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“加味四君子汤”对增龄大鼠免疫系统的调节作用及初步机制探讨

作　者: 沈鹤
导　师: 张力华
学　校: 华中科技大学
专　业: 老年医学
关键词: 延缓衰老 炎性衰老 IgG IL-2 TNF-α NF-κB
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的:观察中药复方制剂“加味四君子汤”对增龄大鼠免疫系统功能的调节作用,研究其是否具有延缓炎性衰老的功效,并对可能的作用机制进行初步探讨。方法:(1)选取50只12月龄健康Wistar大鼠,雌雄各半,普通饲料适应性喂养1周。随机分为5组,即“加味四君子汤”(以下简称药物)低剂量组、中剂量组、高剂量组,阳性对照组、老年对照组,每组各10只;另选取10只3月龄的Wistar大鼠作为青年对照组。(2)分别给予“加味四君子汤”1.6g/kg/d、3.2g/kg/d、6.4g/kg/d,“六味地黄丸”混悬液1.5g/kg/d,2ml蒸溜水灌胃,持续给药90天。(3)称量大鼠体重后处死,观察试验大鼠以下指标:各组大鼠体重(BW);血清免疫球蛋白(IgG)水平;计算胸腺指数、脾脏指数;将胸腺和脾脏组织进行HE染色,光镜下观察组织形态学改变;用免疫组化法定位并半定量检测胸腺白介素-2(IL-2)的表达情况及脾脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况;利用实时荧光定量PCR方法检测核因子-κB(NF-κBP56)mRNA的表达水平。结果:(1)各组大鼠体重变化:用药前后比较,各组大鼠的体重均有增加;用药后,药物各组大鼠体重均较阳性对照组、老年对照组无显著性差异。(2)各组大鼠血清IgG水平的比较:与青年对照组相比较,增龄各组大鼠血清IgG水平均显著降低(P<0.01);与老年对照组相比较,药物组的IgG水平显著升高(P<0.05, P<0.01),阳性对照组IgG水平显著升高(P<0.01);与阳性对照组相比较,药物组的IgG水平明显降低(P<0.01)。(3)各组大鼠胸腺指数和脾脏指数的比较:与青年对照组相比较,增龄各组的胸腺和脾脏指数均显著降低(P<0.01);与老年对照组相比较,药物组胸腺指数明显升高(P<0.01),脾脏指数无显著性差异(P>0.05),阳性对照组胸腺指数变化无显著性差异,脾脏指数变化无显著性差异(P>0.05);药物组和阳性对照组脾脏指数差异不明显,无统计学意义(P>0.05)。(4)各组大鼠胸腺、脾脏组织形态学比较:光镜下,药物组胸腺有不同程度的萎缩,与老年对照组相比胸腺组织被脂肪替代等病理变化程度降低,胸腺细胞分布较密,着色良好。与老年对照组相比较,药物组脾脏的白髓和红髓分界欠清晰,白髓略微增多,中性粒细胞数量增多,淋巴细胞排列比较疏松。(5)各组大鼠胸腺IL-2表达水平:与青年对照组相比较,增龄各组大鼠胸腺IL-2表达水平均显著降低(P<0.01);与老年对照组相比较,药物组胸腺IL-2表达水平明显升高(P<0.01),阳性对照组胸腺IL-2表达水平升高(P<0.01);药物组和阳性对照组的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。(6)各组大鼠脾脏TNF-α表达水平:与青年对照组相比较,增龄各组大鼠脾脏TNF-α表达水平均明显升高(P<0.01);与老年对照组相比较,药物组脾脏TNF-α表达水平降低(P<0.01),阳性对照组脾脏TNF-α表达水平降低(P<0.01);药物组和阳性对照组的脾脏TNF-α表达水平差异无统计学意义(P>0.05)(。7)各组大鼠脾脏NF-κBP65mRNA表达水平:与老年对照组相比较,青年大鼠NF-κBp65mRNA的表达明显升高(P<0.01);阳性对照组的NF-κBp65mRNA的表达明显升高(P<0.05),药物各组NF-κBp65mRNA的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05, P<0.01);与阳性对照组相比较,药物低剂量组NF-κBp65mRNA的表达升高,差异无统计学意义(P>0.05);中、高剂量组的表达显著升高(P<0.01)。结论:“加味四君子汤”在大鼠增龄过程中应用,能够升高老龄大鼠血清IgG含量,提高胸腺指数,对脾脏指数无明显影响,提高胸腺IL-2的表达水平,降低脾脏TNF-α的表达水平,上调脾脏组织中NF-κBP65mRNA的表达,提示“加味四君子汤”可能通过调控NF-κB信号通路的表达,导致IL-2表达水平上调、TNF-α的表达水平下调,并通过细胞因子之间的相互调节作用,增加机体的体液免疫、控制机体的高炎性状态,从而延缓老龄大鼠的炎性免疫衰老。

全文目录


中英文词汇对照表  5-6
摘要  6-8
ABSTRACT  8-11
引言  11-13
材料和方法  13-23
结果  23-29
讨论  29-33
结论  33-34
附图  34-37
参考文献  37-40
综述  40-52
  参考文献  48-52
致谢  52-53

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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