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肝素联合尿激酶对无心跳供体肺保护的作用研究

作　者: 朱逸
导　师: 马海涛
学　校: 苏州大学
专　业: 胸心外科学
关键词: 无心跳供体肺移植肺保护肝素尿激酶 SD大鼠
分类号: R654.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:利用套管法大鼠原位肺移植的模型,研究在无心跳供体肺移植中供体肺经过一段时间(30分钟)热缺血后,在灌注液中加入尿激酶能否溶解供肺微血栓,改善移植肺的功能;同时研究在供体循环停止15分钟后使用肝素,能否通过胸外心脏按压的方法使之到达肺部,与尿激酶联合作用进一步加强供体肺保护的效果。方法:清洁级成年雄性SD大鼠按随机的原则分为四组,分别为肝素+尿激酶组(A组)、肝素组(B组)、尿激酶组(C组)、空白组(D组),每组10只(供、受体大鼠各5只)。供体大鼠经下腔静脉给与10%氯化钾处死,气管切开,插入16#静脉留置针套管,连接动物呼吸机,暂不辅助呼吸。A组15分钟后再经下腔静脉给予肝素(浓度为200U/ml)2,000U/kg,这时开始胸外按压辅助循环,同时机械通气。5分钟后剪断腹主动脉放血,正中剪开胸骨,左肺动脉、左肺静脉分别置入18#、16#静脉留置针套管,结扎固定,自左肺动脉灌注尿激酶15,000U/kg(生理盐水配成15ml),灌注压15-20cmH2O。灌注完毕后继续予4℃生理盐水正灌+逆灌直至流出液无血液,供肺颜色变苍白,然后切取左肺保存在4℃LPD液中。B组将尿激酶替换成等量的生理盐水,C组将肝素替换成等量的生理盐水,D组将肝素和尿激酶均换成等量的生理盐水,其他实验步骤基本同A组。受体肺移植后观察90分钟,期间测PaO2、PaCO2、pAwP;90分钟后处死受体,获取移植的左肺,肺组织检测ATPase活力、髓过氧化酶(MPO)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、NF-κB p65含量及湿/干重比,光镜下观察供肺组织形态学改变。结果:1、本实验流程进行顺利,各个受体存活时间均达到90分钟。2、血气分析:移植后随着时间的推移,各组PaO2都有所降低,A组在各个时间点上均高于B、C、D三组。在移植后30min时PaO2差异无统计学意义;在60min时A组与B、C组差异无统计学意义,但A组与D组相比差异有统计学意义(P<0.01);在90min时A组与B、C、D三组差异均有统计学意义(P<0.05);移植后随着时间的推移,各组PCO2都有所上升,B、C、D三组在各个时间点上均高于A组,在移植后30min时PCO2差异无统计学意义;在60min时B、C组与A组差异无统计学意义,但A组与D组差异有统计学意义(P<0.01);在90min时A组与B、C、D三组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。3、气道峰压(pAwP)测定:肺移植后pAwP均呈上升趋势,A组在各个时间点上均低于B、C、D三组。在移植后30min时pAwP差异无统计学意义;在60min时A组与B、C组差异无统计学意义,但A组与D组差异有统计学意义(P<0.05);在90min时A组与B、C、D三组差异均有统计学意义(P<0.05)。4、肺组织湿/干重比:与D组比,A、B、C三组湿/干重比均下降,A组降低最明显,与D组相比差异有统计学意义(p<0.01);同时,A组与B、C组比,差异也有统计学意义(p<0.05;p<0.01)。5、肺组织ATPase活力:与D组比,A、B、C三组ATPase均升高,A组上升最明显,与D组相比差异有统计学意义(p<0.05);同时,A组与B、C组比,差异也有统计学意义(p<0.05;p<0.05)。6、肺组织MPO活性、ICAM-1、NF-κB p65含量测定:与D组比,A、B、C三组MPO活性、ICAM-1、NF-κB p65均下降,A组降低最明显,与D组相比差异有统计学意义(p<0.05);同时,A组与B、C组比,差异也有统计学意义(p<0.05;p<0.05)。7、肺组织的病理变化:4组均有不同的病理学损害,D组肺组织损伤严重,肺间质炎症细胞浸润,肺泡腔内红细胞蓄积严重;B、C组病理改变稍轻,但肺泡腔内仍有较多的红细胞蓄积;A组病理改变最轻,肺泡腔内无明显红细胞蓄积。结论:1.无心跳供体肺离体灌注期间,在灌注液中加入尿激酶,可通过溶解肺循环内的血栓,增加氧合,从而改善移植肺的功能。2.肝素能够减少供肺循环内血栓的形成,同时还有利于在离体灌注时尿激酶在微循环内的灌注,增强其溶栓作用,因而肝素和尿激酶的联合使用能够进一步提高移植肺的功能。

全文目录

中文摘要  3-6
Abstract  6-10
前言  10-12
材料和方法  12-20
  1 材料  12-13
  2 实验方法  13-15
  3 观察指标及测定方法  15-19
  4 统计学处理  19-20
结果  20-31
  1 手术操作结果  20
  2 实验数据结果  20-31
讨论  31-36
结论  36-37
参考文献  37-40
综述：无心跳供体肺的研究进展  40-58
  1 NHBD 肺损害因素  40-43
  2 NHBD 肺保护的研究  43-49
  3 非技术因素对NHBD 肺移植的影响  49-50
  4 肺移植的展望  50
  参考文献  50-58
中英文对照缩略词表  58-59
攻读学位期间公开发表的论文  59-60
致谢  60

肝素联合尿激酶对无心跳供体肺保护的作用研究

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