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中国根结线虫群体的同工酶表型和线粒体DNA多态性分析

作　者: 刘培磊
导　师: 徐建华
学　校: 南京农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 根结线虫中国苹果酸脱氢酶酯酶线粒体DNA PCR-RFLP
分类号: S432.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2002年
下　载: 284次
引　用: 11次
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内容摘要

根结线虫(Meloidogyne spp.)为广寄主性的植物根系专性内寄生物，是当前威胁中国农业生产最重要的病原物类群之一。为了明确中国发生的根结线虫的种类及其快速而可靠的鉴定方法，对来源于中国13省(市、自治区)蔬菜、果树、花卉等经济作物上的40个根结线虫群体进行了同工酶表型和线粒体DNA(mtDNA)多态性的研究。应用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析苹果酸脱氢酶(Mdh)和酯酶(Est)酶谱，供检的33个经纯化的单卵块群体和7个田间自然群体共呈现2种Mdh表型 (N1和H1)和5种Est表型(I1，J3，A1，A2和H1)。根据各线虫群体的Mdh-Est综合表型，从供检群体中共鉴定出4种根结线虫。其中，33个单卵块群体中的24个群体(同工酶型N1-I1)属南方根结线虫(M.incogtnita)，3个群体(N1-J3)属爪哇根结线虫(M.javanica)，5个群体(N1-A2和N1-A1)属花生根结线虫(M.arenaria)，1群体(H1-H1)属北方根结线虫(M.hapla)；而在7个田间群体中，3个群体(N1-I1)为单一的南方根结线虫，1个群体(H1-H1)为单一的北方根结线虫，2个群体(N1-I1；N1-J3)为南方和爪哇根结线虫的混合群体，1个群体(N1-I1；N1-A2)为南方和花生根结线虫的混合群体。利用引物C2F3和MRH106对根结线虫mtDNA的COII和IrRNA基因间序列进行特异性PCR扩增，N1-I1型的南方根结线虫、N1-J3型的爪哇根结线虫及N1-A1型的花生根结线虫群体的扩增产物为≈1.8kb，N1-A2型的花生根结线虫群体为≈1.3kb，H1-H1型的北方根结线虫群体为≈0.6kb。用限制性内切酶HinfI对扩增产物进行消化，各同工酶型的根结线虫群体则显现特异性的限制性酶切带谱，即大多数N1-I1型的南方根结线虫群体产生≈1.3kb，0.4kb及0.1kb的3个限制性片段；N1-J3型的爪哇根结线虫群体产生未被酶切的≈1.8kb的1个片段；N1-A1型的花生根结线虫群体产生≈1.7kb及0.1kb的2个片段；N1-A2型的花生根结线虫群体产生≈1.2kb及0.1kb的2个片段；和H1-H1型的北方根结线虫群体产生。0.5kb及0.1kb的2个片段。本研究揭示：(1)南方、爪哇、花生和北方根结线虫是中国常见根结线虫种类，其中南方根结线虫是中国南方地区发生的优势种群；(2)在田间自然状态下1种以上根结线虫混合发生的现象比较普遍；(3)中国根结线虫群体的Mdh-Est同工酶谱与其mtDNA特定区域的限制性酶切带谱呈一一对应的关系，因此同工酶表型和mtDNA扩增产物限制性片段长度多态性(mtDNA-PCR-RFLP)分析均可作为快速而可靠地鉴定中国常见根结线虫种类的方法。

全文目录

中文摘要  4-5
英文摘要  5-7
前言  7-8
上篇文献综述  8-24
  第一章根结线虫的分布和危害  8-11
  第二章根结线虫同工酶表型的研究  11-14
  第三章根结线虫种类的分子检测  14-24
下篇研究内容  24-45
  第一章中国根结线虫群体同工酶表型的鉴定  24-34
  第二章中国根结线虫群体的mtDNA-PCR-RFLP分析  34-45
全文结论  45-46
致谢  46

中国根结线虫群体的同工酶表型和线粒体DNA多态性分析

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