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不同持续时间的周期性压力对构建组织工程软骨的影响

作　者: 盛英俊
导　师: 范卫民
学　校: 南京医科大学
专　业: 骨科
关键词: 软骨细胞压力频率持续时间组织工程
分类号: R318.0
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 2次
引　用: 0次
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内容摘要

目的:探讨在周期性压力场培养系统中构建组织工程软骨时,每天加压的持续时间对构建组织工程软骨质量的影响。方法:将HFB-40旋转式生物反应器和往复式加压泵有机的结合起来,构建成“周期性压力场培养系统”。设定周期性压力强度为0～200kPa,频率为0.1Hz。将体外培养的第二代乳兔关节软骨细胞接种到聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)支架上,构建支架-细胞复合体。随机分成四组,第一组为不加压的静态培养,为对照组;第二组每天加压持续4h;第三组每天加压持续8h;第四组每天加压持续12h。各组培养时间均为2周。2周后肉眼大体观察各组组织工程软骨的大小﹑形态﹑质地﹑光泽和组织弹性;HE染色法观察工程软骨细胞增殖及分布;甲苯胺蓝染色法观察硫酸糖氨多糖(GAG)的分泌及分布状况,并用1,9二甲基亚甲蓝法定量检测GAG的含量;采用Ⅱ型胶原免疫组织化学法观察Ⅱ型胶原的分泌及分布,并用image-proplus图象分析系统对Ⅱ型胶原染色面积行半定量分析。结果:8h组支架-细胞复合体体积最大,表面光滑,有光泽,有弹性,支架内软骨细胞数量最多,排列最为规则,Ⅱ胶原和GAG含量也最高(P<0.01)。结论:软骨细胞的新陈代谢受周期性压力持续时间的影响,在0～200kPa﹑0.1Hz频率作用下,每天持续时间8h的周期性压力能更好地促进软骨细胞增殖,合成Ⅱ胶原﹑GAG等细胞外基质。

全文目录

缩略语  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
引言  9-10
1. 材料与方法  10-20
2. 结果  20-27
3. 分析与讨论  27-30
4. 小结  30-31
参考文献  31-35
综述  35-52
  参考文献  48-52
攻读学位期间发表文章情况  52-53
致谢  53

不同持续时间的周期性压力对构建组织工程软骨的影响

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