胞CD4+和CD8+亚群变化,脾细胞培养上清液IL-2﹑IL-4﹑IFN-γ和TNF-α水平,以及脾细胞的凋亡,从而初步阐述其保护性免疫机制,为CE疫苗的开发利用提供依据。方法以BALB/c鼠作为宿主,用腹腔注射Eg原头节的方法制作细粒棘球蚴BALB/c模型。从Eg包囊中分离原头节,超声粉碎后抽提总RNA作为模板。根据Genbank(AF199354)基因序列,自行设计一对引物并加入内切酶位点,采用RT-PCR方法扩增Eg95编码基因并鉴定,将

全文目录

符号说明  7-10
中文摘要  10-16
英文摘要  16-23
论文正文：细粒棘球绦虫重组 BCG-E995 疫苗构建及其免疫机制研究  23-134
  前言  23-29
    参考文献  26-29
  第一章细粒棘球绦虫重组BCG-E995 疫苗构建及鉴定  29-63
    第一节细粒棘球绦虫E995 编码基因的克隆及序列分析  29-39
      1.1 前言  29
      1.2 材料  29-30
      1.3 方法  30-33
      1.4 结果  33-34
      1.5 讨论  34-37
      参考文献  37-39
    第二节细粒棘球绦虫重组BCG-E995 疫苗构建及鉴定  39-54
      2.1 前言  39
      2.2 材料  39-40
      2.3 方法  40-49
      2.4 结果  49-51
      2.5 讨论  51-52
      参考文献  52-54
    第三节细粒棘球绦虫E995 抗原编码基因在BCG 中的表达效率研究  54-63
      3.1 前言  54
      3.2 材料  54
      3.3 方法  54-59
      3.4 结果  59-63
  第二章细粒棘球绦虫重组BCG-E995 疫苗免疫小鼠的动态观察  63-95
    第一节细粒棘球绦虫重组BCG-E995 疫苗免疫后小鼠 IgE、IgG 及其亚类的动态观察  63-76
      1.1 前言  63
      1.2 材料  63-64
      1.3 方法  64-65
      1.4 结果  65-74
      1.5 讨论  74-75
      参考文献  75-76
    第二节细粒棘球绦虫重组BCG-E995 疫苗免疫后小鼠T 淋巴细胞亚群的动态观察  76-82
      2.1 前言  76
      2.2 材料  76-77
      2.3 方法  77-78
      2.4 结果  78-80
      2.5 讨论  80-82
      参考文献  82
    第三节细粒棘球绦虫重组BCG-E995 疫苗免疫小鼠后细胞因子动态观察.  82-95
      3.1 前言  82-83
      3.2 材料  83
      3.3 方法  83-84
      3.4 结果  84-90
      3.5 讨论  90-93
      参考文献  93-95
  第三章细粒棘球绦虫重组 BCG-E995 疫苗的保护力及其免疫机制研究  95-134
    第一节细粒棘球绦虫重组BCG-E995 疫苗诱导的保护力观察  95-104
      1.1 前言  95
      1.2 材料  95-96
      1.3 方法  96-97
      1.4 结果  97-100
      1.5 讨论  100-102
      参考文献  102-104
    第二节细粒棘球绦虫重组BCG-E995 疫苗诱导小鼠T 淋巴细胞亚群变化的研究  104-109
      2.1 前言  104
      2.2 材料  104
      2.3 方法  104-105
      2.4 结果  105-106
      2.5 讨论  106-108
      参考文献  108-109
    第三节细粒棘球绦虫重组BCG-E995 疫苗诱导小鼠细胞因子变化的研究.  109-123
      3.1 前言  109
      3.2 材料  109
      3.3 方法  109-110
      3.4 结果  110-116
      3.5 讨论  116-119
      参考文献  119-123
    第四节细粒棘球绦虫重组BCG-E995 疫苗诱导小鼠脾细胞凋亡的研究..  123-134
      4.1 前言  123
      4.2 材料  123
      4.3 方法  123-124
      4.4 结果  124-128
      4.5 讨论  128-134
文献综述一  134-145
文献综述二  145-154
致谢  154-155
攻读学位期间发表的学术论文目录  155

细粒棘球绦虫重组BCG-Eg95疫苗构建及其免疫机制研究

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