学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

母鼠妊娠前慢性不可预见性应激对子代血清CRH、COR和大脑多巴胺、5-羟色胺代谢的影响以及与行为的关系

作　者: 彭云菊
导　师: 史雪川
学　校: 汕头大学
专　业: 儿科学
关键词: 大鼠妊娠前 CUS CRH COR 强迫游泳 HPLC 多巴胺 5-HT
分类号: R714.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 21次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

背景和目的母体妊娠期间各阶段承受慢性不可预见性应激(chronic unpredictable stress,CUS)均不利于子代的神经系统发育,并一定程度地导致子代出现认知、记忆和行为异常。而近年来本课题组的研究证实,母体妊娠前接受CUS亦可导致子代血清皮质醇(cortisol, COR)水平升高,并与海马中BDNF(Brain-derived neurotrophic factor,脑源性神经营养因子)、NCAM(neural cell adhesion molecule,神经细胞粘附因子)和NR2B(N-methyl-D-aspartate receptor 2B, N-甲基-D-天冬氨酸受体2B)的表达呈负相关,同样影响子代的神经发育及学习能力。但对于孕前母源性应激如何导致子代HPA轴(hypothalamo-pituitary-adrenal axis,下丘脑-垂体-肾上腺轴)失调并产生对神经发育及行为的不利影响,目前研究仍处于初始阶段。本实验通过建立SD大鼠CUS模型,使母鼠于CUS后短期内受孕,并在母鼠CUS终止后、分娩结束时和所产子鼠1月龄时分别检测血清促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin- releasing hormone,CRH)和COR水平,另以强迫游泳实验观察其行为学改变,并通过分析1月龄子鼠脑组织中多巴胺(dopamine, DA)和5-羟色胺(5-hydroxtryptamine, 5-HT)的代谢情况及与CRH、COR和强迫游泳结果之间的关系,更深入地探讨母孕前CUS对子代神经系统发育及行为的影响。材料和方法SD系成年雌性大鼠随机分为正常对照母鼠组(10只)和孕前CUS母鼠组(15只)。采用11种刺激方法对CUS母鼠组进行21天CUS。CUS模型建立完毕后,两组母鼠分别进行断尾取血留待CRH和COR检测。将正常对照母鼠组和CUS母鼠组分别与成年健康雄性大鼠按2-3:1合笼饲养1周,每天7:00对母鼠进行阴道分泌物涂片检查,以显微镜下查看到精栓为妊娠的标志,确定已受孕的母鼠则单笼饲养至依次分娩,于分娩后6小时内断尾取血。将子代大鼠按性别分为正常雌性子代组(CF)、正常雄性子代组(CM)、CUS雌性子代组(CUSF)和CUS雄性子代组(CUSM) 4组,每组各20只。在子代大鼠1月龄时进行强迫游泳实验,记录其游泳行为和不动行为,并应用Elisa法测定1月龄CRH、COR水平。同时,采用高效液相色谱法测定子鼠大脑皮质、海马、中脑三个部位中多巴胺和5-HT及两者代谢物水平,并将CUS子代组与同期受孕的正常子代组进行同性别间对照研究。结果1.母鼠应激结束时,CUS组和对照组的血清CRH分别为(34.22±5.99)pg/ml和(25.27±4.02)pg/ml(P<0.01),CUS组和对照组的血清COR分别为(115.86±11.43)ng/ml和(90.48±10.11)ng/ml(P<0.01),CUS组均增高。受孕母鼠分娩结束时,CUS组和对照组的血清CRH分别为(42.21±9.28)pg/ml和(33.15±4.28)pg/ml(P<0.05),CUS组和对照组的血清COR分别为(127.98±13.97)ng/ml和(119.25±14.50)ng/ml(P<0.05);两者在CUS组仍高于对照组。2.子鼠1月龄时CUSF组和CF组的CRH水平分别为(34.31±4.53)pg/ml和(28.24±4.86)pg/ml,COR水平分别为(107.51±18.28)ng/ml和(86.63±16.87)ng/ml;CUSM组和CM组CRH水平分别为(35.21±5.00)pg/ml和(27.90±4.20)pg/ml,COR水平分别为(109.04±18.14)ng/ml和(86.15±18.21)ng/ml,同性别组间均有显著差异(P<0.01)。3.子鼠1月龄时强迫游泳CUSF组和CF组的不动时间分别为(18.88±6.29)s和(8.42±3.37)s,总运动时间分别为(280.92±6.29)s和(291.38±3.37)s;CUSM组和CM组的不动时间分别为(17.44±6.71)s和(8.70±2.70)s,总运动时间分别为(282.36±6.71)s和(291.10±2.70)s,同性别组间同样均有显著差异(P<0.01)。4.在大脑皮质、海马、中脑三个部位,子鼠1月龄时的DA水平在CUSF组和CUSM组低于同性别正常对照组,DA代谢率则高于同性别正常对照组(P<0.05或P<0.01);而5-HT水平在CUSF组和CUSM组高于同性别正常对照组,5-HT的代谢率则低于同性别正常对照组(P<0.05或P<0.01)。5.母鼠CUS组在应激后和分娩后的血清CRH水平都与同期COR水平呈正相关;子代1月龄时,CRH水平与COR水平同样呈正相关,并与母鼠应激后的CRH水平亦呈正相关。6.母鼠CUS组应激结束后,血清CRH和COR水平与子鼠1月龄时强迫游泳的不动时间呈正相关,与总运动时间呈负相关;并与子鼠大脑皮质、海马、中脑的DA代谢率呈正相关,与5-HT代谢率则呈负相关。子鼠1月龄时,它们的血清CRH、COR水平也与强迫游泳结果有明显关联,并与大脑皮质的DA水平呈负相关,与DA代谢率则呈正相关;与中脑的5-HT水平呈正相关,与5-HT代谢率则呈负相关。7.子鼠1月龄时,强迫游泳的不动时间在大脑皮质、海马和中脑均与DA代谢率呈正相关,与5-HT代谢率呈负相关,总运动时间则与以上三个脑区的DA代谢率均呈负相关,与5-HT代谢率均呈正相关;另外大脑皮质和海马的DA水平,与不动时间呈负相关,与总运动时间呈正相关,而大脑皮质和中脑的5-HT水平,则与不动时间呈正相关,与总运动时间呈负相关。结论1.妊娠前接受CUS的母鼠,在应激结束时和分娩后体内CRH和COR水平较正常对照母鼠显著升高,HPA轴亢进;并且CUS所致母鼠的HPA轴功能亢进可持续存在于整个妊娠期乃至分娩后。2.妊娠前接受CUS母鼠所产子鼠1月龄时,血清CRH和COR水平仍明显高于对照组,而且与CUS母鼠的血清CRH、COR水平有一定程度的关联。结果表明,母鼠妊娠前接受CUS后短期内受孕,可直接或间接导致子鼠的HPA轴功能亢进。3.妊娠前接受CUS母鼠所产子鼠,不论雌雄,在强迫游泳实验中不动时间和总运动时间均明显异常。由于CUS母鼠和它们所产子鼠的CRH、COR水平与子鼠强迫游泳的结果存在一定关联,而子鼠大脑中DA和5-HT代谢有明显失调,且与强迫游泳结果显著关联,证明子鼠的行为异常受亲代和子代HPA轴功能亢进以及子代DA、5-HT等神经递质代谢异常的共同影响,提示母鼠妊娠前应激后短期内受孕可导致子鼠脑功能障碍。

全文目录

英文缩略词表  4-5
中文摘要  5-8
英文摘要  8-12
第1章前言  12-14
第2章材料与方法  14-22
第3章实验结果  22-39
第4章讨论  39-44
第5章结论与展望  44-46
第6章参考文献  46-52
附录  52-54
文献综述  54-63
  参考文献  58-63
致谢  63-64
个人简历  64

母鼠妊娠前慢性不可预见性应激对子代血清CRH、COR和大脑多巴胺、5-羟色胺代谢的影响以及与行为的关系

内容摘要

全文目录

相似论文