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胚胎先天性神经管缺陷PLA_2、COX-2表达及基因治疗

作　者: 沈瑾
导　师: 招明高；马向东
学　校: 第四军医大学
专　业: 神经药理学
关键词: 神经管缺陷 PLA2 COX-2 糖尿病动物模型
分类号: R714.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:研究PLA₂、COX-2基因在胚胎先天性神经管缺陷大鼠的表达,探讨PLA₂、COX-2基因对胚胎神经管缺陷大鼠模型的影响机制。方法:24只SD雌性大鼠分组分为3组:第一组为正常对照组,8只,正常饲养,妊娠12日后共取出80只大鼠胚胎,做HE染色观察胚胎形态学及免疫荧光染色的方法观察PLA₂、COX-2表达;第二组为实验模型组,8只,受孕后第6天经过尾静脉注射链脲佐菌素（STZ）构建先天性神经管缺陷组大鼠,妊娠12日后共取出80胚胎,做HE染色观察胚胎形态学及免疫荧光染色的方法观察PLA₂、COX-2表达,第三组为基因治疗组,受孕第6天经过尾静脉注射链脲佐菌素（STZ）构建先天性神经管缺陷组大鼠,妊娠12日后共取出80胚胎,离体培养1周后提取各组胚胎的卵黄囊细胞的mRNA,通过PCR技术对PLA₂、COX-2基因水平分析,应用Western blotting技术,对卵黄囊细胞PLA₂、COX-2蛋白表达水平检测,通过免疫荧光检测对胚胎进行观察分析。采用四表格χ2检验比较正常组与糖尿病组之间大鼠胚胎神经管发育的差异,PLA₂、COX-2在胚胎神经管缺陷中表达的差异,比较转基因治疗前后PLA₂、COX-2在胚胎神经管缺陷中表达的差异。使用统计学软件SPSS 16.1进行处理,检验水准α=0.05,p<0.05表示有统计学差异。结果:1.通过链脲佐菌素（STZ）构建的先天性神经管缺陷组大鼠成功实现。2.正常对照组大鼠胚胎神经管发育形态学分析正常,糖尿病胚胎神经管发育明显异常,两者存在统计学差异。（p<0.05）3.胚胎前列腺素酶PLA₂及前列腺素合成酶COX-2在实验糖尿病组中表达较正常组下降,两者存在统计学差异。（p<0.05） 4.免疫荧光检查发现发现在接受基因治疗后的神经管缺陷胚胎PLA₂、COX-2基因表达比转基因治疗前明显增强,两者存在统计学差异。（p<0.05）结论:PLA₂、COX-2基因表达在SD大鼠神经管的发育过程中起着重要的作用,通过对胚胎神经管缺陷大鼠模型行PLA₂、COX-2转基因治疗对神经管畸形具有较好的恢复作用。

全文目录

缩略语表  5-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-11
前言  11-12
文献回顾  12-19
实验一胚胎先天性神经管缺陷PLA_2、COX-2 表达  19-28
  1 材料  19-21
  2 方法  21-23
  3 结果  23-26
  4 讨论  26-28
实验二胚胎先天性神经管缺陷PLA2、COX-2 基因治疗  28-40
  1 材料  28-30
  2 方法  30-33
  3 结果  33-38
  4 讨论  38-40
小结  40-41
参考文献  41-46
个人简历和研究成果  46-47
致谢  47

胚胎先天性神经管缺陷PLA_2、COX-2表达及基因治疗

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