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1.人脑低级神经胶质瘤组织和癌旁组织的差异蛋白质组学研究 2.Hela细胞系导入TRIM45基因后的比较蛋白质组学研究

作　者: 路俊仙
导　师: 陈平；梁宋平
学　校: 湖南师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 神经胶质瘤差异蛋白质组学双向凝胶电泳质谱 Hela细胞系蛋白质组学
分类号: R739.41
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 17次
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内容摘要

神经胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤，具有广泛的异质性，这种特性给临床病理分类造成了很大的障碍。在诊断上，由于受到肿瘤异质性和侵润性的影响以及病理检测者技术、经验的限制，结果往往是比较主观的。研究采用蛋白质组学的方法，结合双向凝胶电泳技术和质谱技术，寻找在人脑低级神经胶质瘤组织与癌旁组织中差异表达的蛋白质。利用PDQUEST软件对扫描后的凝胶图象进行分析，经过斑点检测，匹配和量化，最终获得了64个差异蛋白质点。差异蛋白质先经胰蛋白酶胶内酶解，然后再经质谱分析、鉴定，初步鉴定到了25个差异蛋白质。以癌旁组织作为对照，其中16个是上调蛋白质，9个是下调蛋白质。这些差异蛋白质参与多种细胞活动，其中有6个是分子伴侣蛋白质(热休克蛋白27，热休克蛋白70的前体9B，热休克蛋白70的异构体，α-B晶体球蛋白和伴侣素蛋白)，与蛋白质折叠和成熟相关；7个与代谢相关的蛋白质(如烯醇酶，ATP合成酶和醛缩酶等)；3个脑特异性的蛋白质(胶质纤维酸性蛋白，甲状腺素运载蛋白和神经多肽h3)；另外10个蛋白质参与其他多种不同的生理活动。为了验证鉴定到的差异蛋白质可靠性，研究采用实时定量PCR和免疫印记技术，分别对甲状腺素运载蛋白和胶质纤维酸性蛋白进行验证。甲状腺素运载蛋白是一个小分子量的分泌蛋白，可以自由穿越血脑屏障，在甲状腺激素的运输中起着重要的作用，这个蛋白的发现很可能为神经胶质瘤的诊断提供候选分子标志物。为了确定TRIM45基因的功能和作用机理，将其转入Hela细胞，分析细胞内蛋白质表达水平的变化。研究采用双向凝胶电泳的方法分别对转入pCMV-Tag2B空载体和重组质粒pCMV-Tag2B-TRIM45的Hela细胞全蛋白进行分离，利用PDQUEST 7.2软件分析，鉴定得到15个差异点，包括8个上调点和7个下调点。为进一步研究TRIM45基因的功能奠定了良好的基础。

全文目录

中文摘要  3-5
英文摘要  5-9
第一章蛋白质组学研究新进展  9-30
  1. 蛋白质组学的研究背景和意义  9-11
  2. 差异蛋白质组学的研究进展  11-13
  3. 差异蛋白质组研究技术及其应用  13-23
  4. 差异蛋白质组学在筛选肿瘤标志物中的应用  23-26
  5. 本研究的意义和思路  26-30
第二章人脑低级神经胶质瘤组织和癌旁组织的差异蛋白质组学研究  30-65
  第一节蛋白质的提取和分离  30-42
    1. 材料  30-31
    2. 实验方法  31-37
    3. 结果与分析  37-42
  第二节差异蛋白质点的鉴定和验证  42-63
    1. 材料  42-43
    2. 实验方法  43-48
    3. 结果与分析  48-57
    4. 结论  57-63
  第四节进一步研究设想  63-65
第三章 Hela细胞系导入TR/M45基因后的比较蛋白质组学研究  65-74
参考文献  74-91
发表文章  91-93
缩写表  93-95
致谢  95-97

1.人脑低级神经胶质瘤组织和癌旁组织的差异蛋白质组学研究 2.Hela细胞系导入TRIM45基因后的比较蛋白质组学研究

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