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癸氧喹酯在鸡的安全性及其组织残留HPLC检测方法研究

作　者: 桂淦
导　师: 卜仕金
学　校: 扬州大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 癸氧喹酯鸡靶动物安全性鸡组织高效液相色谱残留
分类号: S858.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

鸡球虫病是危害养鸡业的重要疾病之一,目前药物防治依然是当前防治鸡球虫病最有效的方式。为评价癸氧喹酯溶液临床使用的安全性及监控其在动物性食品中的残留,本研究分别就其在靶动物的安全性、鸡组织(肌肉、肝脏、肾脏)中残留的HPLC检测方法进行研究,一方面为癸氧喹酯溶液在靶动物——鸡的应用安全性提供有关数据资料,同时也为今后对该药物在鸡组织中的残留消除和监控提供技术手段。1、靶动物的安全性研究:100只8日龄健康肉鸡,随机分成5组,分别为癸氧喹酯溶液的推荐剂量组(15mg/L)、3倍推荐剂量组(45mg/L)、5倍推荐剂量组(75 mg/L)、10倍推荐剂量组(150 mg/L),以及不给药空白对照组,每组20只。癸氧喹酯溶液各实验组连续饮水给药21d。试验结束后,所有鸡逐只称重,测定试验鸡血液学和血液生化学参数,并进行眼观和组织病理学检查。结果表明,与对照组相比,癸氧喹酯溶液各剂量组的血液学和血液生化参数均无明显差异(p<0.05),5倍及以下推荐剂量组的眼观和组织病理学检查亦未见任何异常变化,但在10倍推荐剂量组,个别鸡肝脏出现轻微病理学变化。试验结果还提示,癸氧喹酯溶液具有一定促生长和提高饲料利用率作用。安全性试验结果表明,该癸氧喹酯溶液在靶动物鸡的使用是安全的。2、残留检测方法的研究:鸡组织样品经乙腈和乙酸乙酯提取,正己烷液-液萃取,C18小柱固相萃取净化后,用流动相溶解残渣,进行HPLC检测。流动相为乙腈-甲醇-水(55/25/20, v/v/v,加入3.4g/L氯化镁),紫外检测波长330nm。检测结果表明,癸氧喹酯标准工作液在0.2~5.0mg/L浓度范围内线性关系良好(R2≥0.9998),方法检测限为0.1mg/kg,定量限为0.2mg/kg。组织中药物添加浓度分别为0.5 mg/kg、1mg/kg、5mg/kg时,肌肉样品中药物回收率为88.60%~89.09%,日内变异系数为3.63%~5.86%,日间变异系数为4.68%~6.10%;肝脏样品中药物回收率为72.68%~80.01%,日内变异系数为6.24%~8.27%,日间变异系数为6.82%~7.79%;肾脏样品中药物回收率为79.95%~85.39%,日内变异系数为4.29%~5.54%,日间变异系数为4.57%~5.13%。本试验所建立的检测方法和技术参数能够满足鸡组织中癸氧喹酯残留的检测要求。

全文目录

中文摘要  4-5
ABSTRACT  5-11
符号说明  11-12
第一章文献综述  12-26
  1 抗球虫药物的种类  12
  2 抗球虫药的作用机制  12-13
    2.1 竞争性抑制，干扰虫体代谢  12-13
    2.2 抑制核酸的合成  13
    2.3 抑制虫体内线粒体的功能  13
    2.4 干扰虫体生物膜的离子转运  13
  3 球虫对抗球虫药的耐药性  13-18
    3.1 鸡球虫耐药性概述  13-14
    3.2 耐药性产生的机制  14-15
    3.3 球虫耐药性的特点  15-16
    3.4 检测耐药性的方法  16-17
    3.5 耐药性的获得方法  17
    3.6 耐药敏感性的恢复  17-18
  4 抗球虫药的使用方法  18-19
    4.1 连续用药法  18
    4.2 间断用药法  18
    4.3 轮换用药法  18
    4.4 穿梭用药法  18
    4.5 联合用药法  18-19
  5 癸氧喹酯抗球虫药  19-24
    5.1 癸氧喹酯概况  19-20
    5.2 癸氧喹酯的抗球虫活性及应用  20-21
    5.3 癸氧喹酯的残留消除研究  21-22
    5.4 癸氧喹酯的安全毒理学研究  22-23
    5.5 癸氧喹酯的残留检测技术研究  23-24
  6 研究的目的和意义  24-26
第二章癸氧喹酯溶液在靶动物鸡的安全性研究  26-38
  1 材料  26-27
    1.1 供试药品  26
    1.2 试验动物  26
    1.3 试验动物入选和剔除标准  26
    1.4 试验仪器与试剂  26-27
    1.5 试剂的配置  27
  2 方法  27-30
    2.1 试验动物分组与给药  27-28
    2.2 临床观察  28
    2.3 眼观病理学检查  28
    2.4 血液学检查  28-29
    2.5 血液生化学检查  29
    2.6 组织病理学检查  29-30
  3 数据统计分析  30
  4 结果  30-37
    4.1 一般临床观察  30
    4.2 增重与饲料利用率  30-31
    4.3 血液学检测结果  31
    4.4 血液生化学检测结果  31-34
    4.5 组织病理学检查  34-37
  5 讨论  37
  6 结论  37-38
第三章鸡组织中癸氧喹酯残留HPLC 检测方法的建立  38-54
  1 材料  38-40
    1.1 仪器  38-39
    1.2 试剂  39-40
    1.3 药品  40
    1.4 试液的配制  40
  2 方法  40-43
    2.1 样品的制备与保存  40
    2.2 试样的制备  40
    2.3 样品前处理  40-42
    2.4 色谱条件  42
    2.5 标准曲线的绘制  42
    2.6 检测限（LOD）和定量限（LOQ）的测定  42
    2.7 准确性测定  42-43
    2.8 精密度测定  43
    2.9 稳定性观察  43
  3 结果  43-51
    3.1 色谱行为  43-46
    3.2 标准曲线的建立  46-47
    3.3 检测限(LOD)和定量限(LOQ)  47
    3.4 添加回收率  47-49
    3.5 精密度  49-50
    3.6 稳定性观察  50-51
  4 讨论  51-54
    4.1 样品提取方法的选择  51-52
    4.2 净化  52-53
    4.3 检测条件的选择与优化  53
    4.4 检测方法的评价  53-54
全文结论  54-55
参考文献  55-60
致谢  60-61
攻读学位期间发表的学术论文目录  61

癸氧喹酯在鸡的安全性及其组织残留HPLC检测方法研究

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