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人心肌肌球蛋白轻链1单克隆抗体对心肌肌球蛋白ATP酶活性和超沉淀反应的影响

作　者: 付真彦
导　师: 马依彤
学　校: 新疆医科大学
专　业: 心血管
关键词: HVMLC1 单克隆抗体 ATP酶活性超沉淀反应
分类号: R541
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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内容摘要

应用单克隆抗体研究人心肌肌球蛋白轻链1的N片段和C片段的功能。方法:应用表达的人心肌肌球蛋白轻链1(HVMLC1)作为抗原,获得抗HVMLC1的单克隆抗体C8、C9、B12。用westen-blot方法验证三个单抗是否与抗原结合,并进一步验证三个单抗与抗原的N片段和C片段的结合情况,检测它们对心肌肌球蛋白ATP酶活性的影响和心肌肌球蛋白超沉淀反应的影响。结果:三个单抗均与抗原结合,C8与抗原N片段的NN部分结合,C9、B12与抗原C片段结合,C9、B12明显阻断了心肌肌球蛋白ATP酶活性和心肌肌球蛋白的超沉淀反应。而C8没有阻断作用。结论:HVMLC1的C片段是肌球蛋白的功能调节结构域,在肌动蛋白和肌球蛋白的相互作用中起重要作用,而且证实天然、完整的肌球蛋白并不阻止HVMLC1的单克隆抗体与HVMLC1的C片段结合。

全文目录

摘要  3-4
Abstract  4-5
前言  5-8
材料与方法  8-13
  1 制备蛋白  8
    1．1 MyosinA的制备  8
    1．2 Myosin B的制备  8
  2 HVMLC1的表达和纯化  8-9
    2．1 构建pTXB1—HVMLC1  8-9
    2．2 获得目的蛋白HVMLC1  9
  3 制备单克隆抗体  9-10
  4 免疫印迹实验  10
  5 单抗亲和常数的测定  10-11
  6 ATPase活性测定  11-12
    6．1 绘制定磷标准曲线  11-12
    6．2 肌球蛋白Mg2+ATPase的活力测定  12
  7 超沉淀反应  12-13
结果  13-21
讨论  21-23
小结  23-24
致谢  24-25
参考文献  25-31
综述  31-39
攻读硕士学位期间发表的学术论文  39

人心肌肌球蛋白轻链1单克隆抗体对心肌肌球蛋白ATP酶活性和超沉淀反应的影响

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