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血管内皮生长因子转染骨髓基质干细胞复合支架治疗犬月骨缺血坏死

作　者: 汪国栋
导　师: 黄启顺
学　校: 华中科技大学
专　业: 手外科
关键词: 血管内皮生长因子犬骨髓基质干细胞聚羟基乙酸(PGA) 月骨缺血坏死再血管化
分类号: S858.292
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:观察血管内皮生长因子基因(VEGF165)转染骨髓基质干细胞(BMSCs)支架复合物治疗液氮冷冻犬月骨缺血坏死模型的效果,为临床治疗月骨无菌性缺血坏死(Kienb?ck病)提供新方法。方法:抽取成年健康杂种犬的髂骨骨髓,体外分离纯化并贴壁培养BMSCs。支架复合物构建:a.接种于可吸收聚羟基乙酸(PGA)支架制备BMSCs-PGA复合物;b.用脂质体法将携带荧光蛋白VEGF165基因的穿梭质粒转入传代培养后的骨髓基质干细胞中,接种于PGA支架制备AdVEGF165-BMSCs-PGA复合物;坏死月骨的造模:静脉麻醉成功后,显露犬月骨背侧,用剥离破坏月骨周围血供加液氮冷冻的方法造模,术后3W MRI筛选出有早期月骨坏死征象模型犬12只;改良模型并行复合支架移植:再次麻醉并暴露月骨背侧,开5×10mm骨皮质窗,尽可能多的剔除月骨内坏死组织,骚刮后的空腔再次用液氮充填10min,然后移至室温10min,冻融过程重复3次,最后将PGA, BMSCs-PGA和AdVEGF165-BMSCs-PGA分别移植进坏死月骨的空腔中;分组:将月骨坏死改良模型12只犬按随机数字表达法分为3组,转染细胞移植组(移植AdVEGF165-BMSCs-PGA复合物),细胞移植组(移植BMSCs-PGA复合物)和PGA移植对照组,每组各4只;观测:移植术后第4、8、12W分别对各组犬月骨行X线、CT、MRI影像学及相关组织学和免疫组化检测,观察各组移植物对坏死月骨改良模型的再血管化和骨修复能力。结果:对全部12只坏死月骨改良模型的观测结果均进行分析。移植术后12W转染细胞移植组影像学和组织学评价坏死月骨修复情况均高于细胞移植组、对照组,差异具有显著性意义(P<0.01)。免疫组化染色结果表明,转染细胞移植组可见坏死月骨血管化更明显,对缺血坏死月骨修复能力优于后两者。结论:同种异体移植的血管内皮生长因子基因转染骨髓基质干细胞PGA复合物(AdVEGF165-BMSCs-PGA)能促进液氮冷冻犬月骨缺血坏死改良模型的再血管化,能加快缺血坏死月骨的修复过程,避免继发性月骨塌陷。

全文目录

中文摘要  6-7
Abstract  7-8
前言  8-9
材料方法  9-13
结果  13-27
讨论  27-30
结论  30-31
参考文献  31-33
综述  33-49
  参考文献  43-49
致谢  49

血管内皮生长因子转染骨髓基质干细胞复合支架治疗犬月骨缺血坏死

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