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中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）精子低温保存的研究

作　者: 陈东华
导　师: 王群
学　校: 华东师范大学
专　业: 动物学
关键词: 中华绒鳌蟹精子低温保存保存液 pH 渗透压精子密度显微结构 Na K Ca Cu Zn Mg Mn 冷冻保存冷冻保护剂二甲亚砜(DMSO) 甘油单细胞凝胶电泳原子分光光度分析原子吸收分光光度计雄性生殖系统精巢输精管壁副性腺精液
分类号: Q954.43-3
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 102次
引　用: 4次
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内容摘要

1、保存液及保存条件对中华绒螯蟹精子存活率的影响在低温（4℃）下对中华绒螯蟹精子进行体外保存研究，探讨了六种保存液对精子体外保存中存活率的影响。以伊红染色法检测样品活精子率，并结合保存液中的精子密度的变化来评价保存液的保存效果。结果显示，六种保存液中海水等渗KCl溶液和海水等渗葡萄糖溶液的保存效果最差，保存2d后精子即全部死亡，而两种无钙离子人工海水的保存效果较好，其中以无钙离子人工海水Ⅱ的效果尤佳，其保存6d后的活精子率达92.19％，精子密度亦保持较高水平；表明无钙离子人工海水Ⅱ是中华绒螯蟹精子短期体外保存的理想保存液。此外，在对该蟹精子体外保存过程中的精子密度、保存液pH值和渗透压条件的研究中发现，以无钙离子人工海水Ⅱ作保存液，不同精子密度的保存效果差异显著，其中以10⁶～10⁷个／mL的保存密度效果最好，在保存2d后其活精子率仍保持在95％以上；而保存液pH条件的研究发现，在pH7～10的范围内，保存15d后的活精子率均在90％以上；在以NaCl配制的渗透压范围为500～1000mOsmol／kgH₂O的10个梯度保存液中，以750～850mOsmol／kg H₂O的保存液保存效果最好，该条件下保存15d后其活精子率仍在75％以上；以上结果证实，中华绒螯蟹精子适宜的保存条件为：精子密度为10⁶～10⁷个／mL，渗透压范围为750～850mOsmol／kg H₂O，pH范围为pH 7—10。 2、Ca²⁺、Mg²⁺、K⁺对河蟹精子体外保存效果的影响以ASW（人工海水）为基础，在低温（4℃）下对河蟹精子进行体外保存的研究，探讨ASW中几种阳离子成分对河蟹精子保存质量的影响，分别配制了人工海水（ASW），2倍钙离子人工海水(2×Ca²⁺-ASW)，无镁离子人工海水(Mg²⁺FASW)，无钾离子人工海水（K⁺FASW），无钙离子人工海水(Ca²⁺FASW)，以伊红染色法检测样品活精子率，并结合保存液中的精子密度的变化来评价保存液的保存效果。扫描电镜和透射电镜辅助观察保存后的精子的超微结构。在此基础上重点探讨不同含量的Mg²⁺和Ca²⁺对精子质量的影响。结果表明K-FASW、ASW及

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第一章综述  13-21
  第一节精子体外低温保存的国内外研究进展  13-15
  第二节精子体外低温保存的损伤作用研究  15-17
  第三节十足目精子低温保存的国内外研究进展  17-19
  第四节本研究的目的及意义  19-21
第二章保存液及保存条件对中华绒螯蟹精子  21-32
  1 引言  21
  2 材料与方法  21-24
  3 结果  24-29
  4 讨论  29-32
第三章 Ca~(2+)、Mg~(2+)、K~+对中华绒螯蟹精子  32-41
  1 引言  32
  2 材料与方法  32-34
  3 结果  34-37
  4 讨论  37-41
第四章中华绒螯蟹精子体外冷冻保存的研究  41-50
  1 引言  41
  2 材料与方法  41-44
  3 结果  44-47
  4 讨论  47-50
第五章中华绒螯蟹雄性生殖系统中  50-56
  0 引言  50
  1 材料和方法  50-51
  3 结果  51-53
  4 讨论  53-56
参考文献  56-64
致谢  64

中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）精子低温保存的研究

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