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超强毒IBDV细胞克隆化毒致弱株的培育及其免疫原性的研究

作 者: 孙秋艳
导 师: 朱瑞良
学 校: 山东农业大学
专 业: 预防兽医学
关键词: vvIBDV 克隆化细胞传代毒 致弱株 免疫原性 抗体消长规律
分类号: S852.65
类 型: 硕士论文
年 份: 2005年
下 载: 60次
引 用: 2次
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内容摘要


鸡传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的高度接触性、杀淋巴细胞的免疫抑制性疾病。20世纪80年代末期由于超强毒株和变异毒株的出现,IBD免疫失败时有发生。为了更好地控制vvIBDV的感染,国内外许多学者先后利用超强毒株和变异株进行了弱毒株的培育(Rosenberger等,Kibenge等,Tsai等,Hassan等),此外De1-A、MD、GLS等变异株在BGM-70、Vero、CEF等细胞上都已获得弱毒株,但获得的弱毒株免疫效果均不理想,为了探讨预防鸡群vvIBDV的感染,我们利用地方vvIBDV进行了致弱,并对其致弱株免疫原性做了研究。 本试验分为两部分: 1.超强毒IBDV细胞克隆化毒致弱株的培育及其遗传稳定性的检测: 本试验以超强毒传染性法氏囊病病毒(vvIBDV)国内分离株GX8/99株筛选得到的克隆化毒株GX-IBDVE10C25Cl5为研究对象,将此毒株通过鸡胚成纤维细胞(CEF)连传25代。通过对克隆化毒株1、5、10、15、20、25代次传代毒TCID50(0.1ml)的测定,结果1~15代TCID50在逐渐降低(105.40、104.80、104.67、103.76),15~25代TCID50变化不大(103.76、103.80、103.76),由此说明细胞克隆化病毒的细胞传代毒的毒力已趋于稳定。通过对41日龄的SPF鸡的致病性试验,结果表明接种克隆化细胞传代毒第1、5代毒鸡的法氏囊指数、胸腺指数和脾脏指数与健康对照同批鸡相比差异显著(P<0.05),克隆化细胞毒第5代毒仍有一定的致病性,对41日龄SPF鸡的致死率为10%,而10、15、20、25代与健康对照同批鸡相比差异不显著(P>0.05),从15代开始,此克隆化细胞毒株对41日龄的SPF鸡已经失去致病性,由此说明此毒株已变成了弱毒株。

全文目录


中文摘要  7-9
英文摘要  9-12
前言  12-27
  1.IBDV的病原学  12-13
  2.IBDV的流行病学  13-14
  3.vvIBDV疫苗研制分子基础  14-15
  4.IBDV致弱毒株的培育  15-16
  5.IBDV疫苗研制状况  16-21
  6.IBD免疫失败的原因及措施  21-25
  7.立题依据  25
  8.本课题的研究内容  25-26
  9.本课题的技术路线  26-27
试验部分  27-53
  试验一 超强毒IBDV克隆化株弱毒株的培育及遗传稳定性的检测  27-37
    1.材料和方法  27-31
    2.结果  31-36
    3.讨论  36-37
  试验二 超强毒IBDV克隆化株致弱株CEF细胞弱毒苗和灭活苗及免疫效果的测定  37-53
    1.材料和方法  37-41
    2.结果  41-50
    3.讨论  50-53
结论  53-54
参考文献  54-64
致谢  64-65
个人简介  65-66
攻读硕士学位期间发表的论文  66-67
附图  67-71

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中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学(兽医学) > 兽医基础科学 > 家畜微生物学(兽医病原微生物学) > 家畜病毒学
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