学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

初筛调控残粒脂蛋白诱导的小鼠内皮祖细胞衰老的miRNA

作　者: 李美玲
导　师: 刘玲
学　校: 中南大学
专　业: 内科学
关键词: 残粒脂蛋白 内皮祖细胞 衰老 微小RNA
分类号: R543.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 51次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


背景内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells, EPCs)是成熟血管内皮细胞的前体细胞,参与血管再生和内皮损伤后的修复过程。EPCs衰老及其功能紊乱可致血管内皮功能失调,后者与动脉粥样硬化的发生、发展密切相关。餐后阶段被认为是致动脉粥样硬化的关键时期。餐后高甘油三酯血症患者血浆中增多的残粒脂蛋白(Renmant-like particles, RLPs)与血管内皮功能失调密切相关,可加速人外周血单个核细胞来源EPCs的衰老进程,但其机制尚不明确。微小RNA (microRNA, miRNA)是一类在进化过程中高度保守的内源性非编码单链RNA,对真核生物的基因表达发挥重要的调控作用。最近发现miRNA参与调控细胞衰老。推测：miRNA可能参与调控RLPs诱导的EPCs衰老。目的观察RLPs对小鼠骨髓源性EPCs衰老的影响,筛选可能调控RLPs诱导的EPCs衰老的miRNA。方法通过密度梯度离心法从小鼠骨髓中分离单个核细胞,经差速贴壁结合特殊培养基扩增,诱导分化为EPCs。应用流式细胞技术鉴定内皮细胞系列标志：CD34、CD31、Flk-1和祖细胞标志CD133。以0.1mg/mL RLPs刺激EPCs为实验组,以等体积PBS刺激EPCs为对照组,分别孵育12h、24h、48h、72h,衰老相关β-半乳糖苷酶(Senescence-associatedβ-galactosidas, SA-β-gal)染色鉴定各组细胞衰老的情况。miRNA微阵列技术筛选衰老EPCs中表达显著变化的miRNA.结果经密度梯度离心和差速贴壁法分离所得的细胞经EBM-2专用培养基培养后,第4d可见集落形成,培养到第12d行流式细胞仪检测其CD34、CD 133、Flk-K1、CD31的阳性率分别为(65±4)%、(48±3)%、(37±3)%和(51±4)%。RLPs显著增加衰老EPCs细胞数。EPCs衰老数量在RLPs作用24h开始显著增多,48h的组间差异最明显。miRNA微阵列技术筛选出衰老EPCs中表达差异>2倍的miRNA有5个：表达显著上调的miRNA有1个,为miR-542-3p;表达显著下调的miRNA有4个,即miR-328, miR-324-5p, miR-27b, miR-191。结论经RLPs诱导的衰老小鼠EPCs中有5个表达差异>2倍的miRNA,它们可能参与调控RLPs诱导的EPCs衰老。

全文目录


中文摘要  5-7
英文摘要  7-11
缩略语  11-12
第一章 前言  12-13
第二章 材料与方法  13-22
  2.1 材料  13-14
  2.2 方法  14-22
第三章 结果  22-29
  3.1 EPCS的培养及鉴定  22-24
  3.2 RLPs蛋白浓度  24
  3.3 RLPs促进EPCs衰老  24-25
  3.4 总RNA质量分析结果  25-26
  3.5 miRNA微阵列芯片表达谱分析  26-27
  3.6 差异表达结果的可靠性分析  27-29
第四章 讨论  29-32
第五章 结论  32-33
参考文献  33-36
综述  36-43
  参考文献  40-43
致谢  43-44
已发表和己接受的论文  44

相似论文

  1. 天然来源的抗衰老先导化合物的化学结构及作用机理研究,R285.5
  2. 不同基因型玉米根叶衰老差异及调控研究,S513
  3. 氮肥运筹对转基因棉Bt蛋白表达与降解的调控作用,S562
  4. 血红素加氧酶参与细胞分裂素对暗诱导小麦离体叶片衰老的缓解作用,S512.1
  5. 胚胎期母体暴露氰戊菊酯加速CD-1小鼠年龄相关性行为改变,R714.2
  6. 不同生长势古香樟外观形态与生理特性分析,S792.23
  7. 芜菁药材质量标准的初步研究,R284.1
  8. 藁本内酯对抗D-半乳糖和过氧化氢致氧化应激损伤的神经保护作用,R285.5
  9. 合并糖尿病的冠心病患者冠脉病变程度与CD34~+的相关性分析,R541.4
  10. 小鼠不同脑区NSF含量的年龄相关性改变及其与空间学习记忆的关系,R741
  11. 药物对机体平衡的调节作用探讨,R96
  12. 老年非小细胞肺癌外周血Th17和Treg细胞的表达及与免疫衰老的相关性研究,R734.2
  13. 低砷饮水暴露对心血管系统的影响及膳食营养因素作用的研究,R151
  14. “加味四君子汤”对增龄大鼠免疫系统的调节作用及初步机制探讨,R285.5
  15. 循环内皮祖细胞在非霍奇金淋巴瘤患者中的表达及其意义,R733.1
  16. 胎盘血管疾病患者脐静脉血内皮祖细胞数量的变化,R714.5
  17. 微小RNA-223及其标靶基因c-myc在肝癌发病中的作用,R735.7
  18. 体育舞蹈对老年男性下肢肌力和骨密度的影响,R580
  19. miR-16促进心肌微环境诱导的骨髓间充质干细胞向心肌表型细胞分化,R54
  20. HGF基因促进内皮祖细胞增殖的体外研究,R329

中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 心脏、血管（循环系）疾病 > 血管疾病 > 动脉疾病
© 2012 www.xueweilunwen.com