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辛伐他汀对幼鼠骨形成相关因子表达及骨髓基质干细胞成骨分化的影响

作　者: 刘晓宁
导　师: 张柳
学　校: 华北煤炭医学院
专　业: 外科学
关键词: 辛伐他汀骨形成骨髓基质干细胞成骨分化
分类号: R329.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:本实验给予SD大鼠颈部皮下注射辛伐他汀(5mg/kg/d),观察辛伐他汀对幼鼠胫骨上端骨形成相关因子BMP-2、MMP-13、VEGF的表达及骨髓基质干细胞成骨分化过程中BMP-2、RUNX2、Osterix、MSX2、DLX3、DLX5等因子mRNA表达水平的影响。方法:60只1周龄雄性SD大鼠随机分为6组:实验组,给药1周(S1)、给药2周(S2)、给药3周(S3),对照组,对照1周(D1)、对照2周(D2)、对照3周(D3),每组10只。实验组给予辛伐他汀悬液(simvastatin、DMSO、PBS)(5mg/kg/d),对照组给予空白对照液(PBS、DMSO混合液),皮下注射持续1、2、3周。所有实验动物于最后一次注射药物或空白对照液的第2天脱颈处死,立即取胫骨,固定、脱钙、包埋,沿正中矢状面作4μm连续切片,行BMP-2、MMP-13、VEGF免疫组化染色用图像分析仪测量平均光密度值;取双侧股骨BMSCs向成骨方向诱导培养,在细胞培养14天分别进行ALP染色,21天采用Real-time PCR法检测BMP-2、RUNX2、Osterix、MSX2、DLX3、DLX5等成骨过程中相关因子mRNA的表达,28天进行von Kossa染色。结果:(1)胫骨免疫组化检测结果:BMP-2、MMP-13、VEGF等因子的表达各周实验组与对照组无差异(P>0.05)。(2)ALP:各组ALP染色阳性细胞(胞浆蓝黑色)比例均在30%左右(D1:0.29±0.13,S1:0.32±0.10,D1:0.28±0.15,S1:0.30±0.13,D1:0.31±0.13,S1:0.29±0.14)无显著差别(P>0.05)。(3)BMP-2、RUNX2、Osterix、MSX2、DLX3、DLX5因子mRNA表达水平组间无显著差异(P>0.05)。(4)von Kossa染色可见大小不等染为棕黑色的钙化点,其大小和密度组间无显著差别(P>0.05)。结论:(1)皮下注射辛伐他汀(5mg/kg/d)不能影响胫骨上端骨形成相关因子BMP-2、MMP-13、VEGF等的表达。(2)皮下注射辛伐他汀(5mg/kg)不能影响BMSCs向成骨细胞诱导分化过程以及成骨分化相关因子BMP-2、RUNX2、Osterix、MSX2、DLX3、DLX5 mRNA表达水平的变化。

全文目录

中文摘要  3-5
英文摘要  5-7
英文缩写  7-8
研究论文：辛伐他汀对幼鼠骨形成相关因子表达及骨髓基质干细胞成骨分化的影响  8-51
  前言  8-12
  材料与方法  12-20
  结果  20-22
  讨论  22-25
  结论  25-26
  参考文献  26-36
  附图及说明  36-51
综述：辛伐他汀对骨形成影响的相关研究进展  51-65
  参考文献  56-65
致谢  65-66
个人简历  66-67

辛伐他汀对幼鼠骨形成相关因子表达及骨髓基质干细胞成骨分化的影响

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