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量子点偶联体对肿瘤细胞的诊断与治疗

作　者: 孟鹤
导　师: 陈暨耀
学　校: 复旦大学
专　业: 光学
关键词: 半导体量子点叶酸多巴胺链接细胞荧光像肿瘤诊断肿瘤治疗
分类号: R730.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

癌细胞表面有过度表达的叶酸受体(FR),我们研究的目的是将牛血清白蛋白(BSA)包裹的CdSe/ZnS量子点(BSA-QDs)与叶酸(FA)链接合成FA-BSA-QDs(<10 nm)用作癌细胞诊断。人类鼻咽癌细胞(KB细胞)的表面含有大量的叶酸受体,通过共聚焦显微镜观察,无论是单光子激发像还是双光子激发像,吞噬了FA-BSA-QDs的KB细胞荧光强度比BSA-QDs有所增强,而用流式细胞仪对以104为单位的KB细胞进行探测进一步发现增强大约三倍。将癌细胞与游离的FA培育一段时间后再与FA-BSA-QDs培育,发现细胞吞噬FA-BSA-QDs能力有所减小,说明之前荧光增强是源于细胞膜表面叶酸受体(FR)对于FA-BSA-QDs的靶向作用。用细胞表面缺少叶酸受体的人类胚肾细胞(293T)和KB细胞分别和FA-BSA-QDs (luM)培育40分钟,发现293T细胞的吞噬量明显少于KB细胞,说明FA-BSA-QDs更容易和叶酸受体丰富的细胞亲和。所有以上的特性表明,FA-BSA-QDs具有癌细胞诊断的价值并值得深入探究。多邦胺(DA)是一种电子供体,被量子点(QDs)氧化后可以产生单态氧(102),而单态氧对细胞具有巨大杀伤力,这个机理适用于肿瘤细胞的光动力治疗。我们主要研究的是碲化镉多邦胺偶联体(CdTe-DA)对肿瘤细胞的光毒效应。DA的链接减弱了CdTe量子点的光强,并在470nm出现了新的波峰,说明了DA向QDs提供了电子。随着蓝紫光照射CdTe-DA时间的增加,新波峰越来越强,证明了光照可以导致DA被氧化。细胞毒性检测(MTT)结果中,肿瘤细胞在吞噬了CdTe-DA并经过光照后,存活率明显低于其他对照组,表明CdTe-DA在光照情况下产生了单态氧。以上结果表明CdTe-DA在肿瘤治疗方面具有很大的应用潜力。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-7
第一章前言  7-24
  1.1 纳米材料  7-8
  1.2 半导体荧光量子点的概述  8-13
    1.2.1 量子点的基本特性  8-9
    1.2.2 量子点的制备  9-12
      1.2.2.1 有机金属法  10
      1.2.2.2 水相加热法  10-11
      1.2.2.3 有机金属法和水箱加热法的比较  11-12
    1.2.3 荧光量子点的光学特性  12-13
  1.3 半导体荧光量子点的在生物医学中的应用  13-19
    1.3.1 量子点荧光共振能量转移技术  15
    1.3.2 量子点与生物分子的生物偶联  15-16
    1.3.3 量子点活体标记及组织成像  16-17
    1.3.4 量子点荧光标记分析检验技术  17
    1.3.5 量子点细胞标记  17-19
  1.4 本文结构与内容  19
  参考文献  19-24
第二章实验方法  24-30
  2.1 荧光显微镜与激光扫描共焦显微镜  24-27
    2.1.1 荧光显微镜工作原理  24-25
    2.1.2 激光扫描共焦显微镜简介  25-27
  2.2 细胞的培养  27
  2.3 半导体量子点的制备  27-29
    2.3.1 用Thiol修饰的CdTe半导体量子点的制备  27-28
    2.3.2 BSA-QDs的制备  28-29
  2.4 MTT原理  29
  参考文献  29-30
第三章叶酸受体介导的肿瘤细胞的诊断  30-41
  3.1 引言  30-31
  3.2 材料和方法  31-32
    3.2.1 FA-BSA-QDs的制备  31
    3.2.2 癌细胞的单光子荧光像和双光子荧光像  31-32
    3.2.3 细胞毒性检测  32
    3.2.4 流式细胞仪对细胞的定量分析  32
  3.3 结果和讨论  32-38
  3.4 总结  38
  参考文献  38-41
第四章多巴胺量子点耦合体对肿瘤细胞的治疗  41-45
  4.1 引言  41
  4.2 材料与方法  41-42
    4.2.1 细胞毒性检测  41-42
  4.3 结论和讨论  42-43
  4.4 总结  43
  参考文献  43-45
第五章总结和展望  45-46
致谢  46-47
在投文章  47-48

量子点偶联体对肿瘤细胞的诊断与治疗

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