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新型β-二酮-Eu（Ⅲ）荧光配合物的合成与应用

作　者: 王燕娇
导　师: 王桂兰
学　校: 大连理工大学
专　业: 分析化学
关键词: 铕配合物 β-二酮生物标记荧光探针牛血清白蛋白时间分辨荧光
分类号: O627.3
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

作为一种高灵敏度生化分析方法,时间分辨荧光分析技术已经广泛应用在在临床检测,并且在生命科学领域得到了长足发展与应用。本研究设计、合成并表征了一种新型p-二酮-铕(Ⅲ)荧光配合物,并探讨了其在生物标记中的应用。本文设计合成了一种可用于生物标记的新型p-二酮-铕(Ⅲ)荧光配合物：1,2-二(1”,1”,1”,2”,2”,3”,3”-七氟-4”,6”-己二酮-6”-基-对苄基)-4-氯磺酰基苯与铕(Ⅲ)的配合物(BHHBCB-Eu3+)。实验考察了表面活性剂对BHHBCB-Eu3+配合物荧光强度的影响,发现该配合物在含有50μmol/L溴化十六烷基三甲胺的pH值7.4的缓冲溶液中荧光强度最大,其荧光量子产率为72%,荧光寿命长达0.47ms。由于该配合物含有氯磺酰基,可在水溶液中与含有氨基的蛋白质等生物分子共价键合进而用于生物分子的荧光标记。以牛血清白蛋白(BSA)为模型生物分子,实验考察了BHHBCB-Eu3+对BSA的标记反应并制备出BHHBCB-Eu3+标记的BSA,荧光测定结果表明,BHHBCB-Eu3+标记BSA后仍保持了配合物原有的强荧光及长寿命荧光特性,荧光量子产率和荧光寿命分别为37%和0.43ms,表明BHHBCB-Eu3+可作为一种新型生物标记荧光探针用于时间分辨荧光生化分析领域。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-8
引言  8-9
1 文献综述  9-30
  1.1 时间分辨荧光生化分析技术的研究进展  9-17
    1.1.1 时间分辨荧光测定的原理  9-10
    1.1.2 稀土荧光配合物的发光机理及其荧光性质  10-12
    1.1.3 时间分辨荧光显微镜成像的研究进展  12-14
    1.1.4 时间分辨荧光技术在活性小分子检测中的应用研究  14-15
    1.1.5 时间分辨荧光免疫分析技术的应用  15-17
  1.2 稀土荧光配合物生物标记物的研究进展  17-28
    1.2.1 以β-二酮类化合物为配位体的稀土荧光配合物  17-22
    1.2.2 以芳香胺—羧酸类衍生物为配位体的稀土荧光配合物  22-26
    1.2.3 可见光激发的稀土荧光配合物  26-28
  1.3 稀土荧光配合物荧光光谱中的环境因素影响  28-29
  1.4 本论文的设计思想  29-30
2 新型β-二酮-Eu(Ⅲ)荧光配合物的合成与应用  30-47
  2.1 主要原料和试剂及分析仪器  30-31
    2.1.1 主要原料和试剂  30
    2.1.2 主要分析仪器  30-31
  2.2 新型β-二酮-Eu(Ⅲ)配合物的合成与表征  31-34
    2.2.1 配体BHHBCB的合成路线  31-32
    2.2.2 配体BHHBCB的合成  32
    2.2.3 配体BHHBB的表征  32-33
    2.2.4 配体BHHBCB的表征  33-34
  2.3 配合物BHHBB-Eu~(3+)与BHHBCB-Eu~(3+)的荧光性质  34-42
    2.3.1 配合物BHHBB-Eu~(3+)与BHHBCB-Eu~(3+)的荧光表征  35-37
    2.3.2 配合物BHHBB-Eu~(3+)与BHHBCB-Eu~(3+)的紫外—可见吸收光谱  37
    2.3.3 表面活性剂对BHHBB-Eu~(3+)和BHHBCB-Eu~(3+)荧光性质的影响  37-39
    2.3.4 等摩尔系列法测定BHHBCB-Eu~(3+)的配合比  39-41
    2.3.5 pH值对BHHBCB-Eu~(3+)荧光性质的影响  41-42
  2.4 BHHBCB用于BSA的标记  42-47
    2.4.1 BHHBCB标记BSA的制备  42-43
    2.4.2 BHHBCB对BSA的标记率  43-44
    2.4.3 BHHBCB-Eu~(3+)标记BSA的制备  44-45
    2.4.4 BHHBCB-Eu~(3+)标记BSA的荧光性质表征  45
    2.4.5 pH值对BSA-BHHBCB-Eu~(3+)荧光性质的影响  45-47
结论  47-48
参考文献  48-58
附录配体BHHBCB及其中间产物核磁共振谱图与质谱谱图  58-60
攻读硕士学位期间发表学术论文情况  60-61
致谢  61-62

新型β-二酮-Eu（Ⅲ）荧光配合物的合成与应用

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