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20s Proteasome在人的年龄相关性白内障晶状体中的表达

作　者: 李卉
导　师: 张辉
学　校: 吉林大学
专　业: 临床医学
关键词: 20s Proteasome 年龄相关性白内障酶活性 Western-Blot
分类号: R776.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

20s Proteasome具有水解正常与异常蛋白质的功能,在细胞周期、凋亡、信号传导等生理活动中发挥重要的调节作用。它的结构特点是由4个相似的环状结构叠加在一起构成的圆柱状复合物,两个外环分别由7个α亚基组成,为底物进入其内腔的通道；两个内环分别由7个不同的p亚基构成,其N一末端的苏氨酸残基是催化蛋白质水解的活性中心,其中的p1、β2、β5亚基分别具有肽酰谷氨酰肽(PGPH)水解作用、胰蛋白酶样(T-L)水解作用和糜蛋白酶样(CT-L)水解作用。现已有研究表明,细胞内大部分氧化蛋白质的降解是由不依赖于泛素(泛素是指存在于大多数真核细胞中,且高度保守的一种小蛋白质。它由76个氨基酸残基组成,几乎存在于所有的物种中,主要功能是标记需要分解掉的蛋白质。)和ATP的20s Proteasome完成的。而真核细胞中的20s Proteasome可分布在细胞内的几乎所有位置,并且随着年龄的增加,其活性、含量等均有所改变。为了探讨20 s Proteasome与人的年龄相关性白内障发病的关系,本实验选取2009-2010年度所收集到年龄相关性白内障患者中行非超声乳化小切口手术中所摘除的晶状体为研究对象,检测20s Proteasome是否随着晶状体混浊程度及核硬度的变化而变化。实验研究如下：通过Western-Blot的实验方法来检测20s Proteasome在不同混浊程度及核硬度的人的年龄相关性白内障的晶状体中的含量变化；并应用酶活性测定法检测上述不同程度的白内障晶状体中20s Proteasome的活性变化。Western-Blot方法检测结果和酶活性测定结果如下：在人的年龄相关性白内障的晶状体中,随着其混浊程度及核硬度的增加,20s Proteasome含量表达呈降低的趋势,且酶的活性也呈下降的趋势。从上述结果推断20s Proteasome在人的年龄相关性白内障的形成过程中可能发挥重要作用。

全文目录

内容提要  4-5
中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-11
第1章绪论  11-19
  1.1 年龄相关性白内障的病因学研究进展  11-14
    1.1.1 正常人晶状体的生物化学及分子生物学  11-12
    1.1.2 年龄相关性白内障形成的相关因素  12-14
  1.2 20s proteasome的相关研究  14-17
    1.2.1 20s Proteasome的性质和特征  15-17
    1.2.2 20s Proteasome的年龄相关性改变  17
  1.3 总结  17-19
第2章材料与方法  19-26
  2.1 实验材料  19-20
    2.1.1 实验对象  19
    2.1.2 实验药品与试剂  19-20
    2.1.3 实验仪器  20
  2.2 实验方法  20-26
    2.2.1 Western-Blot法检测人的年龄相关性白内障的晶状体中20sProteasome的含量  20-23
    2.2.2 20s Proteasome蛋白酶活性测定的实验步骤  23-26
第3章结果  26-30
  3.1 20s Proteasome在年龄相关性白内障的晶状体中表达的结果  26-27
  3.2 20s Proteasome在人的年龄相关性白内障晶状体中酶活性的测定  27-30
第4章讨论  30-35
  4.1 晶状体的结构蛋白与年龄及白内障的关系  30-32
  4.2 20s Proteasome的表达与年龄相关性白内障的研究  32-33
  4.3 本实验结果:20s Proteasome的表达与年龄相关性白内障的关系  33-35
第5章结论  35-36
参考文献  36-41
致谢  41

20s Proteasome在人的年龄相关性白内障晶状体中的表达

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