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小儿呼吸道人类博卡病毒感染免疫致病机制的初步研究

作　者: 梁丹丹
导　师: 林广裕
学　校: 汕头大学
专　业: 儿科学
关键词: 呼吸道感染儿童人类博卡病毒免疫机制细胞因子
分类号: R725.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的了解人类博卡病毒在小儿呼吸道感染时其急性期外周血细胞因子的变化,旨在探讨该病毒感染的免疫致病机制。材料和方法材料:收集2010年3月～2010年9月广东省汕头大学医学院第二附属医院儿科因急性呼吸道感染住院患儿的咽拭子及其对应外周血血清574份,同时采集92例健康体检儿童呼吸道的咽拭子及其对应外周血血清作为对照研究。方法:1、应用PCR技术进行人类博卡病毒筛查,同时通过PCR或RT-PCR技术对上述咽拭子进行其他9种病毒(呼吸道合胞病毒、WU多瘤病毒、人偏肺病毒、腺病毒、流感病毒A,B型、副流感病毒1,3型和鼻病毒)筛查。2、在上述方法中筛查出的单纯人类博卡病毒阳性标本和单纯呼吸道合胞病毒阳性标本中找出对应的外周血血清标本,随机从中选出29份人类博卡病毒感染组血清和26例呼吸道合胞病毒感染组血清,同时随机挑选30例正常对照组血清。通过Elisa原理,应用液相蛋白芯片(Luminex)技术对3组血清中12种细胞因子(IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p40、IL-12p70、IL-13、IFN-γ、TNF-α)的含量进行检测,并对相关检测结果进行统计和分析。结果1、病毒筛查结果:574例患儿人类博卡病毒阳性92例(占16.02%),其中单纯人类博卡感染43例(46.73%),合并其他病毒感染的有49例(53.27%),分别为呼吸道合胞病毒(17例)、流感病毒A型(14例)、副流感病毒3型(10例)、副流感病毒1型(8例)、腺病毒(8例)、WU多瘤病毒(7例)、鼻病毒(1例)。呼吸道合胞病毒阳性68例(占11.84%),其中单纯呼吸道合胞病毒感染28例(41.18%),合并感染40例(58.82%),分别为流感病毒A型(22例)、人类博卡病毒(17例)、副流感病毒3型(13例)、WU多瘤病毒(10例)、腺病毒(7例)、副流感病毒1型(6例)、鼻病毒(1例)。92例健康体检儿童10种病毒的PCR筛查均阴性。2、外周血细胞因子检测结果:①单纯人类博卡病毒感染组患儿外周血IL-6、IL-8含量分别为27.71(136.78)、18.75(216.08),均较正常对照组明显升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。②单纯呼吸道合胞病毒感染组患儿外周血IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p40、IL-13、TNF-α的含量分别为3.21(3.00)、4.00(4.16)、2.00(1.78)、398.5(984.23)、246.00 (663.00)、3.00(2.78)、242.50(483.28)、3.00(1.68)、3.00(1.24),均较正常对照组明显升高,差异有统计学意义(P均<0.05)。③单纯人类博卡病毒感染组IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12p40、IL-12p70、TNF-α含量分别为1.84 (1.47)、27.71(136.78)、18.75(216.08)、41.00(114.65)、8.11(5.77)、2.76(0.42),单纯呼吸道合胞病毒感染组IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12p40、IL-12p70、TNF-α的含量分别为3.21(3.00)、398.5(984.23)、246.00 (663.00)、242.50(483.28)、4.00(4.56)、3.00(1.24),两组这6中细胞因子含量均较正常对照组升高,且两组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。④单纯人类博卡病毒感染组IL-1α、IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ的含量分别为1.22 (6.28)、1.22 (0.78)、1.22 (0.78)、1.22 (0.78)、1.22 (4.28),INF-γ/ IL-4比值为1,均比正常对照组降低,但与正常对照组差异均无统计学意义(P>0.05);而RSV组这5种细胞因子含量分别为9.00(9.78)、4.00(4.16)、2.00(1.78)、3.00(2.78)、6.00(4.78),INF-γ/ IL-4比值为3,均比单纯人类博卡病毒感染组高,其中IL-1α、IL-2、IL-10水平两组差异有统计学意义(P均<0.05),两组IL-4、INF-γ水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论人类博卡病毒感染同呼吸道合胞病毒感染一样可导致患儿相应的免疫功能紊乱,且其免疫变化同普通呼吸道合胞病毒感染引起的免疫变化相似,程度相对较轻。机体抗人类博卡病毒感染免疫过程中存在细胞Th1/Th2失衡和Th2类细胞因子占优势。

全文目录

摘要  3-5
ABSTRACT  5-7
英文缩写表  7-10
第一章前言  10-12
第二章小儿呼吸道博卡病毒感染免疫致病机制的初步研究  12-32
  1 研究对象、材料与方法  12-19
    1.1 研究对象  12
    1.2 仪器和耗材  12-13
    1.3 试剂  13
    1.4 主要液体配制  13-14
    1.5 标本收集  14
    1.6 标本检测  14-18
      1.6.1 临床标本病毒核酸提取  14-15
      1.6.2 病毒筛查  15-17
      1.6.3 细胞因子检测  17-18
    1.7 临床资料的整理  18
    1.8 统计学方法  18-19
  2 结果  19-26
    2.1 病毒筛查结果  19-20
    2.2 29例单纯HBoV和26 例单纯RSV患儿的临床资料分析结果  20-21
    2.3 3组患儿外周血血清中细胞因子含量的分析比较  21-26
  3 讨论  26-31
  4 结论  31-32
参考文献  32-35
文献综述  35-42
  参考文献  40-42
附录1  42-43
附录2  43-44
附录3  44-45
致谢  45-46
作者简历  46

小儿呼吸道人类博卡病毒感染免疫致病机制的初步研究

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