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低剂量辐射诱导蛋白及其对淋巴细胞功能的影响

作　者: 吕兑财
导　师: 苏燎原
学　校: 苏州大学
专　业: 放射医学
关键词: 低剂量辐射诱导蛋白生物活性淋巴细胞刺激效应 NK活性淋巴细胞亚群 CD25分子
分类号: R73-36
类　型: 硕士论文
年　份: 2001年
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内容摘要

本课题就低剂量辐射（LDR）诱导蛋白的产生条件、提取、检测、生物活性等进行了初步的实验研究，并进一步探讨了其对淋巴细胞及其亚群功能的影响。雄性昆明小鼠给予5-10cGyLDR（γ射线）全身照射后2h，取脾脏制成单细胞悬液，超声波破碎细胞、低温高速离心，上清液即为LDR诱导蛋白粗提液。以³H-TdR掺入法，观察LDR诱导蛋白对离体小鼠脾脏细胞转化的刺激作用以反映其生物活性。结果表明经5-15cGyLDR（γ射线）作用后都可从小鼠脾脏细胞中提取到有生物活性的LDR诱导蛋白，并且在10cGy剂量时LDR诱导蛋白活性最强，提取诱导蛋白的最佳时间在照后2h左右。制备的LDR诱导蛋白提取液经Sephadex G-100凝胶过滤检测时，出现新生蛋白，再经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测新生蛋白分子量，测得分子量为76.9-110.0KD，用Lowry法测定新生蛋白含量为613.33±213.42ug/3×10⁷个脾细胞。用³H-TdR掺入法及¹⁴C-UR，³H-Tyrosion双标记法掺入，观察LDR诱导蛋白对离体小鼠脾细胞转化的刺激作用，分别表示脾细胞转化时DNA、RNA及蛋白质的合成，结果表明；LDR诱导蛋白能增强小鼠离体脾脏细胞转化时DNA、RNA和蛋白质的合成。用LDR诱导蛋白刺激经PHA、LPS处理的正常人外周血淋巴细胞，以¹⁴C-TdR掺入T淋巴细胞的CPM值及³H-TdR掺入B淋巴细胞的DPM值为指标观察LDR诱导蛋白对正常人外周血淋巴细胞转化的刺激作用，结果表明：LDR诱导蛋白对正常人静脉血中T、B淋巴细胞体外转化有刺激作用，表现为T、B淋巴细胞的CPM或DPM值明显增高。观察了LDR诱导蛋白对单克隆抗体铺皿法—直接法分离出的淋巴细胞亚群CD4、CD8、CD19转化功能的影响，¹⁴C-TdR掺入结果表明LDR诱导蛋白能不同程度地刺激CD4、CD8、CD19细胞DNA合成。用McAb直接法分离出CD57细胞和非CD57细胞（除CD57外的所低剂B辐射诱导蛋白及其对淋巴细胞功能的彤响摘要有淋巴细胞）并以二者为效应细胞，K562细胞为靶细胞，将CD57与非CD57杀伤肿瘤细胞的作用进行比较；测定计算各自的杀伤活性并观察LDR诱导蛋白对杀伤活性的影响。结果表明CD57及非CD57细胞均对肿瘤细胞有杀伤作用，且非CD57细胞的作用更强；LDR诱导蛋白能分别增强CD57及非CD57体外抗肿瘤细胞效应州K细胞活性及 NK活性) 用间接免疫荧光一流式细胞仪测定方法，观察LDR诱导蛋白对人淋巴细胞CD25分子表达的影响，结果表明LDR诱导蛋白能轻度增强静止的淋巴细胞CD25分子的表达。本文从分于、淋巴细胞亚群及淋巴细胞总体等不同水平，分别研究LDR诱导蛋白的免疫增强作用，不仅初步表明LDR诱导蛋白是LDR 兴奋效应的物质基础，而且展现了对LDR诱导蛋白进行深入研究的重要性及其临床应用的广阔前景。

全文目录

一．中文摘要  3-5
二．英文摘要  5-9
三．研究背景  9-14
四．第一部分LDR诱导蛋白的生成、提取、检测及影响其生物活性的因素  14-21
五．第二部分LDR诱导蛋白对小鼠脾细胞及人血淋巴细胞的刺激效应  21-27
六．第三部分LDR诱导蛋白对正常人外周血淋巴细胞亚群的刺激效应  27-31
七．第四部分LDR诱导蛋白对淋巴细胞NK活性的影响  31-36
八．第五部分LDR诱导蛋白对CD25分子表达的刺激作用  36-39
九．结论  39-40
十．参考文献  40-45
十一．缩略词  45-46
十二．致谢  46

低剂量辐射诱导蛋白及其对淋巴细胞功能的影响

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