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TTV感染病人肝组织中的TTVDNA的定位与分布研究

作　者: 姜岭梅
导　师: 朱惠明
学　校: 暨南大学
专　业: 内科学
关键词: TTV DNA 原位杂交 非甲一庚型肝炎 肝癌
分类号: R575.02
类　型: 硕士论文
年　份: 2000年
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内容摘要


第一部分 原位杂交法检测肝组织中TTVDNA技术的建立及评价 目的 建立肝组织TTVDNA的原位杂交检测技术。 方法 根据Okamoto等报道的TTVDNA序列，选择高度保守区设计一对引物，采用PCR扩增法，以地高辛标记TTVORF1部分基因序列（1914-2186nt），分别合成Gla、G2b两种亚型的双链TTVDNA探针。同时应用两型探针对22例肝病患者肝组织TTVDNA进行原位杂交检测，检测结果与配对血清巢氏PCR法检测TTVDNA的结果进行比较。随机选择一例原位杂交阳性标本，对其血清中TTV病毒株（599）ORF1部分基因进行分子克隆与核苷酸序列分析。 结果 14例血清TTVDNA阳性的患者肝组织中TTVDNA阳性13例，阴性1例。8例血清TTVDNA阴性的患者肝组织中TTVDNA阴性6例，阳性2例。S99 ORF1区部分基因的测序结果表明，其核苷酸序列与Okamoto等报道的TTV N22、Gla克隆的同源性分别为97.79％、98.16％。 结论 同时应用两型探针可以提高TTVDNA原位杂交检测的灵敏性。探针的长度和特异性、杂交严格度及杂交后的漂洗决定杂交反应的特异性。肝组织TTVDNA原位杂交检测是研究TTV感染的可靠的分子病理学技术。第二部分 TTVDNA在肝组织中的定位及分布初步研究 目的 观察TTVDNA在肝细胞中的定位及肝组织中的分布特点，初步探讨TTV感染与肝损害的关系。 方法 采用原位杂交法检测26例慢性肝炎、肝硬化、肝细胞癌患者肝组织中的 TTVDNA，同时应用巢氏 PCR法检测其中 18例患者配对血清标本中的TTVDNA，分析肝组织中TTVDNA与血清TTVDNA之间的关系。选择其中的单纯TTV感染的病例进行HE染色研究，在排除已知肝炎病毒感染的情况下，研究TTV感染后，肝组织的病理学改变。 结果TTVDNA主要定位于肝细胞和肝癌细胞核内，偶有极少数肝细胞浆内呈弱阳性。TTVDNA阳性细胞在慢性肝炎、肝硬化、肝细胞癌肝组织中呈散在分布。癌组织与癌周组织中TTVDNA阳性细胞密集程度差别不明显。单纯感染TTV的慢性肝炎病人肝组织标本HE染色可见病毒性肝炎所见的基本病理变化。 结论TTV是一种嗜肝病毒，肝脏是TTV复制的场所之一。TTV可能与非甲一庚型肝炎有关。TTV感染可能不是导致原发性肝癌的危险因素。

全文目录


1 中文摘要  3-5
2 英文摘要  5-8
3 前言  8-12
4 第一部分  12-31
5 第二部分  31-39
6 参考文献  39-46
7 小结  46-47
8 英文缩略词  47-48
9 致谢  48-49
10 附图  49-52

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 消化系及腹部疾病 > 肝及胆疾病
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