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X射线致HT-29、HeLa、GLC-82细胞损伤过程中NADPH氧化酶的作用

作　者: 杜斌斌
导　师: 郭天康；杨熊飞
学　校: 兰州大学
专　业: 外科学
关键词: NADPH氧化酶活性氧(ROS) X射线 HT-29细胞 HeLa细胞 GLC-82细胞
分类号: R818
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

目的:探讨①2Gy X射线辐照使低射线敏感细胞HT-29,中射线敏感细胞HeLa,高射线敏感细胞GLC-82活性的变化。②NADPH氧化酶在X射线诱导HT-29、HeLa、GLC-82细胞损伤过程中的作用。方法:①选用对数生长期生长良好的上述3种细胞株,将其分为对照组和2Gy X射线辐照组,MTT比色法检测三种细胞存活分数的变化。②将上述3种细胞分为对照组、NADPH氧化酶抑制剂DPI处理组、12Gy X射线辐照组、NADPH氧化酶抑制剂DPI处理联合X射线辐照组四个组。用荧光分光光度计检测细胞内的活性氧（Reactive oxygen species,ROS）变化;再将上述3种细胞分为对照组和12Gy X射线辐照组后,用免疫细胞化学和激光共聚焦显微扫描术（Immunostaining and laser-scanning confocal microscopy）来研究NADPH氧化酶细胞膜亚基gp91^phox和细胞质亚基p47^phox的“共定位”,用Western blotting来检测NADPH氧化酶的关键亚基gp91^Phox辐照前后在细胞中表达量变化情况。结果:①三种细胞经X射线辐照后,细胞存活分数有明显降低。②在经12 GyX射线辐照后细胞内ROS明显增加,在用NADPH氧化酶抑制剂处理后再辐照,则细胞内ROS降低到未辐照水平;同时辐照后NADPH氧化酶细胞质亚基p47^phox从细胞质迁移到细胞膜上并和细胞膜亚基gp91^phox结合;Western blotting检测结果显示,NADPH氧化酶的关键亚基gp91^phox的表达量明显增加。结论:①2Gy X射线辐照使低射线敏感细胞HT-29,中射线敏感细胞HeLa,高射线敏感细胞GLC-82活性降低。②NADPH氧化酶被X射线激活后所产生的ROS在X射线诱导HT-29、HeLa、GLC-82细胞损伤过程中起促进作用。

全文目录

中文摘要  4-5
英文摘要  5-7
研究背景  7-15
  一.恶性肿瘤的治疗  7-8
  二.放疗与恶性肿瘤  8-13
  三.关于NADPH氧化酶  13-15
立论依据  15-17
研究内容  17-18
材料方法  18-21
  一:材料  18
  二:主要仪器  18
  三:方法:  18-21
结果  21-35
  1 2Gy X射线辐照三种细胞敏感性比较  21-25
  2 X射线辐照可以激活NADPH氧化酶提高细胞内ROS的产量  25-27
  3 X射线诱导NADPH氧化酶细胞质亚基p47~(pbox)从细胞质到细胞膜的迁移并和细胞膜亚基gp91~(pbox)结合  27-33
  4 X射线诱导HT-29，HeLa，GLC-82细胞NADFH氧化酶细胞膜亚基gp91~(bhox)变化  33-35
讨论  35-37
结论  37-38
参考文献  38-43
在学期间的研究成果  43-44
致谢  44-45
英文缩略词  45

X射线致HT-29、HeLa、GLC-82细胞损伤过程中NADPH氧化酶的作用

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