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Agrin对体外损伤大鼠星形细胞迁移的作用

作 者: 巴晓群
导 师: 柯昌庶
学 校: 华中科技大学
专 业: 病理学与病理生理学
关键词: 集聚蛋白 星形细胞 迁移
分类号: R363
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 7次
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内容摘要


目的初步探讨外源性agrin对体外机械性损伤的大鼠大脑皮质星形细胞迁移的影响。方法1.大鼠大脑皮质星形细胞原代培养、纯化及传代。2.机械性划伤的复制和星形细胞迁移能力的测定:一次传代的单层培养星形细胞采用移液器蓝色枪头作“十”字形划伤,以迁移入划伤区星形细胞数(Na)和星形细胞距划伤边缘最大迁移距离(Dmax),作为评价agrin对星形细胞迁移影响的指标。3.观察划伤后0h、6h、12h、24h、48h、72h时间点体外培养星形细胞的Na和Dmax值,确定划伤后星形细胞迁移活跃时间段。应用不同浓度的外源性agrin (0ng/ml、5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml、100ng/ml),于划伤后60h观察对损伤星形细胞Na和Dmax的影响。在此基础上,选定agrin作用浓度组(5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml)及伤后不同时间点(24h、48h、60h),观察agrin对星形细胞迁移影响。Dmax测定用IPP6.0软件,所有数据均应用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果1.划伤72h星形细胞的Na和Dmax值均较伤后48h增加最显著(P<0.0001)。2.划伤后60h外源性agrin 5ng/ml组、10ng/ml组及20ng/ml组均较对照组星形细胞Na和Dmax值均有显著增加(P<0.05)。100ng/ml组,星形细胞的Na和Dmax则显著减少(P<0.05)。3.外源性agrin 5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml浓度组和在伤后24h、48h、60h,星形细胞的Na和Dmax均较对照组显著增加(P<0.05),以10ng/ml浓度组对于星形细胞迁移影响最为明显(P<0.05)。结论1.星形细胞在机械性划伤12h后开始出现迁移,划伤后48h-72h星形细胞迁移能力明显增加;2.外源性agrin的加入可影响损伤星形细胞的迁移。Agrin在一定浓度(5~20ng/ml)和作用时间范围(24~48h)内可显著促进损伤星形细胞迁移;但过高的agrin作用浓度(如50~100ng/ml)则抑制星形细胞迁移。

全文目录


摘要  5-7
Abstract  7-9
前言  9-11
材料和方法  11-15
  一. 材料  11
  二. 主要试剂及耗材  11-12
  三. 主要仪器设备  12
  四. 实验方法和步骤  12-15
结果  15-22
  1、星形细胞纯度的鉴定  15
  2、不同时间机械性划伤后星形细胞迁移的测定  15-18
  3、外源性 agrin 作用浓度范围的测定  18-20
  4、外源性 agrin 对星形细胞迁移作用的测定  20-22
讨论  22-26
结论  26-27
参考文献  27-30
综述 Agrin 在中枢神经系统创伤修复中作用的研究进展  30-44
  参考文献  39-44
致谢  44-46
附录  46

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 病理学 > 病理生理学
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