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微生物发酵产物LMC对卵巢癌细胞抑制作用的研究

作　者: 王雪茵
导　师: 高文远；蔡兵
学　校: 天津大学
专　业: 生药学
关键词: 卵巢癌 A2780 G0/G1期阻滞 多药耐药
分类号: R737.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


本论文研究了由微生物发酵并提纯的活性单体成分LMC对人卵巢癌细胞株A2780的体外抗癌作用。我们首先利用SRB法检测了LMC对人卵巢癌细胞A2780的增殖抑制活性,其半数抑制浓度（IC50）值为1.376±0.385μM。可见LMC对A2780呈现剂量依赖性的增殖抑制作用,且当药物浓度达到1μM（包括1μM）以上时,其增殖抑制作用明显增强。用FCM检测LMC在A2780细胞上的作用特点,发现sub-G1期细胞百分含量基本不变,G0/G1期细胞的百分含量明显增加,且呈时间依赖性。可见LMC对细胞的增殖抑制并非由凋亡引起,而应该是G0/G1期阻滞作用。我们也检测了LMC对多药耐药细胞A2780/cDDP的作用。LMC对A2780/cDDP细胞株仍有较强的增殖抑制作用和G0/G1期阻滞,其作用强度与对非耐药A2780瘤株的作用强度相似。这说明LMC对耐药株也有强大的杀伤作用,是很具开发价值的抗肿瘤药。用蛋白印迹分析LMC对相关蛋白表达的影响,1μM的LMC作用于A2780细胞后,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂P21和P27明显增多,Cyclin D1明显减少;细胞周期蛋白Cyclin E可观察到有减少趋势,但不如Cyclin D1明显。以上这些G0/G1期相关蛋白的变化都具有明显的时间依赖性。其余各相关蛋白如P21的转录因子P53、细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4和对G1期向S期过渡起“闸门”作用的Rb蛋白都无显著变化。提示LMC对A2780细胞较强的增殖抑制作用可能是通过G0/G1期阻滞作用而发挥作用的。

全文目录


中文摘要  2-3
ABSTRACT  3-6
第一章 文献综述  6-12
  1.1 卵巢癌研究进展和化疗耐药  6-7
  1.2 细胞周期调控与卵巢癌的发生  7-11
  1.3 课题的提出  11-12
第二章 LMC 对A2780 细胞的增殖抑制作用  12-21
  2.1 细胞培养  12-15
  2.2 体外增殖抑制活性  15-16
  2.3 细胞周期作用  16-21
第三章 LMC 对A2780/cDDP 细胞的增殖抑制作用  21-26
  3.1 体外增殖抑制活性  21-22
  3.2 细胞周期作用  22-25
  3.3 讨论  25-26
第四章 LMC 对细胞周期相关蛋白表达的影响  26-36
  4.1 材料和试剂  26-30
  4.2 实验方法  30-31
  4.3 实验结果  31-32
  4.4 讨论  32-36
第五章 结果  36-37
参考文献  37-43
发表论文及科研情况说明  43-44
致谢  44

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 卵巢肿瘤
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