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金黄色葡萄球菌多重耐药株的构建及其中药外输泵耐药抑制剂的研究

作　者: 宋战昀
导　师: 韩文瑜
学　校: 吉林大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 金黄色葡萄球菌外输泵中药耐药抑制剂
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
下　载: 299次
引　用: 2次
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内容摘要

本实验将金黄色葡萄球菌与氟喹诺酮类药物耐药相关的外输泵norA 和bmr 基因,进行了克隆及测序,利用原核表达系统表达了Bmr 外输泵蛋白。利用枯草杆菌质粒pUB-110 和pMD-18T 载体构建了分别含有norA 和bmr 基因启动子区域的pUTnorA 和pUTbmr 多重耐药载体。通过电转化将多重耐药载体转入氟喹诺酮类药物敏感金黄色葡萄球菌株中,构建了相应的多重耐药菌株,与原菌株相比其耐药表型变化明显,对亲水性喹诺酮类药物如环丙沙星的MIC 增高了16-64 倍,从而成功构建了以外输泵为耐药机制的金黄色葡萄球菌多重耐药菌株。以这些人工构建多重耐药菌株为实验菌株来研究金黄色葡萄球菌的多重耐药性,具有耐药背景清楚,耐药机制单一的特点。应用浸泽法、煎煮法制备了66 种中药水煎剂,采用平板打孔法和微量肉汤稀释法检测了这些中药水煎剂的抑菌效果,结果表明:黄连、艾叶、地榆、柯子、木孜、乌梅、防己、半枝莲、柴胡、肉苁蓉、吴茱萸、大黄、金莲花和连翘对金黄色葡萄球菌有明显的抑菌作用。以所构建的多重耐药金黄色葡萄球菌为受试菌,经联合药敏试验从无抑菌作用的52 种中药水煎剂中,筛选出对金黄色葡萄球菌耐药性有逆转作用的外输泵蛋白抑制剂:浙贝母、射干、穿心莲和菱角。

全文目录

引言  8-10
第一篇:文献综述  10-32
  第一章金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制  10-14
  第二章主动外排系统介导的细菌多重耐药性研究进展  14-26
  第三章细菌耐药抑制剂的研究进展  26-32
第二篇:研究内容  32-74
  第一章多重耐药基因norA 和bmr 的克隆及序列分析  32-48
    1 材料与方法  32-37
      1.1 材料  32-33
      1.2 方法  33-37
    2 结果  37-44
    3 讨论  44-48
  第二章多重耐药基因bmr 在大肠杆菌中的表达  48-58
    1 材料与方法  48-53
      1.1 材料  48
      1.2 方法  48-53
    2 结果  53-56
    3 讨论  56-58
  第三章金黄色葡萄球菌多重耐药菌株的构建  58-66
    1 材料与方法  58-62
      1.1 材料  58-59
      1.2 方法  59-62
    2 结果  62-64
    3 讨论  64-66
  第四章中药外输泵耐药抑制剂的筛选  66-74
    1 材料与方法  66-69
      1.1 材料  66-67
      1.2 方法  67-69
    2 结果  69-71
    3 讨论  71-74
结论  74-76
参考文献  76-86
中文摘要  86-88
英文摘要  88-90
致谢  90-91
导师简介  91
作者简介  91

金黄色葡萄球菌多重耐药株的构建及其中药外输泵耐药抑制剂的研究

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