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降解魔芋多糖对三硝基苯磺酸诱导实验性结肠炎的作用

作　者: 王慧
导　师: 梅其炳；刘莉；杨铁虹
学　校: 第四军医大学
专　业: 药理学
关键词: 魔芋多糖降解地塞米松溃疡性结肠炎 2,4,6-三硝基苯磺酸
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:溃疡性结肠炎是一种与免疫失调、基因易感及菌群紊乱相关的自身免疫性疾病[1],以结肠粘膜非特异性炎症反应、溃疡形成为病理特征;目前尚缺乏有效的治疗措施。魔芋是保健品及药品的常用添加剂,主要做为赋形剂使用。研究表明,魔芋具有良好的胃肠道功能调节作用,其有效成分葡甘露聚糖,具有肠粘膜保护及抑瘤、增强免疫、调节血脂、降低血糖等作用[2],但由于分子量大,粘度高,遇水形成凝胶,不易吸收。我们曾以魔芋精粉给大鼠灌胃,魔芋精粉在胃内及肠道溶胀,导致大鼠大便秘结,难以呈现有效治疗作用。本研究将魔芋多糖经过酸碱水解,降低黏度、减小分子量;用于TNBS诱导实验性大鼠结肠炎,观察降解魔芋多糖(degraded amorphophallus konjac polysaccharides ,DAKP)的治疗作用,以探讨魔芋胃肠道调节作用的效用成分。方法:采用甲醇皂化、酸水解方法降解魔芋粗多糖,经过透析、浓缩、乙醇沉淀,冷冻干燥,获得DAKP。实验性结肠炎以TNBS直肠给予雄性SD大鼠诱导,给予TNBS 6 h后,采用DAKP (50,100,200 mg/kg )灌胃给予治疗,以地塞米松(0.2 mg/kg,dexamethasone,DX)为阳性对照,每天一次,共5 d。第6 d,乙醚麻醉大鼠,腹腔巨噬细胞计数,以ELISA方法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)水平;截取8 cm结肠,称重、计算溃疡面积和结肠指数,取结肠组织2 cm福尔马林固定,HE染色,分离结肠粘膜,液氮速冻,待测髓过氧化物酶(myeloperoxidase , MPO)活性;并取胸腺、脾脏称重。结果:1.经薄层层析验证DAKP组成为葡萄糖和甘露糖,其分子量为5.8×104Da;黏度为4.4 Pa.s;糖含量为88.5%。2.与模型组相比,DAKP中、高剂量能显著降低结肠指数[(6.21±1.6),(6.13±2.1) vs (7.83±2.4);P<0.05],缩小结肠溃疡面积[(31.8±8.1)%,(30.9±6.4)% vs (41.5±9.1)%;P<0.05] ;缓解粘膜水肿;降低结肠炎大鼠肠粘膜MPO水平[(5.82±2.23),(5.12±1.02) vs (9.72±2.34);P<0.05], DAKP中、高剂量组的巨噬细胞数目及TNF-α表达低于模型组[(3.3±0.87),(2.9±0.85) vs (5.3±0.91);(215.1±7.2),(201.3±5.5) vs (306.9±8.1) ;P<0.05]。3.与地塞米松组相比,DAKP疗效无显著性差异。DAKP可显著对抗TNBS引起的脾脏肿大和胸腺萎缩;而地塞米松组(DX)则进一步使胸腺萎缩,呈现明显的免疫抑制作用。结论:1. DAKP与魔芋粗多糖相比,具有分子量小,黏度低,糖含量高的优点,提高水溶性。2.DAKP对TNBS诱导的实验性结肠炎具有良好的治疗作用,与地塞米松相比,疗效无显著差异;且没有地塞米松的免疫抑制副作用。3. DAKP对TNBS诱导的大鼠结肠炎具有显著治疗作用,呈现一定的抗炎作用;低分子DAKP可能是魔芋调节胃肠道功能的主要有效成分。

全文目录

缩略语表  5-6
中文摘要  6-9
英文摘要  9-12
文献回顾  12-32
前言  32-34
正文  34-52
  第一部分魔芋多糖的水解  34-42
    1 实验材料  34-35
    2 实验方法  35-38
    3 实验结果  38-40
    4 讨论  40-42
  第二部分降解魔芋多糖对三硝基苯磺酸诱导实验性结肠炎的作用  42-52
    1 实验材料  42-43
    2 试验方法  43
    3 实验结果  43-51
    4 讨论  51-52
小结  52-53
参考文献  53-60
个人简历  60
发表论文  60-61
致谢  61

降解魔芋多糖对三硝基苯磺酸诱导实验性结肠炎的作用

内容摘要

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