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大豆种子老化的生理生化特征和RAPD分析

作　者: 闫慧娟
导　师: 周小梅
学　校: 山西大学
专　业: 植物学
关键词: 大豆种子老化生理生化 RAPD分析
分类号: S565.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

本试验通过对不同贮藏年份和58±1℃热水老化的大豆进行生理生化指标、贮藏糖类和膜脂的测定以及基因组DNA的RAPD分析,探讨自然和人工老化条件下大豆种子中的一些生理生化指标、糖类和膜脂脂肪酸含量及DNA的变化规律,为研究种子老化机制提供理论依据和参考。试验结果如下：1.通过测定自然老化大豆的各生理生化指标,得出：随着贮藏年限的增加,大豆种子老化程度加深,发芽势、发芽率、发芽活力和发芽指数均呈现下降的趋势,其中活力指数下降的最快；种子浸出液的相对电导率和可溶性糖含量呈现升高的趋势；胚轴中的丙二醛(MDA)随老化逐渐升高；老化大豆种子中的抗氧化物酶(SOD、POD和CAT)和脂肪水解酶随老化时间的延长,活性均有所下降,其中POD下降的最显著,对应的同工酶电泳也显示了条带亮度的逐渐变暗或消失。2.随贮藏年限的延长,自然老化大豆种子的胚轴和子叶中几种糖的变化是胚轴中单糖(半乳糖、肌醇)含量基本不变,蔗糖含量下降；子叶中的单糖略微增加、蔗糖含量先升后降,蜜二糖含量略有增加。人工老化大豆的胚轴中半乳糖、肌醇、蔗糖、蜜二糖有不同程度的下降,以蔗糖降低的最显著；子叶除蜜二糖略降外,其他糖的变化不大。总体上,人工老化大豆胚轴中糖含量的变化幅度比子叶中的大,但比自然老化胚轴中的小3.自然老化大豆胚轴中棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸的含量变化趋势相似,都随老化的加深呈先降后升再降变化,不饱和与饱和脂肪酸比值升高,单个脂肪酸占总脂肪酸的比例中较明显的是亚油酸的比例升高、亚麻酸比例下降；子叶中的五种脂肪酸含量呈下降趋势。人工老化大豆胚轴和子叶中的五种脂肪酸含量变化基本一致,都呈降低趋势,且不饱和与饱和脂肪酸比例降低,而胚轴中棕榈酸和硬脂酸的比例上升。4.通过对老化大豆基因组DNA的RAPD分析得出,自然老化大豆胚轴DNA的多态性条带比率小于子叶中的,且大于人工老化大豆胚轴的；老化大豆DNA间的遗传相似系数随老化时间的延长而降低,并且自然老化大豆胚轴的遗传相似系数范围和平均值均大于人工老化大豆胚轴中的值。

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摘要 8-9ABSTRACT 9-11第一章文献综述 11-18 1.1 种子老化 11-16 1.1.1 种子老化的生理生化变化 11-16 1.1.2 种子老化的遗传结构变化 16 1.2 本试验的研究目的和意义 16-18第二章老化大豆种子活力、酶活性等变化的研究 18-31 2.1 试验材料和方法 18-19 2.1.1 试验材料 18 2.1.2 发芽试验和种子活力测定 18 2.1.3 生理生化指标的测定 18-19 2.1.4 统计方法 19 2.2 结果与分析 19-27 2.2.1 老化对种子活力的影响 19-20 2.2.2 老化对种子浸出液电导率和可溶糖的影响 20-22 2.2.3 老化对种子胚轴中MDA的影响 22 2.2.4 老化对种子中脂肪水解酶的影响 22-23 2.2.5 老化对种子抗氧化物酶的影响 23-24 2.2.6 老化对种子胚轴中抗氧化物同工酶的影响 24-25 2.2.7 老化种子中生理生化所测各指标间的相关关系 25-27 2.3 讨论 27-31 2.3.1 种子活力与老化的关系 27 2.3.2 浸出液电导率、可溶糖和老化的关系 27-28 2.3.3 脂肪水解酶和老化的关系 28-29 2.3.4 抗氧化物酶活性和老化的关系 29 2.3.5 抗氧化物同工酶和老化的关系 29-31第三章老化大豆种子中糖类和膜脂的变化 31-48 3.1 材料和方法 31-32 3.1.1 试验材料 31 3.1.2 试验方法 31-32 3.1.3 统计方法 32 3.2 结果与分析 32-46 3.2.1 老化大豆中糖类含量的变化 32-38 3.2.2 老化大豆种子中膜脂脂肪酸的变化 38-46 3.3. 讨论 46-48 3.3.1 老化大豆中糖类的变化 46-47 3.3.2 老化大豆中膜脂脂肪酸的变化 47-48第四章老化大豆种子的RAPD分析 48-54 4.1 材料和方法 48 4.1.1 试验材料 48 4.1.2 试验方法 48 4.1.3 数据分析 48 4.2 结果与分析 48-53 4.2.1 PCR扩增产物及多态性分析 48-51 4.2.2 不同老化程度大豆的遗传相似系数 51-53 4.3 讨论 53-54参考文献 54-61附录 61-62致谢 62-64

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