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健脾疏肝解毒方对大鼠肝癌c-myc、p16基因表达影响的研究

作　者: 安云
导　师: 曹勇
学　校: 暨南大学
专　业: 中西医结合临床
关键词: 健脾疏肝解毒方 诱发性大鼠肝癌 RT-PCR c-myc p16
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 59次
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内容摘要


目的:观察健脾疏肝解毒方对诱发性大鼠肝癌形成,以及对肝癌组织c-myc、p16基因表达的影响,探讨其防治作用及其机理,以期为临床运用健脾疏肝解毒方防治肝癌,特别是早期肝癌提供客观的实验依据。方法:将6周龄雄性SD大鼠共72只,随机分为DEN对照组,中药高、低剂量组,脾虚肝郁病证组(简称病证模型组),病证中药高、低剂量组,每组12只。分组后,采用间断饮用95μg/L DEN水的方法建立大鼠肝癌模型,脾虚肝郁病证模型组采用给予间断饮用DEN水,同时采用郁怒、中药大黄灌胃等方法建立病证模型。中药高、低剂量组和病证中药高、低剂量组分别按30mg/kg、10mg/kg给予中药,DEN对照组和病证模型组给予生理盐水,连续150d,期间定时检测大鼠体重及行为学改变,第163d处死大鼠,称取大鼠体重、肝脏、脾脏,计算脾指数、肝指数。运用RT-PCR技术检测肝癌组织c-myc、p16基因表达。结果:实验结束时,DEN对照组大鼠少动,饮食减少,大便稀溏,毛发尚顺整;中药高剂量组大鼠毛发、情绪、饮食等均较正常;中药低剂量组大鼠情绪也较正常,但饮食减少,大便稍稀,毛发尚顺整;病证模型组大鼠对外界较少兴奋,情绪不稳,体重减轻,肛门污秽;病证中药高剂量组大鼠状态一般,大便成形,毛发略不泽;病证中药低剂量组治疗后,大鼠少动,情绪不稳,饮食减少,毛发略好。DEN对照组大鼠的正常肝小叶结构破坏,被假小叶取代,增生的纤维组织分割原来的肝小叶并包绕成大小不等的圆形或类圆形肝细胞团,可见中央静脉缺如,少量肝细胞核,其核仁增大或数量增加明显,门管区炎症细胞浸润稍多,肝小叶周边纤维化更加明显;中药高剂量组大鼠的肝小叶周边纤维化比DEN对照组大鼠明显减少,门管区炎症细胞较少;中药低剂量组大鼠的肝小叶周边纤维化,门管区炎症细胞比对照组稍减轻;病证结合组大鼠的肝细胞排列紊乱,肝细胞部分有空泡化,坏死,肝细胞大小不一,形状不规则,细胞核大,部分肝细胞细胞体积大,有异型性,周围血管增生加重;病证中药高剂量组大鼠的肝细胞排列紊乱,细胞有不同程度的坏死、增生,炎性改变;病证中药低剂量组大鼠的肝细胞坏死、增生较中药高剂量组严重;中药高剂量组大鼠的脾指数明显高于DEN对照组(P＜0.01),中药低剂量组大鼠的脾指数也高于DEN对照组(P＜0.05);DEN对照组肝指数明显高于中药高、低剂量组(P＜0.01);DEN对照组大鼠与中药高、低剂量组大鼠的c-myc mRNA相比,其表达量增高,并有统计学意义(P＜0.01);DEN对照组大鼠与中药高、低剂量组大鼠的p16 mRNA相比,其表达量降低,并有统计学意义(P＜0.01)。病证模型组大鼠的脾指数与病证中药高剂量组相比较低(P＜0.01);病证模型组大鼠的肝指数与病证中药高剂量组相比较低,并有显著地差异(P＜0.01);病证模型组大鼠与病证中药高剂量组大鼠的c-myc mRNA有显著增高,且有统计学意义(P＜0.01),与低剂量组相比较高,其差异有统计学意义(P＜0.05);病证模型组大鼠与病证中药高剂量组大鼠的p16 mRNA的表达量有明显的降低(P＜0.01)。结论:健脾疏肝解毒方对DEN诱发性大鼠肝癌的形成有明显的防治作用,其作用机制可能与降低肝癌组织c-myc基因以及抑制p16基因的失活有关;在脾虚肝郁刺激因素下更容易诱发肝癌,健脾疏肝解毒方对诱发性大鼠的免疫器官指数也有显著地增强作用。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-8
目录  8-9
前言  9-12
1 健脾疏肝解毒方对诱发性大鼠肝癌的作用及作用机制的研究  12-28
  1.1 大鼠肝癌模型的建立  12-13
  1.2 健脾疏肝解毒方对诱发性肝癌大鼠行为活动及体重的影响  13-15
  1.3 健脾疏肝解毒方对诱发性肝癌大鼠免疫器官的影响  15-17
  1.4 健脾疏肝解毒方对诱发性大鼠肝癌组织病理形态学影响  17-19
  1.5 健脾疏肝解毒方对诱发性大鼠肝癌c-myc、p16 mRNA表达的影响  19-26
  1.6 健脾疏肝解毒方对诱发性肝癌大鼠肝指数的影响  26-28
2 健脾疏肝解毒方对脾虚肝郁大鼠肝癌的作用及机制的研究  28-40
  2.1 脾虚肝郁大鼠肝癌的建立  28-31
  2.2 健脾疏肝解毒方对脾虚肝郁肝癌大鼠行为活动及体重的影响  31-33
  2.3 健脾疏肝解毒方对脾虚肝郁肝癌大鼠免疫器官的影响  33-35
  2.4 健脾疏肝解毒方对脾虚肝郁大鼠肝癌组织病理形态学影响  35
  2.5 健脾疏肝解毒方对脾虚肝郁大鼠肝癌c-myc、p16 mRNA表达的影响  35-38
  2.6 健脾疏肝解毒方对脾虚肝郁肝癌大鼠肝指数的影响  38-40
3 讨论  40-55
  3.1 中医对肝癌防治机理的认识  40-42
  3.2 c-myc和p16基因mRNA表达与肝癌形成  42-44
  3.3 健脾疏肝解毒方的主要药物的药理概括  44-49
  3.4 模型的评价  49-53
  3.5 健脾疏肝解毒方对诱发性肝癌大鼠免疫器官的影响  53-55
4 结论  55-56
参考文献  56-64
附图  64-65
主要缩略语中英文对照表  65-66
附录  66-67
致谢  67

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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