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VEGF单克隆抗体对人舌癌细胞Tca-8113及移植瘤的生长影响

作　者: 刘刚
导　师: 李金源
学　校: 华北煤炭医学院
专　业: 口腔颌面外科
关键词: 血管内皮生长因子舌鳞状细胞癌单克隆抗体移植瘤 Tca-8113细胞
分类号: R739.88
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

舌鳞状细胞癌(Tongue squamous cell carcinoma)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤;一般恶性程度较高,生长快,浸润性较强;容易侵犯舌肌,导致舌运动受限,从而影响进食、吞咽、言语等口腔功能[1]。目前该病治疗手段传统上主要采取手术切除、放疗和化疗。虽然临床上大多数病例采取这些手段进行治疗,但一些其它治疗措施也在深入研究之中,已获得更好的效果。越来越多的证据表明,在众多的影响因素中,血管生是影响肿瘤转移及生长的关键因子。而血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)作为促进血管新生最重要的因子,在肿瘤生长中扮演着极其重要的角色。因而,学者们尝试应用VEGF单克隆抗体来拮抗VEGF的作用,以抑制恶性肿瘤生长,并获得了一定效果。但VEGF单克隆抗体对口腔颌面部癌瘤,尤其是舌鳞状细胞癌的抑制作用,国内外研究较少,其抑制效果有待进一步深入探索。本研究正是基于上述研究现状,通过体外、体内两方面实验来探讨VEGF单克隆抗体对舌鳞状细胞癌Tca-8113的抑制作用及其效应机制,为今后其临床应用提供实验依据,并为舌鳞状细胞癌的基因及药物治疗提供新的思路和理论基础。目的:探讨VEGF单克隆抗体对体外舌鳞癌细胞Tca-8113及体内移植瘤生长的抑制效果,并阐明其作用机制,为临床应用提供实验依据。材料与方法:体外培养舌鳞癌Tca-8113细胞,分为对照组和实验组;实验组细胞用VEGF单克隆抗体处理。于不同时间点应用MTT实验、流式细胞仪、Real-time PCR对细胞增殖、细胞周期、VEGF表达分别进行检测。以证实VEGF单克隆抗体在体外对舌鳞状细胞癌Tca-8113的抑制作用,并阐明其作用机理。同时应用培养的Tca-8113细胞,建立裸鼠皮下移植瘤模型(N=10)。实验动物分为2组:实验组应用VEGF单克隆抗体进行瘤体注射,对照组注射生理盐水,持续28天。检测不同时间点肿瘤体积、动物体重以及动物处死时瘤体重量;并对肿瘤组织内VEGF表达进行免疫组织化学检测。通过上述实验,进一步证实VEGF单克隆抗体在体内对肿瘤生长的抑制作用,以及VEGF单克隆抗体通过拮抗VEGF表达,减少肿瘤内血管的生成来发挥肿瘤抑制作用的效应机制。结果:(1)MTT结果显示实验组(VEGF单克隆处理组)细胞增殖率显著低于对照组(p<0.01);(2)流式细胞术检测结果显示实验组细胞周期分布均发生明显变化,实验组G2期细胞(7.393±0.323)显著多于对照组(2.733±0.055)(p<0.01);(3)Real-time PCR结果显示实验组VEGF mRNA水平显著低于对照组(p<0.01)。(4)体内实验表明,实验组(VEGF单克隆处理组)移植瘤体积显著低于对照组(p<0.01),肿瘤最终重量低于对照组(p<0.05),VEGF表达的平均灰度值明显高于对照组(p<0.05)。结论:(1)VEGF单克隆抗体在体外可显著抑制舌鳞癌细胞增殖、改变细胞周期、下调VEGF的表达;(2)VEGF单克隆抗体可显著抑制体内移植瘤的生长,降低VEGF在瘤组织中的表达;(3)VEGF单克隆抗体可通过直接抑制肿瘤细胞及减少瘤体内血管生成来发挥对肿瘤的抑制作用。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-9
英文缩写  9-10
研究论文 VEGF 单克隆抗体对人舌癌细胞Tca-8113 及移植瘤的生长影响  10-50
  前言  10-14
  材料与方法  14-27
  结果  27-37
  讨论  37-44
  结论  44-45
  不足与展望  45-46
  参考文献  46-50
综述血管内皮生长因子与肿瘤生长的关系  50-64
  参考文献  59-64
致谢  64-65
个人简历  65

VEGF单克隆抗体对人舌癌细胞Tca-8113及移植瘤的生长影响

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