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RCG的纯化与鉴定及体外诱导人胃癌细胞MGC80-3凋亡的研究

作　者: 王洪建
导　师: 郭斌
学　校: 辽宁医学院
专　业: 微生物与生化药学
关键词: 魟鱼软骨多糖 聚丙烯酰胺凝胶电泳 鉴定 胃癌细胞MGC80-3 凋亡
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 9次
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内容摘要


目的以人胃癌MGC80-3细胞株为靶细胞,观察其在不同浓度的魟鱼软骨多糖(Ray Cartilage Glycosaminoglycans,RCG)作用后形态学的改变以及诱导凋亡及抑制增殖的作用,并进一步探讨其作用的时间、剂量—效应关系,为RCG用于胃癌的治疗提供初步的理论依据。方法本文共分两个部分,第一部分参考相关文献对RCG进行提纯,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和高效凝胶渗透色谱法,对RCG进行鉴定。第二部分依据抗肿瘤药物临床前药效学评价的模式和方法,体外培养人胃癌MGC80-3细胞,采用CCK-8法观察不同浓度的RCG对其细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞仪观察细胞的凋亡及生长周期的变化;采用吖啶橙染色细胞,荧光显微镜下观察细胞的形态学改变。结果RCG经纯化,基本实现了多糖的分离,聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于RCG的鉴定。CCK-8法显示各浓度RCG均能抑制MGC80-3的增殖,且在一定剂量和时间范围内,其抑制率呈浓度、剂量依赖关系;流式细胞仪观察到各浓度RCG使细胞周期主要被阻滞于G1期;吖啶橙染色显示,凋亡细胞体积缩小、细胞核固缩、核碎裂、细胞解离成凋亡小体。结论聚丙烯酰胺凝胶电泳重现性较好,简单易行,可用于RCG的鉴定。RCG能有效的抑制人胃癌MGC80-3细胞的生长,诱导其凋亡。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
英文缩略语  8-9
前言  9-11
第一部分 魟鱼软骨多糖的分离纯化与鉴定  11-18
  实验材料  11-12
  实验方法  12-14
  结果  14-16
  讨论  16-17
  结论  17-18
第二部分 魟鱼软骨多糖体外诱导人胃癌细胞MGC80-3 凋亡的研究  18-26
  实验材料  18-19
  实验方法  19-20
  实验结果  20-24
  讨论  24-25
  结论  25-26
本研究创新性的自我评价  26-27
参考文献  27-30
附录  30-39
  一、文献综述  30-36
    参考文献  33-36
  二、在学期间科研成绩  36-37
  三、致谢  37-38
  四、个人简介  38-39

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胃肿瘤
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