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炙甘草液相指纹图谱研究
作 者: 张信青
导 师: 蒋孟良
学 校: 湖南中医药大学
专 业: 中药学
关键词: 甘草 蜜甘草 指纹图谱 高效液相色谱法 炮制工艺均匀设计 正交设计 质量标准
分类号: R286
类 型: 硕士论文
年 份: 2005年
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内容摘要
甘草(Licorice)是豆科(Leguminosae)甘草属(Glycyrrhiza)植物甘草(Glycyrrhiza ulalensis Fisch)、胀果甘草(Glycyrrhizainflata Bat),或光果甘草(Glycyrrhiza glabra L.)的干燥根及根茎加工而成。始载于《神农本草经》,素有“国老”之称,性甘,味平,归心、肺、脾、胃经,具有和中缓急,润肺,解毒,调和诸药的功效。为解决目前甘草饮片质量评价指标单一,科学性不高;炙甘草质量差,稳定性低、缺乏质量评价指标等实际问题。本实验应用了全国各地、不同等级、不同采收期的正品甘草,利用HPLC建立起了生甘草及蜜甘草的指纹图谱。同时建立了甘草酸和甘草苷同时定量的HPLC检测方法;优选了烘制法、微波加热法代替传统炒制法的蜜制工艺。1.应用HPLC建立了对甘草中的甘草苷和甘草酸进行同时定量检测的方法,二者分离度良好,回归方程相关系数具达到0.9999以上。2.以甘草苷和甘草酸的加权含量作为评价指标,应用均匀设计法,确定了指纹图谱最佳前提取条件为50%的甲醇,冷浸10小时,超声30分钟。3.在收集17种各类样本后,建立了生甘草的液相指纹图谱,所建立指纹图谱整体分离度良好,方法的重现性、稳定性,以及各样本非公有峰比例、保留时间RSD值,都符合指纹图谱的要求。4.在严格按照炒制蜜甘草的工艺的基础上,炒制不同等级的10批蜜甘草,并建立起了蜜甘草的指纹图谱。5.通过正交工艺优选了烘制法的炮制工艺,确定最佳的工艺为加25%的炼蜜(炼蜜中加30%的水),闷润30h,90度烘制4小时,在此工艺下可得到和炒制法建立起的炙甘草指纹图谱相似度最高的样品,且方法重现性明显优于炒制法。6.通过正交工艺优选了微波加热法的炮制工艺,确定最佳的工艺为加25%的炼蜜(炼蜜中加30%的水),闷润30h,40%档次微波加热6分钟,在此工艺下可得到和炒制法建立起的炙甘草指纹图谱相似度最高的样品,且方法重现性明显优于炒制法,也较烘制法为佳。
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全文目录
中文摘要 7-9 英文摘要 9-12 前言 12-14 第一部分 文献研究 14-21 1.成分研究 14-15 1.1 三萜皂苷类 14-15 1.2 黄酮类 15 1.3 其他成分 15 2.采收加工 15-16 3.质量研究 16 4.炮制研究 16-17 4.1 古代甘草的炮制方法 16-17 4.2 现代甘草的炮制方法 17 5.药理作用 17-18 5.1 肾上腺皮质激素样作用 17 5.2 抗炎、抗病毒作用 17-18 5.3 对消化系统的作用 18 5.4 抗肿瘤作用 18 5.5 其他作用 18 6.综合利用研究 18-21 第二部分 甘草质量标准的制定 21-32 1.仪器与试药 21-22 1.1 仪器 21 1.2 试剂 21-22 1.3 药材 22 2.甘草酸、甘草苷HPLC同时测定方法的建立 22-30 2.1 对照品溶液的制备 22 2.2 样品供试品的制备 22 2.3 测定方法的建立 22-23 2.4 线性关系的考察 23-27 2.5 精密度试验 27 2.6 稳定性试验 27-28 2.7 重现性试验 28 2.8 加样回收试验 28-29 2.9 样品含量测定 29-30 3.讨论 30-32 第三部分 生甘草指纹图谱研究 32-48 1.仪器与试药 32-33 1.1 仪器 32 1.2 试剂 32 1.3 药材 32-33 2.甘草提取方法的优化 33-38 2.1 提取方法的对比实验 33-35 2.2 均匀设计法优选超声提取法的最佳条件 35-38 3.指纹图谱HPLC分析方法的建立 38-43 3.1 供试品的制备 38 3.2 参照物的选定 38 3.3 检测方法的建立 38-39 3.4 稳定性和精密度试 39-41 3.5 重现性试验 41-43 4.甘草HPLC指纹图谱及技术参数 43-46 4.1 指纹图谱中共有指纹峰的标定 43-44 4.2 指纹峰面积比及保留时间的RSD值 44-46 4.3 非共有峰面积 46 5.讨论 46-48 第四部分 蜜甘草指纹图谱研究 48-71 1.仪器与试药 48-49 1.1 仪器 48 1.2 试剂 48-49 1.3 药材 49 2.蜜甘草指纹图谱HPLC分析方法的建立 49-54 2.1 蜜甘草样品供试液的制备 49-50 2.2 参照物的选定 50 2.3 检测方法的建立 50 2.4 稳定性和精密度试验 50-52 2.5 重现性试验 52-54 3.蜜甘草指纹图谱及技术参数 54-57 3.1 指纹图谱中共有指纹峰的标定 54-55 3.2 蜜甘草指纹峰面积比及保留时间的RSD值 55-56 3.3 非共有峰面积 56-57 4.烘制法炮制蜜甘草的工艺优选 57-63 4.1 烘制法影响因素的选择 57 4.2 评价指标的选择 57-58 4.3 烘制法优化实验与结果 58-63 5.微波法炮制蜜甘草的工艺优选 63-68 5.1 微波法影响因素的选择 63 5.2 评价指标的选择 63 5.3 微波法优化实验与结果 63-68 6.讨论 68-71 总结 71-76 致谢 76-77 参考文献 77-79
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药品
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