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南繁条件下转基因棉花对根际土壤微生物及棉田虫害影响的初步研究

作　者: 王昊
导　师: 郭安平
学　校: 海南大学
专　业: 农业生物技术
关键词: 抗虫棉转基因生物安全根际土壤微生物
分类号: S435.622
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

海南是我国的天然温室,具有得天独厚的气候条件和光温资源,尤其是冬季,适于各种不同作物的生长。随着转基因作物研究开发的飞速发展,近年来转基因作物材料在海南的南繁亦相应增多,急需对海南南繁中的转基因作物开展环境安全性监测研究,以便在科学基础上进行规范化安全管理,转基因棉花作物是否可以安全的进行南繁,是我们迫切希望解决的问题。转基因作物安全评价是当前生物安全研究的重要内容。本实验以海南三亚南繁基地为实验平台,通过比较转BT/CPTI双价基因抗虫棉花SGK321和非转基因棉花石远321根际土壤微生物动态变化,初步研究了转基因棉花SGK321对农田生态环境的影响。通过常规培养计数、分子鉴定等手段监测土壤微生物多样性变化,经过近两年的跟踪研究,我们发现两次生长周期内,转基因棉花SGK321和非转基因棉花石远321根际土壤微生物(包括细菌、真菌、放线菌)的动态变化趋势大致相同,群落数量和种属组成都没有明显差异。此外,南繁大田种植环境条件下,除棉铃虫数量差异明显外,其余各种棉田虫害数量差异不明显。据此,我们初步推断南繁条件下转基因棉花SGK321的种植对土壤微生物及棉田虫害影响不显著。本研究最终可为在我国南繁基地开展相关转基因生物安全研究提供参考,同时对其潜在风险作出分析,提出转基因棉花作物南繁规范种植的初步措施,为开展转基因棉花作物南繁规范化以及建设海南生态省提出良好的建议。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-9
第一章前言  9-25
  1、棉花概述  9-18
    1.1 棉花的性状及历史  9
    1.2 棉区的类型及其特点  9-12
    1.3 国外棉花害虫的研究及防治概况  12-13
    1.4 国内棉花害虫研究及防治概况  13-15
    1.5 转基因抗虫棉的经济和社会效益  15-16
    1.6 转基因棉花研究状况  16-17
    1.7 转基因棉花存在的问题  17-18
  2、南繁概述  18-22
    2.1 南繁概况及其重要作用  18-20
    2.2 存在的问题  20-22
  3、实验总体概述  22-25
    3.1 实验目的、意义  22
    3.2 实验内容  22-23
    3.3 技术路线  23
    3.4 试验作物材料  23
    3.5 试验地布局、取样点设计及取样方法  23-25
      3.5.1 南繁试验大田选择  24
      3.5.2 试验地布局与取样点的设计  24
      3.5.3 试验地取样方法，数量以及时间  24-25
第二章根际土壤理化性质的监测  25-27
  2.1 根际土壤理化性质的监测方法  25-26
    2.1.1 目的  25
    2.1.2 土壤预处理  25
    2.1.3 测量指标和方法  25-26
  2.2 实验结果  26
  2.3 结果分析  26-27
第三章根际土壤微生物培养  27-33
  3.1 实验器材  27
  3.2 根际土壤微生物的培养及计数  27-29
    3.2.1 培养基制备  27-28
    3.2.2 土壤菌悬液稀释与涂布  28
    3.2.3 培养条件、时间与计数  28-29
  3.3 实验结果  29-32
  3.4 结果分析  32-33
第四章微生物种属鉴定  33-53
  4.1 实验器材与试剂  33
  4.2 实验方法  33-46
    4.2.1 细菌、放线菌DNA的提取  33-35
    4.2.2 真菌DNA的提取  35
    4.2.3 细菌、真菌、放线菌PCR，测序  35-36
    4.2.4 真菌产孢结构高倍显微镜观察  36-39
    4.2.5 纯化、鉴定后的菌种保藏  39-46
      4.2.5.1 菌株的获取  39-40
      4.2.5.2 基本形态的描述  40
      4.2.5.3 保护剂的选择和准备  40
      4.2.5.4 保藏所需试剂和器材的准备  40
      4.2.5.5 定期移植法  40-42
      4.2.5.6 液体石蜡覆盖保藏法  42
      4.2.5.7 沙土保藏法  42-43
      4.2.5.8 滤纸保藏法  43-44
      4.2.5.9 液氮冷冻保藏法  44-45
      4.2.5.10 冷冻干燥保藏法  45-46
    4.2.6 质量检查  46
  4.3 实验结果  46-52
  4.4 结果分析  52-53
第五章线虫培养  53-56
  5.1 材料与方法  53-54
    5.1.1 材料  53
    5.1.2 实验器材、试剂  53
    5.1.3 土壤线虫分离方法及其比较  53-54
      5.1.3.1 土壤线虫分离方法  53-54
      5.1.3.2 线虫分离方法比较及选择  54
  5.2 结果与分析  54-56
    5.2.1 实验结果  54-55
    5.2.2 结果分析  55-56
第六章大田虫害监测  56-60
  6.1 棉花大田常见虫害  56
  6.2 实验方法  56-57
    6.2.1 实验目的  56
    6.2.2 取样点的确定  56-57
    6.2.3 监测取样时间  57
    6.2.4 病虫害调查步骤  57
  6.3 结果与分析  57-60
第七章结论与讨论  60-62
参考文献  62-72
附录  72-83
致谢  83

南繁条件下转基因棉花对根际土壤微生物及棉田虫害影响的初步研究

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