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血红素加氧酶参与细胞分裂素对暗诱导小麦离体叶片衰老的缓解作用
作 者: 黄晶晶
导 师: 沈文飚
学 校: 南京农业大学
专 业: 生物化学与分子生物学
关键词: 血红素加氧酶 细胞分裂素 暗诱导衰老 离体小麦叶片
分类号: S512.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要
血红素加氧酶(Heme oxygenase, HO, EC 1.14.99.3)是动物体内一种重要抗氧化酶。近年来,HO参与植物对多种非生物胁迫的调节作用已被初步证实。本研究把HO系统引入到细胞分裂素(CTK)对小麦离体叶片暗诱导衰老的缓解作用中,从而探究HO参与CTK缓解植物叶片衰老的可能机理。本研究发现,6-BA在缓解暗诱导下小麦离体叶片的叶绿素和可溶性蛋白降解过程中,还上调了HO的活性、HO-1转录本和HO-1蛋白的表达;叶绿素、可溶性蛋白和TBARS含量的结果证明,HO-1活性抑制剂锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)能够逆转6-BA对暗诱导下小麦离体叶片衰老的缓解作用,HO-1活性的诱导剂(Hemin)则能够一定程度的缓解小麦离体叶片的衰老;ZnPPⅨ不同程度的逆转了6-BA对暗诱导下小麦离体叶片的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的总活性、同工酶活性以及相关转录本的调节,Hemin则在一定程度上上调了上述指标。以上的研究结果表明,HO可能部分参与了CTK对暗诱导下小麦离体叶片衰老的缓解作用。
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全文目录
摘要 6-7ABSTRACT 7-8缩略词表 8-10第一章 文献综述 10-20 第一节 植物叶片的衰老 10-13 1 植物叶片衰老的特征与机理 10-13 (1) 叶绿素含量的变化 11 (2) 蛋白质含量的变化 11 (3) 活性氧的伤害和代谢 11-12 (4) 植物激素 12-13 2 植物叶片衰老的研究系统 13 第二节 CTK与植物叶片衰老 13-16 1 CTK的合成、运输及代谢 14-15 2 CTK缓解植物叶片衰老 15-16 第三节 血红素加氧酶的研究进展 16-19 1 HO的生物学效应 16-17 2 CO的生理学功能 17-18 3 胆红素的生理学功能 18-19 4 Fe~(2+)的生理学功能 19 第四节 本研究的目的和意义 19-20第二章 HO参与CTK对暗诱导小麦离体叶片衰老的缓解作用 20-32 第一节 材料与方法 20-23 1 材料培养 20 2 试剂 20 3 材料处理 20-21 4 叶绿素含量的测定 21 5 可溶性蛋白含量的测定 21 6 HO的提取及活性测定 21 7 TBARS含量的测定 21 8 抗氧化酶的提取和活性测定 21-22 9 总RNA的提取和半定量RT-PCR 22-23 10 HO-1的Western blot 23 11 同工酶活性电泳 23 12 统计分析 23 第二节 结果与分析 23-32 1 6-BA对暗诱导后小麦离体叶片衰老的缓解作用 23-24 2 6-BA对HO活性、HO-1转录水平和HO-1蛋白表达的影响 24 3 6-BA、HO-1活性抑制剂ZnPPIX和诱导剂Hemin对衰老指标及HO活性的影响 24-27 4 6-BA、HO-1活性抑制剂ZnPPIX和诱导剂Hemin对抗氧化酶活性及其转录本的影响 27-28 5 6-BA、HO-1活性抑制剂ZnPPIX和诱导剂Hemin对抗氧化酶同工酶的影响 28-32讨论 32-36 1 CTK对小麦离体叶片衰老的延缓作用 32 2 HO部分参与CTK对小麦离体叶片衰老的缓解作用 32-33 3 HO/CO系统作为植物激素的下游信号 33-36参考文献 36-42致谢 42
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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 禾谷类作物 > 麦 > 小麦
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