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淄博地区淋病奈瑟菌临床分离株对环丙沙星的耐药性及parC基因突变的检测

作　者: 路荣忠
导　师: 于红
学　校: 青岛大学
专　业: 病原生物学
关键词: 淋病奈瑟氏球菌 环丙沙星 耐药性 parC基因 PCR DNA测序
分类号: R759.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
下　载: 29次
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内容摘要


目的 了解淄博地区淋球菌耐药性及parC基因变异情况,研究其与耐环丙沙星之间的关系。为探索建立快速、有效的淋球菌耐药菌株基因检测方法提供依据。 方法 集51例淄博地区淋病奈瑟菌感染病例标本,通过淋球菌培养、琼脂平板稀释法测定环丙沙星对淋病奈瑟菌最小抑菌浓度MICs,选取高水平耐环丙沙星淋病奈瑟菌菌株(MICs≥4.0μg/ml)30株,设计对应于淋球菌parC基因的PCR引物,通过PCR其目的基因片段并进行DNA序列分析,明确parC基因突变的位点。 结果 51株淋球菌临床分离株对环丙沙星的耐药率为88.24%。3株敏感菌株及30株高水平耐药菌株均经PCR扩增出parC基因片段(255bp),3株敏感菌株测序未发现核苷酸的错义突变,也未见氨基酸的任何突变。测序成功的24株高水平耐药菌株中有22株分别发生1-3个氨基酸的突变,分别在Asp-86→Asn、Ser-87→Asn、Ser-88→Pro、Glu-91→Lys发生基因突变。以Asp-86→Asn突变最为常见,有19株,占测序成功的高水平耐药菌株的79.17% 结论 淄博地区的淋球菌临床分离株对环丙沙星耐药率较高。高水平耐环丙沙星淋球菌parC基因突变呈现多样性。应用PCR和基因测序技术可快速准确检测parC基因的突变,弥补常规药敏试验的不足。

全文目录


引言  5-6
第一章 材料和方法  6-13
  1.1 标本收集  6
  1.2 主要试剂及药品  6-7
  1.3 主要仪器  7
  1.4 主要试剂配制  7-8
  1.5 实验方法  8-13
第二章 结果  13-16
  2.1 药敏试验结果  13
  2.2 PCR扩增产物电泳分析结果  13-14
  2.3 parC基因序列分析结果  14-16
第三章 讨论  16-20
结论  20-21
参考文献  21-24
综述  24-42
攻读学位期间研究成果  42-43
附录  43-47
致谢  47-48
声明  48

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中图分类: > 医药、卫生 > 皮肤病学与性病学 > 性病学 > 淋病
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