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超强毒IBDV细胞克隆化毒致弱株的培育及其免疫原性的研究
作 者: 孙秋艳
导 师: 朱瑞良
学 校: 山东农业大学
专 业: 预防兽医学
关键词: vvIBDV 克隆化细胞传代毒 致弱株 免疫原性 抗体消长规律
分类号: S852.65
类 型: 硕士论文
年 份: 2005年
下 载: 60次
引 用: 2次
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内容摘要
鸡传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的高度接触性、杀淋巴细胞的免疫抑制性疾病。20世纪80年代末期由于超强毒株和变异毒株的出现,IBD免疫失败时有发生。为了更好地控制vvIBDV的感染,国内外许多学者先后利用超强毒株和变异株进行了弱毒株的培育(Rosenberger等,Kibenge等,Tsai等,Hassan等),此外De1-A、MD、GLS等变异株在BGM-70、Vero、CEF等细胞上都已获得弱毒株,但获得的弱毒株免疫效果均不理想,为了探讨预防鸡群vvIBDV的感染,我们利用地方vvIBDV进行了致弱,并对其致弱株的免疫原性做了研究。 本试验分为两部分: 1.超强毒IBDV细胞克隆化毒致弱株的培育及其遗传稳定性的检测: 本试验以超强毒传染性法氏囊病病毒(vvIBDV)国内分离株GX8/99株筛选得到的克隆化毒株GX-IBDVE10C25Cl5为研究对象,将此毒株通过鸡胚成纤维细胞(CEF)连传25代。通过对克隆化毒株1、5、10、15、20、25代次传代毒TCID50(0.1ml)的测定,结果1~15代TCID50在逐渐降低(105.40、104.80、104.67、103.76),15~25代TCID50变化不大(103.76、103.80、103.76),由此说明细胞克隆化病毒的细胞传代毒的毒力已趋于稳定。通过对41日龄的SPF鸡的致病性试验,结果表明接种克隆化细胞传代毒第1、5代毒鸡的法氏囊指数、胸腺指数和脾脏指数与健康对照同批鸡相比差异显著(P<0.05),克隆化细胞毒第5代毒仍有一定的致病性,对41日龄SPF鸡的致死率为10%,而10、15、20、25代与健康对照同批鸡相比差异不显著(P>0.05),从15代开始,此克隆化细胞毒株对41日龄的SPF鸡已经失去致病性,由此说明此毒株已变成了弱毒株。
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全文目录
中文摘要 7-9 英文摘要 9-12 前言 12-27 1.IBDV的病原学 12-13 2.IBDV的流行病学 13-14 3.vvIBDV疫苗研制分子基础 14-15 4.IBDV致弱毒株的培育 15-16 5.IBDV疫苗研制状况 16-21 6.IBD免疫失败的原因及措施 21-25 7.立题依据 25 8.本课题的研究内容 25-26 9.本课题的技术路线 26-27 试验部分 27-53 试验一 超强毒IBDV克隆化株弱毒株的培育及遗传稳定性的检测 27-37 1.材料和方法 27-31 2.结果 31-36 3.讨论 36-37 试验二 超强毒IBDV克隆化株致弱株CEF细胞弱毒苗和灭活苗及免疫效果的测定 37-53 1.材料和方法 37-41 2.结果 41-50 3.讨论 50-53 结论 53-54 参考文献 54-64 致谢 64-65 个人简介 65-66 攻读硕士学位期间发表的论文 66-67 附图 67-71
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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学(兽医学) > 兽医基础科学 > 家畜微生物学(兽医病原微生物学) > 家畜病毒学
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